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1、,Al3+,Cu2+,KMnO4,Ni2+,Fe2+,通过比较溶液颜色深浅而求得其浓度的分析方法称为比色分析法,自然界许多物质是有颜色的,比色分析的基本依据是有色物质对光的选择性吸收作用。,光的基本性质(电磁波的波粒二象性),c 真空中光速 2.99792458108m/s3.0 108m/s波长，单位：m,cm,mm,m,nm,1m=10-6m,1nm=10-9m,1=10-10m 频率，单位：赫芝(周)Hz 次/秒 n 折射率，真空中为1,光的传播速度:,波动性,波动性,粒子性,E,光的折射,光的衍射,光的偏振,光的干涉,光电效应,X,磁场向量,传播方向,Y,Z,x,电场向量,h普朗克(P
2、lanck)常数 6.62610-34Js频率E光量子具有的能量 单位：J(焦耳)，eV(电子伏特)1 eV=1.6021019 J,微粒性,光量子，具有能量。,结论:一定波长的光具有一定的能量，波长越 长(频率越低)，光量子的能量越低.单色光：具有相同能量(相同波长)的光.混合光：具有不同能量(不同波长)的光复合在 一起.例如白光.,波粒二象性,真空中:,吸收光谱 Absorption Spectrum,纯电子能态间跃迁,分子内电子跃迁,带状光谱,线状光谱,单色光、复合光、光的互补,单色光,复合光,光的互补,单一波长的光,由不同波长的光组合而成的光,若两种不同颜色的单色光按一定的强度比例混合
3、得到白光，那么就称这两种单色光为互补色光，这种现象称为光的互补。,复合光 单色光 单色器单色光1 单色光2 白光 互补色光,光的互补,分子对光的吸收与吸收光谱,不同颜色的可见光波长及其互补光,吸收光谱有原子吸收光谱和分子吸收光谱。原子吸收光谱是由原子（而不是分子）外层电子选择性地吸收某些波长的电磁波而引起的，原子吸收分光光度法就是根据原子的这种性质建立起来的。分子吸收光谱是分子轨道中外层电子吸收某一波长范围的能量而引起的，通常吸收的是紫外及可见光部分。这种价电子跃迁而产生的分子光谱又称为电子光谱。电子跃迁时必须伴有分子的振动和转动能级的变化，所以分子光谱不是线光谱而是带状光谱。若用红外光照射，
4、不能引起电子的跃迁，只能引起振动和转动能级的变化，这样引起的吸收光谱称为振动转动光谱或红外光谱。它的吸收与分子结构密切相关，用于研究分子结构。,第一节、吸光光度法概述,定义：吸光光度法是基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法，,KMnO4,白光,吸收绿光。颜色越深，浓度越大,包括：比色分析法，可见光度法，紫外分光光度法，红外分光光度法。,一、吸光光度法特点:,(1)、灵敏度高 测定的最低浓度可达10-510-6 mol/L，相当于含量0.0010.0001%的微量组分.(2)、准确度较高 分光光度法的相对误差为 25%.(3)、操作简便，测定速度快(4)、应用广泛,二、物质的颜色和对光的
5、选择吸收,完全吸收,完全透过,吸收黄色光,光谱示意,表观现象示意,复合光,Why?,光作用于物质时，物质吸收了可见光，而显示出特征的颜色，这一过程与物质的 性质及光的性质有关。,Io,It,Ia,Io=Ia+It+Ir,Ir,设入射光，吸收光，透射光和反射光的强度依次为Io,I a,I t,I r，则他们之间的关系为:,第三节 光吸收的基本定律,比色皿,I0,It,参比池,I0,Ir,I0=Ir+Ia+It,Ia,I0,Ir,I0 Ir=Io=Ia+It,I0=Ir+Io,真正进入溶液部分的入射光,样品池,或,从上式可以看出：溶液的透光度愈大，说明溶液对光的吸收愈小，浓度低；相反，透光度愈小，
6、说明溶液对光的吸收愈大，浓度高。,在吸光光度法中，测定时都是采用同样质量的比色皿，反射光的强度基本上是不变的，其影响可以相互抵消-空白调零,透过光强度It与入射光强度Io之比称为透光度或透光率。用 T 表示：,定义：,T 取值为0.0%100.0%,全部吸收,T=0.0%,全部透射,T=100.0%,T，溶液对光的吸收；T，溶液对光的吸收。,吸光度A：,若光全部透过溶液，Io=It，A=0。若光几乎全被吸收，It 0，A=。,吸光度A也可以用来衡量溶液中吸光物质对波长为的单色光 的吸收程度，值越大，其吸收程度越大；反之亦然。,将不同波长的光透过某一固定的溶液，测量不同波长下溶液对光的吸光度，F
7、lash,Cr2O72-、MnO4-的吸收光谱,苯和甲苯在环己烷中的吸收光谱,（1）同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长max。（KMnO4的最大=525 nm）（2）不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似max不变。而对于不同物质，它们的吸收曲线形状和max则不同。可作为物质定性分析的依据之一。,吸收曲线的讨论,（3）不同浓度的同一种物质，在某一定波长下吸光度 A 有差异，A 随浓度的增大而增大。此特性可作为物质定量分析的依据。,（4）在max处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测定最灵敏。吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。,一、朗伯定律,当
8、、c、T 一定时，溶液对光的吸收程度A与液层厚度b的成正比。,二、比耳定律,当、b 和 T一定时，溶液对光的吸收程度A与浓度c成正比。,K为比例常数，它与入射光的波长，有色物质的性质和溶液的温度等因数有关.上式表示当一束平行单色光通过均匀的溶液时，溶液对光的吸收程度与溶液的组成量度和液层厚度的乘积成正比.这一定律称为朗伯-比耳定律，也称为光吸收定律.,三、朗伯-比耳定律,当c用 gL-1 表示，b 用cm表示时，K用a表示，称为吸光系数，其单位为 L(g.cm)-1，则：,四、比例系数 K,1、吸光系数 a,A=a b c,a 是吸光物质在一定的条件下的特性常数，与本性有关，与吸光物质的浓度和
9、液层厚度无关。,c用molL-1表示，b用cm表示时，K用表示，称为摩尔吸光系数，其单位为L(molcm)-1。则：,2、摩尔吸光系数,A=b c,摩尔吸光系数的讨论,(1)是吸收物质在一定波长和溶剂条件下的特征常数，不随浓度c和液层厚度b的改变而改变。在温度和波长等条件一定时，仅与吸收物质本身的性质有关，与待测物浓度无关；,(2)同一吸光物质在不同波长下的值是不同的。在最大吸收波长max处的摩尔吸光系数，常以max表示。max表明了该吸收物质最大限度的吸光能力，也反映了光度法测定该物质可能达到的最大灵敏度。,(3)max越大表明该物质的吸光能力越强，用光度法测定该物质的灵敏度越高。,(4)在
10、数值上等于浓度为1 molL-1、液层厚度为1 cm时该溶液在某一波长下的吸光度。,当 c=1 molL-1，b=1 cm 时,A=,值是有色物质在一定波长下的特征常数，可用它来衡量显色反应的灵敏度。值越大，表示该有色物质对此波长光的吸收能力愈强，显色反应愈灵敏。,最大 5104 灵敏的显色反应,在吸收曲线上，与最大吸收波长相对应的摩尔吸收系数，以最大 表示。,对于微量组分的测定，一般选较大的显色反应，以提高测定的灵敏度。,【例】：有一浓度为1.0g/ml Fe2+的溶液，以邻二氮菲显色后，在比色皿厚度为 2cm、波长510nm处测得吸光度为0.380，计算:（1）透光度T；(2)吸光系数a；
11、（3）摩尔吸光系数。,解（1）T10 A 10-0.380 0.417,（2）,（3）,3,2+,3,N,N,F,e,+,Fe2+,五、吸光度的加合性,A总=Ai=1b1c1+2b2c2+nbncn,总的吸光度等于各个吸光物质的吸光度之和。或溶液的吸光度应等于溶液中各组分的吸光度之和。（组分间没有干扰）,溶液中多组分测定,吸收曲线双向重叠,先配制一系列标准溶液，在最大吸收波长处，测出它们的吸光度，作图，同条件测未知液的吸光度，从图中查出未知液的浓度。,六、工作曲线 朗伯-比尔定律的分析应用,溶液浓度的测定,A b c,七、有色溶液对朗伯-比尔定律的偏离 一、物理因素：1、单色光不纯，导致负偏差
12、。,吸收曲线,克服方法：尽量选用较好的单色器测选择在峰值位置（在波峰有一个A值相差较小的区域，0）控制C，使A在线性范围之内,C,2、介质不均匀、散射光的影响，胶体、乳浊液或悬浊液由于散射的作用使吸光度增大，或入射光不是垂直通过比色皿产生正偏差。,克服方法：避免溶液产生胶体或浑浊,二、化学因素1、吸光质点的相互作用，浓度较大时，产生负偏差，朗伯-比尔定律只适合于稀溶液（c 10-2 molL-1)。,2、平衡效应，物质的离解、缔合、互变异构及化学变化引起的偏离，如：Fe(SCN)3=Fe3+3 SCN Cr2O72+H2O=2CrO42+2H+,例 Cr2O72+H2O=2 HCrO4=2H+
13、2 CrO4 1max=350nm max=375nm 2max=450nm,等吸收点：335 和445的曲线相交处 此点两吸收物质的吸光度相等,黄色,橙色,例，聚合引起的对吸光定律的偏离,单体：,max=660 nm,二聚体：,max=610 nm,朗伯-比尔定律的适用条件,1.单色光 应选用max处或肩峰处测定.,3.稀溶液 浓度增大，分子之间作用增强.,2.吸光质点形式不变 离解、络合、缔合会破坏线性关系,应控制条件(酸度、浓度、介质等).,第二节、光度计及其基本部件,一、光度分析的几种方法,标准色阶,目视比色法的优点是：1、仪器简单，操作简便，适宜于大批试样分析。2、测定灵敏度较高，适
14、于稀溶液中微量元素的测定。3、白光下进行测定，因此有些显色反应不符合朗伯比耳定律时，仍可用目视法测定。,目视比色法的缺点是：1、有色溶液一般不太稳定，常常临时配制一套标准色阶，较麻烦费时。2、依靠人的眼睛来观察颜色深度，有主观误差，准确度不高，相对误差约为520%。,二、光电比色法,光电比色计结构示意图,通过滤光片得一窄范围的光(几十nm)目前普遍使用的是国产型光电比色计，有三种配套的滤光片（红色650，绿色530，蓝色440）,吸收滤光片：只允许指定的窄范围波长光通过，其他波长的光均被吸收.,选择滤光片的原则：滤光片透光率最大的光是溶液吸收最大的光,即滤光片的颜色与有色溶液的颜色互补.,三、
15、吸光光度法和分光光度计,分光光度计的基本组成,通过棱镜或光栅得到一束近似的单色光.波长可调,故选择性好,准确度高.,分光光度计的主要部件,光源：发出所需波长范围内的连续光谱，有足够 的光强度,稳定。可见光区：钨灯，碘钨灯(3202500nm)紫外区：氢灯，氘灯(180375nm)氙灯：紫外、可见光区均可用作光源,1、单色器：将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。,棱镜：依据不同波长光通过棱镜时折射率不同.玻璃3503200nm,石英1854000 nm,光栅1000 条/mm,光栅：在镀铝的玻璃表面刻有数量很大的等宽度等间距条痕(600、1200、2400条/mm)。利用光通过光栅时发生衍射
16、和干涉现象而分光。,波长范围宽,色散均匀,分辨性能好,使用方便.,平面透射光栅反射光栅（广泛使用）,2、吸收池(比色皿)：用于盛待测及参比溶液。规格有0.5，1.0，2.0，5.0cm等；可见光区：光学玻璃池 紫外区：石英池,3、检测器：利用光电效应，将光能转换成 电流讯号。光电池，光电管，光电倍增管,硒光电池,适用于300-800 nm,在500-600 nm范围最灵敏。,Se,阴极Au，Ag,半导体,h,阳极,光电管(Phototube),h,（片）,红敏管 625-1000 nm蓝敏管 200-625 nm,光电管,红敏管 625-1000 nm蓝敏管 200-625 nm,光电倍增管(
17、Photomultiplier Tube,PMT),1个光子可产生106107个电子,160-700 nm,4、检流计（指示器）：低档仪器：刻度显示 中高档仪器：数字显示，自动扫描记录,721型可见分光光度计,特点：棱镜单色器。T.A直读。使用消光片，可供高含量比色测定。技术指标：波长范围：360800nm波长精度：3nm(360600nm)表面刻度：（T）0100（A）02,722型分光光度计,光源：钨卤素灯12V、30W波长范围：330800nm分光元件：光栅，1200线/mm检测器：端窗式G1030光电管 多碱阴极真空管 300850nm波长精度：2nm光谱带宽：6nm波长精度：仪器波长
18、指示器所显示的波长值与仪器 对应输出的实际波长值之间的符合程 度。可用二者之差来衡量。,吸光光度法仪器主要差异比较,752型紫外可见分光光度计,特点：采用全息闪耀光栅单色器，具有波长精度高，单色性好，杂散光低等优点。能自动切换钨卤灯和氘灯。采用3 位LED数字显示，具有直读能。技术指标:波长范围：200800nm稳定性：暗电流漂移0.5()3min,754型紫外可见分光光度计,特点:自动调整”0”和调整”100”具有超群的测量读数重现性和稳定性.由微处理机控制的打印机可作实时记录.可使用直线回归测量线,具有高准确度的浓度运算程序.,732型可见分光光度计,自动调整“0”“100”，可直接消除比
19、色皿配对误差。测量读数准确性高，重现性和稳定性佳。有浓度直读，线性回归，定时打印，GOTO以及光谱扫描等高级功能。,7230g型可见分光光度计,自动调零、自动调满度、自动建立线性方程、A、C自动切换，浓度直读。比色室能放置100nm比色皿，并配有托架。具有自动调节的波长调整机构，调整时无须打 开机壳。灯源采用固定电压、灵敏度在全波长范围内由微机自动控制。,Agilent 6010紫外/可见分光光度计,分光光度计,热电Unicam,1.单光束分光光度计,可变波长单光束紫外-可见分光光度计示意图,四、分光光度计的基本类型,单波长单光束分光光度计,分光光度计的类型,2.双光束分光光度计,双光束型可以
20、消除光源强度变化的影响.,单波长双光束分光光度计,多通道仪器光电二极管阵列(通常具有316个硅二极管)同时测量200820nm范围内的整个光谱,比单个检测器快316倍,信噪比增加3161/2 倍.,3.其他类型分光光度计,纤维光度计将光度计放入样品中,原位测量.对环境和过程监测非常重要.,HP 8452A多通道二极管阵列分光光度计,镀铝反射镜,纤维光度计示意图,纤维光度计,第三节、显色反应和显色条件的选择,一、显色反应和显色剂在分光光度分析中，利用显色反应把待测组分 X 转变为有色化合物，然后再进行测定。使试样中的被测组分与化学试剂作用生成有色化合物的反应叫显色反应。mX+nR XmRn(待测
21、物)(显色剂)(有色化合物)显色反应主要有配位反应和氧化还原反应，其中绝大多数是配位反应。,二、对显色反应的要求1、灵敏度高，选择 较大的显色反应。避免共存组分干扰。2、选择性好，显色剂只与被测组分反应。3、有色物组成固定，如：Fe3+磺基水杨酸 三磺基水杨酸铁(黄色)（组成固定）Fe3+SCN-FeSCN2+、Fe(SCN)2+（组成不固定）,4、有色物稳定性高，其它离子干扰才小。如三磺基水杨酸铁的Kf=1042,F-、H3PO4 对它无干扰。,5、显色过程易于控制，而且有色化合物与显色剂之间的颜色差别应尽可能大。,配位显色反应 当金属离子与有机显色剂形成配合物时，通常会发生电荷转移跃迁，产
22、生很强的紫外可见吸收光谱。,氧化还原显色反应,某些元素的氧化态，如Mn（）、Cr（）在紫外或可见光区能强烈吸收，可利用氧化还原反应对待测离子进行显色后测定。例如：钢中微量锰的测定，Mn2不能直接进行光度测定 2 Mn2 5 S2O82-8 H2O=2 MnO4+10 SO42-16H+将Mn2 氧化成紫红色的MnO4后，在525 nm处进行测定。,三、显色反应条件的选择1、显色剂用量，适当过量。适宜的用量通过实验求得。,2、溶液酸度，既要防止被测离子生成沉淀，又需防止有色配合物离解。有效的方法是加入缓冲溶液（考虑干扰）,pH,(1)影响显色剂的平衡浓度和颜色,cR R=R(H),(2)影响金属
23、离子的存在状态,cM影响显色的同时降低M=M(OH),(3)影响络合物的组成,显色反应酸度由实验测得：,在pH23 Fe(ssal)+在pH47 Fe(ssal)22-在pH810 Fe(ssal)3在pH12 Fe(OH)3,棕橙色,沉淀,黄色,紫红色,5、溶剂，有机溶剂会降低有色物的离解度，从而提高 显色反应的灵敏度。,6、共存干扰离子的影响及消除(1)控制酸度，使干扰离子不显色。,3、温度，通过实验找出适宜的温度范围。4、时间，在颜色稳定的时间范围内进行比色测定。,(3)改变干扰离子价态，测Ni2+时，Fe2+有干扰，加入氧化剂，Fe2+Fe3+.,(4)分离干扰离子，用萃取、沉淀、电解
24、、离子交换等方法。,还可选择适当的参比溶液和入射光的波长等方法来消除共存离子的干扰。,(2)加入掩蔽剂，选择掩蔽剂的原则是：掩蔽剂不与待测组分反应；掩蔽剂本身及掩蔽剂与干扰组分的反应产物不干扰待测组分的测定。如用SCN-测定Co2+时，Fe3+有干扰，加入 F-，Fe3+6F-=FeF63-，Fe3+被掩蔽。,测Co2(生成络合物性质不同),如不能通过控制酸度和掩蔽的办法消除干扰，则需采取分离法。,测Fe3(控制pH),磺基水杨酸,4.显色剂,无机显色剂：硫氰酸盐、钼酸铵、过氧化氢等几种。有机显色剂：种类繁多 偶氮类显色剂：本身是有色物质，生成配合物后，颜色发生明显变化；具有性质稳定、显色反应
25、灵敏度高、选择性好、对比度大等优点，应用最广泛。偶氮胂、PAR等。,络天青S(三苯甲烷类螯合剂),=530nm=5.9104 L/molcm,第四节、吸光度测定条件的选择一、选择合适波长的入射光,一般应该选择max为入射光波长。,但如果max处有共存组分干扰时，则应考虑选择灵敏度稍低但能避免干扰的入射光波长。,I0,It,参比池,I0,Ir,Ia,I0,Ir,样品池,二、选择合适的参比溶液,为什么需要使用参比溶液？测得的的吸光度真正反映待测溶液吸光强度。,A（样）=A（待测吸光物质）+A（干扰池）A（参比）=A（干扰+池）,Ia,(1)试样、试剂、显色剂都无色时，用纯水作参比。(2)试样无色，
26、试剂、显色剂有色，采用不加试样的空白溶液作参比。（试剂空白）(3)试样有吸收，而显色剂等无色，可采用不加显色剂的试样为参比。（试样空白）(4)均有色，有吸收，对试样加入掩蔽剂，褪色后再加显色剂等作为参比。(褪色空白),参比溶液的选择一般遵循以下原则：,光度分析法的误差除了来源于一以外，仪器测量不准确也是导致误差的原因。任何光度计都有一定的测量误差。这些误差可能来源于光源不稳定、实验条件的偶然变动、读数不准确等。,偏离A=bC,仪器测量误差,3.控制适宜的吸光度（读数范围）,对同一台仪器，读数的波动对T是确定值，dT=0.01；但对A却不确定,我们关心的是浓度测量的相对误差，它就等于吸光度测量的
27、相对误差，从前可以看出，在刻度标尺上，dA在不同位置，不是定值，故改成dT来算。,(6)代入(3):,将TEr的关系描绘于图,实际工作中，应控制 T 在1070,A 在 0.15 1.0 之间(调c,b,),可求出浓度相对误差最小时的透光度Tmin为：Tmin36.8%,Amin0.434,控制吸光度在适宜的范围内(A=0.151.0)(1)控制试样的量或溶液的稀释程度来控制溶液浓度。(2)选择不同厚度的比色皿。,五、提高光度测定灵敏度和选择性的途径,1.合成新的高灵敏度有机显色剂2.采用分离富集和测定相结合3.采用三元(多元)配合物显色体系 由一个中心金属离子与两种(或两种以上)不同配位体形
28、成的配合物，称为三元(多元)配合物。多元配合物显色反应具有很高的灵敏度，一方面是因为多元配合物比其相应的二元配合物分子截面积更大；另一方面是因为第二或第三配位体的引入，可能产生配位体之间、配位体与中心金属离子间的协同作用，使共轭电子的流动性和电子跃迁几率增大。三元配合物主要类型有：三元离子缔合物、三元混配配合物、三元胶束(增溶)配合物。,多元络合物,1.三元混配络合物 例如V(V):H2O2:PAR=1:1:1Ti(IV):H2O2:XO=1:1:1 形成三元络合物的条件：(1)金属离子与两种络合剂都有形成络合物的能力(2)金属离子有形成未饱和络合物的性质(3)两种配合剂与M配位时，要有适当的
29、空间,离子缔合物,Ag+(Phen)2+溴邻苯三酚红(BPR)4 深蓝 离子缔合物阳离子：碱性染料，Phen(pH=8-9)，安替比林 离子缔合物阴离子：X-，SCN-，ClO4-，MoO42-，酸性染料,金属离子-络合剂-表面活性剂,REE-XO-CPB=1:2:2 兰紫色 Ge Mo阿拉伯酸丁基罗丹明B 紫兰色(C32H39O3N2)4GeMo12O40 570nm105,杂多酸：,第五节、吸光光度法的应用,一、标准曲线法测单一组分,1.选择合适的显色反应和显色条件 2.绘出被测组分的吸收光谱曲线(用标液)3.在max下测一系列标准溶液的A值，绘制工作曲线Ac4.与工作曲线相同的方法，测未
30、知物AX，从工作曲线上查cX,二、多组分的测定,xl1,eyl1,exl2,eyl2由x,y标液在1,2处分别测得,在1处测组分x,在2处测组分y,b)在1处测组分x;在2处测总吸收,扣除x吸收,可求y,c)x,y组分不能直接测定A1=exl1bcx+eyl1bcy(在1处测得A1)A2=exl2bcx+eyl2bcy(在2处测得A2),A1=exl1bcx A2=eyl2bcy,A1=exl1bcx(在1处测得A1)A2=exl2bcx+eyl2bcy(在2处测得A2),设试液浓度Cx、标液浓度Cs，且Cs Cx，则：,三、高含量组分测定 示差法 1、原理 参比溶液：浓度稍低的标准溶液 C1
31、。用 C1 调节T%为100（A=0），若被测溶液的浓度为 c2。A1=bC1 A2=bC2,结论:两溶液的吸光度差A与浓度差C成正比。,A=A2 A1 b（C2C1）bC,普通法：Cs 的T=10%；Cx的 T=5%示差法：Cs 做参比，调T=100%则：Cx的T=50%；标尺扩展10倍,示差法标尺扩展原理：,特点：测高含量（准确度相对提高，若标液配制不当，误差大）,四、双波长分光光度法,在2，A2=Ax2+Ay2在1，A1=Ax1+Ay1,A=A2-A1=Ax2+Ay2(Ax1+Ay1)=Ax2 Ax1=Ax,Ay2 Ay1,Ax=(x2 x1)bCx 消除了 y 的干扰,1、消除干扰,2
32、、消除浑浊背景干扰,A 1-A 2=A Ac,例 牛奶中微量Fe的测定,应用：a).混浊试液中组分测定：试液为参比（不同波长=40-60nm）消除试液中散射光的影响。b).单组分测定：配合物吸收峰为测量波长，显色剂的吸收（等吸点）为参比波长c).两组分共存时测定：利用等吸点处A相等的特点。,用EDTA连续滴定 Bi3+，Cu2+混合,五、光度滴定,由于在选定的波长下，被滴定的溶液各组分的吸光情况不同，曲线形状不同,六、一元弱酸离解常数的测定,HL HL,高酸度下，几乎全部以HL存在，可测得 AHLHL c(HL)；低酸度下，几乎全部以L存在，可测得 AL L c(HL).代入整理：,HL,L,或,配制一系列c相同,pH不同的溶液,测A(设b=1cm).,MO吸收曲线,由每份溶液的一对pH、A，可求得一个Ka,取平均值即可.,MO离解常数的测定作图法,七、配合物组成的测定,M+nR=MRn（无色）（无色）有色（A）(1)摩尔比法:固定CM,改变CR,前提1.M、R均无色2.MRn稳3.n值大,最终体积10mL,A0,A,测定配合物MRn的稳定常数,CM=M+MRCR=R+MRA=MR MR，（b1 cm）当配位完全后，CM=MR,M+nR=MRn（无色）（无色）有色（A）,(2)等摩尔连续变化法:,表观形成常数的测定(设M、R均无吸收),cM+cR=c,MmRn型?,
