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荧光法测定维生素B2,实验3-4,一 实验目的,学习选择荧光激发和发射波长的方法掌握荧光定量分析方法掌握荧光光度计的基本构造和使用方法,二 实验原理,1 激发光谱与发射光谱,(激发),系间窜跃,kf,相对强度,萘的激发和荧光光谱,激发光谱,荧光光谱,2 定量分析方法,If=2.3 I0 l c=Kc,l c 0.05,If与c方呈线性关系,三 荧光光度计,荧光光度计示意图,2 分光系统(双单色器)第一单色器作用:选择激发波长第二单色器作用:分离出荧光发射波长,1 光源氙弧灯:250-800 nm连续光谱高压汞灯:线光谱,3 样品池 四面透光,4 检测器 光电倍增管,四 实验步骤,1.绘制维生素B2的激发光谱与发射光谱,激发光谱,发射光谱,2.维生素B2标准曲线的测定,3.水样中维生素B2含量的测定,