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1、体外抗体形成细胞的检测,定量溶血分光光度计法Quantitative Hemolytic Spectrophotometric determination（QHS）,SRBC免疫小鼠获取小鼠脾细胞 SRBC(Ag)+spleen cell(Ab)+ComplementMAC 裂解SRBC释放出血红蛋白分光光度计定量测定,Principle,anti-SRBC Ab,IMMUNIZE MOUSE,SRBC制备以NS洗涤防凝SRBC两次以 NS稀释成1.5108/mlComplement制备豚鼠血清(5)+SRBC(1)4吸收 30 min3000rpm离心15min，上清 1:10 稀释备用脾细
2、胞制备2107/ml 脾细胞(见步骤),Procedure,脾细胞的制备 SRBC免疫小鼠 4天后拉颈处死，取脾 200目铜网上研磨脾脏，收集脾细胞悬液2000rpm离心5min，弃上清 加4.5 ml DDW，振荡45秒,加入0.5ml 9%NaCL,2000rpm 离心 5min,弃上清（加5ml Hanks 液，混匀2000rpm 离心 5min，弃上清）加 1 ml Hanks 液(计数，调整细胞浓度为2107/ml),Procedure,混匀，37 孵育 1 h3000rpm 离心 5 min，取上清721分光光度计测413nm处OD值（Hb量）,Procedure,抗体形成细胞检测,1mm1mm0.1mm=0.1mm3=0.110-3ml=10-4ml,细胞浓度:,细胞数/ml=5个中格的细胞数 x 5x 104（RBC计数法）,细胞数/ml=4个大格的细胞总数/4 x104（WBC计数法）,
