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1、原生动物的系列实验,动物学综合性实验,一、实验目的,1、学习原生动物的采集、分离和培养的方法，学习在显微镜下对运动活泼的微型动物的观察方法，学习观察单细胞动物的行为、应激性等生命现象和规律的方法，并学会分析实验现象。2、通过对原生动物形态结构的观察，掌握原生动物的基本特征，进一步理解原生动物的单个细胞是一个完整的能独立生活的有机体。3、通过部分基础生理实验，认识原生质的应激性，了解草履虫的科学研究价值。4、通过学生自行查阅文献、选择实验项目、设计实验方案和合理安排实验程序，利用原生动物完成多个实验项目，初步培养学生独立设计实验、合理充分利用实验材料及采用多种实验技能进行综合的能力。,二、实验原
2、理,原生动物是动物界最低等、最简单、最原始的单细胞动物，但原生动物的单细胞是一个完整的能独立生活的有机体，能完成像高等动物一样各种各样的生命活动，对外界环境有非常敏感的应激性和适应性。草履虫是原生动物的代表动物，形态结构和生命活动充分展现了单细胞原生动物作为一个完整的、独立的动物有机体所具有的各种特征，而且草履虫对各种刺激的反应也说明应激性是其普遍特性，因此是生命科学基础理论研究的理想材料，在细胞生物学、细胞遗传学研究中尤其具有科学价值。将形态结构观察和生理实验组合进行，既能充分利用实验材料，有效地训练学生综合实验的能力，又能理论联系实际地培养和提高学生综合分析问题的能力，并加深对基础知识和基
3、本原理的理解和掌握。,三、实验方案,（一）原生动物的采集和分离培养1、原生动物的采集选择不同地点进行原生动物的采集，实验室显微镜下进行初步分类鉴定。2、草履虫的分离和培养每个小组选用一种方法进行草履虫分离（每个小组不同），并选择一种培养基（每个小组不同），自主设计合理的草履虫分离培养方案（学生自主选择设计）。根据每个小组的结果，比较草履虫在不同培养基中的生长和增殖状况，筛选最合适的培养方案，并对结果现象进行分析讨论，写出实验报告。,（二）草履虫活体观察1、草履虫临时装片的制备取限制草履虫迅速游动的棉花纤维、发丝、镜头纸或蛋白甘油粘贴剂等（学生自主选择）适量放于载玻片上，用滴管吸取草履虫培养液滴
4、一滴在障碍物中，盖上盖玻片，低倍镜下观察。2、草履虫的外部形态与运动体形，前后区分，纤毛观察，口沟。观察虫体周身纤毛的摆动和虫体如何旋转前进，以及遇到障碍时如何反应。3、草履虫内部构造的观察选择一个清晰活动缓慢的草履虫转高倍镜观察内部构造。表膜，外质，内质，刺丝泡，胞口，胞咽，食物泡，伸缩泡，收集管，细胞核（用次甲基蓝染色）表膜的观察：制作临时装片，晾干观察。,（三）食物泡的形成与变化用牙签蘸取少量洋红粉末掺入草履虫滴液中，混匀，做临时装片观察食物泡的形成、大小的变化及在虫体内环流的过程。,（四）草履虫的应激性实验1、刺丝泡的发射 制作草履虫临时装片，盖玻片一侧滴一滴用蒸馏水稀释20倍的蓝黑墨
5、水。高倍镜下观察射出的刺丝在草履虫体周围呈乱丝状。2、草履虫对酸刺激的反应用草履虫培养液滤液配置系列浓度的乙酸溶液（每小组一种浓度）。制作临时装片，滴加不同浓度的乙酸（用毛细滴管吸取，将尖端的醋酸液滴与玻片上草履虫液面轻轻接触，使酸缓缓地进入草履虫液层中央，以避免酸液的迅速扩散），观察草履虫动态。检测加入不同浓度乙酸后液层中草履虫聚集处和避开处的PH。根据本组和其它组的实验结果进行分析，说明草履虫对不同PH的趋性，找出草履虫最喜酸度。,3、草履虫对盐度变化的反应 配置系列浓度的氯化钠溶液（每个小组一种浓度自主选择），分别置于试管内，做好标记，不得混用。用不同浓度氯化钠溶液刺激草履虫。做一个蒸馏
6、水空白对照装片，其它加入不同浓度的氯化钠溶液。用毛细滴管（用毛细滴管只滴加极少量密集草履虫培养液于各玻片上的盐溶液中，以免稀释了氯化钠溶液）吸取密集草履虫培养液，分别滴入各载玻片溶液中。混匀，加纤维和盖玻片，五分钟后显微镜下观察。低倍镜转高倍镜观察伸缩泡的伸缩。用秒表记录（记录伸缩泡收缩周期时，注意跟踪观察）伸缩泡的伸缩周期，重复3次计数取平均值，并推算每分钟伸缩泡的伸缩频率。观察记录，比较草履虫在蒸馏水和不同浓度氯化钠溶液中伸缩泡的收缩频率，分析伸缩泡的调节水分平衡的机制。,（五）草履虫生殖装片的观察取草履虫分裂生殖和接合生殖装片，于低倍镜下观察。1、草履虫的分裂生殖装片观察草履虫的无性生殖
7、是横裂还是纵裂。2、草履虫的接合生殖装片观察两虫体在何处接合，分析接合生殖的生物学意义。,四、主要仪器及试剂,1、材料：原生动物、草履虫生殖装片、原生动物类群示范装片。2、器具：显微镜、体视显微镜、解剖器具、载玻片、盖玻片、棉花纤维、擦镜纸、毛细滴管、试管、试管架、小烧杯、大烧杯、滴管、培养箱、培养皿、小滤纸片、秒表、镊子、漏斗架、玻棒、漏斗、精密PH试纸、吸水纸、橡皮吸球 3、试剂：蓝黑墨水、冰醋酸、0.1%次甲基蓝、洋红粉末、1%氯化钠溶液、甘油、蒸馏水。,五、实验要求,本实验要求同学们在实验前明确实验的目的，提前查阅资料，采集、分离培养实验动物，准备好各种试剂和器材，自行选择和合理安排实
8、验项目。实验操作流程可参考黄诗笺主编的动物生物学实验指导，从图书馆和网上查阅本实验相关论文，并对查阅的知识进行归纳总结，制定具体的实验方案，编制科学合理的工作日程安排。,1、由学生自主设计表1-草履虫的培养条件和培养基进行草履虫的分离培养，将实验现象和数据记录填入表中，并分析实验结果。2、由学生自主设计表2-草履虫对酸度的反应，根据实验观察，列表并说明实验结果，找出最适酸碱度，分析实验现象。3、由学生自主设计表3-草履虫对盐度的反应，观察记录，比较草履虫在蒸馏水和不同浓度氯化钠溶液中伸缩泡的收缩频率，分析伸缩泡的调节水分平衡的机制。4、通过实验总结说明为什么说原生动物的单个细胞是一个完整的能独立生活的动物个体。5、每位学生绘制一张草履虫的内部结构，并注明各部分名称。,六、思考题,七、实验报告,实验报告格式按照实验论文的格式方式书写，内容应该包括实验的目的原理、材料用具、实验的设计思路、具体操作步骤、实验结果的处理及分析、以及实验的结论和进一步讨论等。同时在实验报告中要对实验中出现的特殊现象进行解释，对实验成功的关键和经验进行总结，对实验失败的原因提出改进措施，总结实验设计和具体实施过程中的得与失，摸索出最优化的实验条件，完成课后思考题，得出实验结论，提出自己的见解。,
