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1、植物体细胞杂交过程示意图,杂种植株,融合的原生质体AB,再生出细胞壁,脱分化,愈伤组织,再分化,植物细胞的融合,植物组织培养,植物细胞A,原生质体B,原生质体A,杂种细胞AB,去 壁,去 壁,人工诱导,方法？,促进融合的方法？,融合完成的标志,植物细胞B,植物体细胞杂交技术过程,动物细胞与植物细胞的差别：,无细胞壁全能性受限制，不能发育成杂种动物,动物细胞杂交与植物细胞杂交的不同：不需去除细胞壁不能发育成新的动物个体,一、动物细胞融合（细胞杂交）,1、概念：,指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。,2、结果：,形成单核的杂交细胞,3、原理：,细胞膜的流动性,4、诱导方式,物理法：离心、振
2、动、电激,化学法：聚乙二醇（PEG),生物法：灭活的病毒,不同DNA的两个细胞,灭活病毒诱导细胞融合,融合后的细胞进行有丝分裂,5、动物细胞融合过程,5、过程：,动物细胞A动物细胞B,诱导，融合,2个完整的杂交细胞AB,有丝分裂,（膜融合、质融合）,（核融合）,注意：动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细胞,6、意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。,7、应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段 特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体,主要用于制备,单克隆抗体,获得杂种植株,用途,物理、
3、化学方法,（同左）,灭活的病毒,物理（离心、振动、电刺激）,化学（聚乙二醇）,诱导方法,使细胞分散后诱,导细胞融合,去除细胞壁后诱,导原生质体融合,细胞融合的方法,细胞膜的流动性,细胞膜的流动性、,植物细胞全能性,原理,动物细胞融合,植物体细胞杂交,比较项目,植物、动物细胞融合的比较,二、单克隆抗体,传统的抗体生产办法及缺陷是什么？,抗体由什么细胞产生？,B淋巴细胞,每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体,要想获得大量的单一抗体，必须克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞群,1975，米尔斯坦和柯勒 杂交瘤技术,二、单克隆抗体,设计方案：一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞能无限
4、增殖,-化学性质单一、特异性强的抗体。,杂种细胞,2.制备过程：,诱导其融合的方法有哪些？,融合后培养液中有几种细胞,怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞有何优点,注射抗原的目的是什么,为何要进行克隆化培养和专一抗体检测，多次筛选,大量增殖杂交瘤细胞获得单抗的方法,1、原理：杂交瘤细胞具有两个亲本的特性，即能迅速大量增殖，又能足够数量的单一抗体。,2、过程,B淋巴细胞骨髓瘤细胞,诱导融合,B-B细胞,B-瘤细胞,瘤-瘤细胞,选择培养,杂交瘤细胞（B-瘤细胞）,克隆化培养,抗体检测,杂交瘤细胞,体外培养,单克隆抗体,除通过杂交瘤细胞产生单克隆抗体外，还有什么方法？,3.单克隆抗体的应用：,单克隆抗体
5、的优点：特异性强、灵敏度高、产量大,作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与特异性结合 优点：准确、高效、简易、快速,用于,运载药物：制成“生物导弹”,治疗疾病：主要用于癌症治疗,既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量。,总结,一种诱导细胞融合的新方法,一种新细胞,一个优势,1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的淋巴细胞,A,巩固练习,2.动物细胞融合的目的中最重要的是-（）A.克服远缘杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新品种 D.生产杂种细胞3.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是（）诱导融合的方法完全相同 B.所用的技术手段基本相同 C.所采用的原理完全相同 D.都能形成杂种细胞,A,D,4.单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是-（）A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合 B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成 C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成 D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成,D,
