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1、荧光叶室讲解,基本原理,荧光发射的基本原理,1、光能：使基态Chl变成激发态2、一些电子从基态跃迁至激发态（S1,S2）3、电子从第一激发态落回基态,荧光为什么能够反映光合表现？,叶绿素荧光与光合作用,叶绿素荧光主要反映了PSII的生理 生化变化。叶绿素荧光：光反应阶段的各种变化。光反应：光合电子传递链，产生ATP（能量）和NADPH（还原力），同时放出O2。暗反应：固定CO2。,光合电子传递链（Z链）,远红光,开放的反应中心和关闭的反应中心,“关闭”RC：当反应中心的电子受体质体醌（QA）接受电子，全部处于还原状态时，不能再接受电子，我们称之为关闭的RC。“开放”RC：如果QA的电子传出，R
2、C的电子可以完全传递给QA，则此时RC称为开放的RC。,荧光参数,LI 6400光合荧光仪测定的参数直接测定荧光参数（一）,F0：最小初始荧光，又称基底荧光或暗荧光。指经过充分暗适应的光合机构光系统II（PSII）反应中心全部开放时的叶绿素（Chl）荧光发射强度。Fm：最大荧光。指经过充分暗适应的光合机构PSII反应中心完全关闭时的Chl荧光发射强度。,LI 6400光合荧光仪测定的参数直接测定荧光参数（二）,F0：光下最小荧光。在光适应状态下PSII反应中心完全开放时的Chl荧光发射强度。为了使照光后所有的PSII反应中心迅速达到最大开放程度，在测定前先用远红光进行照射。Fm：光下最大荧光。
3、在光适应状态下PSII反应中心完全关闭时的荧光发射强度。Fs：稳态荧光。又称Ft。,LI 6400光合荧光仪测定的参数间接计算荧光参数（一）,Fv/Fm：光化学量子效率，指没有遭受任何环境胁迫并经过充分暗适应叶片，其PSII最大的（潜在）光化学量子效率。一般植物恒定在0.75 0.85。也被称为开放的PSII反应中心的能量捕获效率。Fv/Fm=（Fm F0）/FmFv/Fm：光下开放的PSII反应中心的激发能捕获效率。Fv/Fm=（Fm-F0）/Fm,Fv/Fm,LI 6400光合荧光仪测定的参数间接计算荧光参数（二）,PSII：作用光存在时PSII实际的光化学量子效率，即PSII反应中心电荷
4、分离实际量子效率，反映了被用于光化学途径激发能占进入PSII总激发能的比例，植物光合能力的一个重要指标。PSII=（Fm-Fs）/FmETR：电子传递速率。ETR=PPFD PSII 0.84 0.5,LI 6400光合荧光仪测定的参数间接计算荧光参数（三）,qP：光化学淬灭系数。反映了PSII反应中心中开放 程 度，1 qP则反映了反应中心关闭程度，反映了QA的还原程度。qP=（Fm-Fs）/（Fm-F0）NPQ：非光化学淬灭系数。反映了植物热耗散的能力的变化,数值范围在 0 n(1,2,3,4,5)。NPQ=（Fm Fm）/Fm=Fm/Fm-1 qN：非光化学淬灭系数。与NPQ相同，现在使
5、用较少。数值范围为0 1。qN=(Fm Fm)/(Fm F0),荧光叶室的安装,使用镊子取下内置光量子传感器连接线。排气管和热偶电极。卸下四个螺丝，六个O形密封圈。更换上下盖。连接荧光叶室与分析器之间的电源连接线。连接辅助连线。白色密封圈的更换。暗适应夹子的使用方法。配置软件的安装。,软件介绍,新增参数行介绍,新增功能行介绍,基本实验,1、测量F0&Fm。2、测量F0、Fm&Fs。3、测量PSII、qP&qN&NPQ。4、荧光和气体交换参数同时测量。,荧光测量的基本步骤,实验1,实验2,实验3,实验1：植物暗适应状态的F0、Fm、Fv/Fm,打开一个文件（1，f1），输入文件名，添加备注。设置
6、测量光、饱和闪光（8，f2），保存设置。夹好叶片。等待dF/dt 绝对值 5或FlrCV%1。记录数据（按0，f1/f2/f3/f4）。查看数据（1，f2）。关闭文件（1，f3）。传输文件（同光合操作）。,实验2：植物光适应状态的F0、Fm、Fs、Fv/Fm,打开一个文件（1，f1），输入文件名，添加备注。设置测量光、饱和闪光和远红光（8，f2），保存设置。设置活化光强度（8，f3）。打开活化光（9，f4）夹好叶片。等待dF/dt 绝对值 5或FlrCV%1。记录数据（按0，f1/f2/f3/f4）。查看数据（1，f2）。关闭文件（1，f3）。传输文件（同光合操作）。,实验3：猝灭研究，测量P
7、SII、qP&qN&NPQ,1、打开一个文件（1，f1），输入文件名，添加备注。2、设置测量光、饱和闪光和远红光（8，f2），保存设置。3、设置活化光强度（8，f3）。4、夹好暗适应好的叶片。5、等待dF/dt 绝对值 5或FlrCV%1。记录数据（按0，f1/f2/f3/f4）。6、打开活化光（9，f4），等待植物适应光环境。7、等待dF/dt 绝对值 5或FlrCV%1。记录数据（按0，f1/f2/f3/f4）。8、查看数据（1，f2），关闭文件（1，f3）。9、传输文件（同光合操作）。,测量光的设置（8，f2）,Intensity：1/0.8;Modulation:0.25;Filter
8、:1;Gain:10.,饱和闪光的设置（8，f2）,Duration:0.8;Intensity:7/8;Blu:Nochange;Modulation:20;Filter:50.,远红光的设置（8，f2）,测量光、光化光和远红光的设置Flr Editor 与Flr Adjust的区别,按8,f2，进入Flr Editor（编辑荧光设置）按8,f4，进入Flr Adjust（设置荧光）区别和联系：第一种，修改完后，执行；第二种，边修改边执行。第一种设置可以设定小数点后的数值，第二种只能设置1的倍数。都可以设置上述三种光。,注意：,可以先将暗适应和光适应的测量程序设置好（8，f2），分别用独立的名字保存；然后根据测定对象在8，f1中调用相应的设置。测定暗适应植物，切忌打开活化光；反之，测定光适应植物，一定在夹叶片之前打开活化光。做猝灭时，暗适应和光适应的测量光与饱和闪光强度一定要对应一致。植物一定要有充足的暗适应和光适应！,谢谢各位老师、同学的支持与合作！,
