分子生物学总结.ppt

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1、总 结,题 型,填空(20分):每空1分,共20个空选择(10分):每个1分,共15个是非题(10分):每个1分,共10个名词解释(20分):每个2分,共10个简答(40分):5-6个,分子生物学内容,基因和基因组DNA的复制转录与转录后加工蛋白质合成和翻译后加工原核生物的基因表达调控真核生物的基因表达调控癌基因和抑癌基因细胞凋亡基因治疗,名词解释,Gene、Genome、C-value、C-value Paradox、基因家族、基因簇、假基因、不连续基因、外显子、内含子、基因组学、分子遗传标记、RFLP、SNPtelomere、telomerase、promoter、terminator、r

2、ead-through、transcription factors、Cis-acting elements、Trans-acting factors、ribozyme、alternative splicing管家基因(housekeeping genes)、奢侈基因、操纵子(operon)、衰减子(attenuator)、反义RNACpG岛、增强子(enhancer)、沉默子(silencer)、基因座控制区(LCR)、核基质结合区(MAR)、绝缘子(insulator)、结构转录因子(architectural transcription factor)、中介因子(mediator)或辅激活

3、因子(co-activator),原癌基因、抑癌基因细胞凋亡、细胞程序性死亡、细胞坏死基因治疗、基因添加、基因干预、基因置换、自杀基因治疗、反义RNA、RNAi,定义():Gene、Genome、C-value、C-value Paradox病毒基因组的特点细菌基因组的特点真核生物基因组的特点(),一、基因与基因组特点(重点),第一章 基因与基因组,比较真核生物和原核生物基因组特点,真核生物基因组的特点,plexity of a genome,(),概念:基因家族(gene family)、基因簇(gene cluster)、假基因(pseudogene)产生机理(理解):不对等交换几种基因家

4、族:Alu基因家族、rRNA基因家族、组蛋白基因家族、珠蛋白基因家族疾病:Thalassemia(地中海贫血),2.gene family,概念:不连续基因(discontinuous gene)、外显子(exon)、内含子(intron)证据(理解):R环结构、限制性内切酶分析外显子和内含子的连接区()的可变调控:组成性剪接、选择性剪接内含子特点,3.discontinuous gene,1、形态学标记2、细胞遗传标记3、生化与免疫遗传标记4、分子遗传标记()掌握常见的分子遗传标记的基本原理(1)RFLP:限制性片段长度多态性(2)TRS:串联重复序列标记(3)SNP:单核苷酸多态性,二、基

5、因组学,(一)遗传标记,概念:基因组学、分子遗传标记、RFLP、SNP,根据研究的重点分:结构基因组学、功能基因组学、比较基因组学1.结构基因组学目的是建立高分辨的遗传图谱、物理图谱、转录图谱和序列图谱。2.()基因功能研究方法:同源性分析、RNAi、基因敲除、转基因动物模型、基因转染细胞模型3.比较基因组学,(二)基因组学,什么是人类基因组计划,它包含了哪些内容?请你评价一下人类基因组计划(HGMP)完成的科学意义。(),概念:Replicon、replication bubbles、Replication fork、semi-coservative replication、semi-dis

6、continuocos replication、Okazaki fragment、leading strand、lagging strand复制子:origin、terminus、replication bubbles、Replication fork、the direction of Replication 复制模型:replication、Rolling cicle replication、D loops replication半保留复制、半不连续复制复制机制:复制过程需要的蛋白质和酶:topoisomerase、DNA helicase、SSB、primase、DNA Polymeras

7、e、DNA ligase,一、DNA复制概况,第三章 复制,E.coli有五种DNA Pol:DNA pol I、II、III、IV和V,5 to 3 elongation(polymerase activity)3 to 5 exonuclease(proof-reading activity)5 to 3 exonuclease(repair activity),DNA pol I,有53聚合酶活性有35核酸外切酶活性,没有53核酸外切酶的活性。原核细胞DNA复制的主要酶。DNA pol III全酶的组成和装配机制(了解),DNA pol III,原核生物的复制过程,二、原核生物的复制,三

8、、真核生物的复制,真核生物和原核生物DNA复制的不同点,SV40 DNA复制过程,概念():telomere、telomerase端粒的发现:端粒的组成:均由富含G和T的简单重复序列组成端粒结合蛋白端粒的功能():保护染色体结构和功能的完整性端粒酶的作用机制端粒、端粒酶与衰老、肿瘤的关系,端粒(telomere)与端粒酶(telomerase),1.概念():transcription、promoter、terminator、read-through、transcription factors、Cis-acting elements、Trans-acting factors、ribozyme、

9、alternative splicing、2.概述:转录和DNA复制的区别、Template(模板)3.E.coli RNA聚合酶:全酶、核心酶、功能4.转录过程模板的识别:启动子、-10序列、-35序列 起始延伸终止:不依赖因子的终止子、依赖于因子的终止子,转 录,第四章 转录和转录后加工,5.真核生物转录特点6.真核生物基因转录起始的几种研究方法(原理)测定转录起点的方法:S1核酸酶图谱技术、引物延伸法研究顺式作用元件结构的方法:5端缺失系列分析法、接头扫描突变法6.真核生物RNA聚合酶()7.真核生物基因的启动子及转录起始复合物的组装类型I启动子类型II启动子及转录起始复合物的组装():

10、TATA-box、CAAT-box、GC-box类型III启动子:()基因内启动子,转 录,总结3种类型启动子及转录起始复合物的组装有哪些规律,rRNA前体的加工tRNA前体的加工mRNA前体的加工RNA的自我剪接:group intron、group intron真核mRNA前体的剪接()真核mRNA前体的选择性剪接RNA的编辑,转录后加工,第五章 原核生物基因表达的调控,概念():管家基因(housekeeping genes)、操纵子(operon)、衰减子(attenuator)、反义RNA(Antisense RNA)几组名词:管家基因与奢侈基因、结构基因与调控基因、正调控与负调控、

11、诱导与阻遏、诱导物与辅阻遏物原核生物基因表达的控制模式乳糖操纵子(lac operon)的结构和调控机制()试说明色氨酸操纵子(Trp operon)的结构和调控机制。()原核生物基因表达的时序(3种方式)原核生物翻译水平上的调控。(),第六章真核生物基因表达的调控,概念():CpG岛、增强子(enhancer)、沉默子(silencer)、基因座控制区(LCR)、核基质结合区(MAR)、绝缘子(insulator)、结构转录因子(architectural transcription factor)、中介因子(mediator)或辅激活因子(co-activator),染色体水平上的调控:基

12、因丢失、基因扩增、染色体重排染色质水平上的调控染色质种类:常染色质和异染色质活性染色质的特点():染色质的功能区域()DNA的甲基化与基因活性的关系()DNA甲基化抑制转录机理(),真核细胞类基因的调控区()启动子和调控元件增强子特点()增强子的种类增强子作用机理()沉默子()应答元件:HSE、MRE、GRE、SRE,真核细胞类基因的转录调控因子DNA结合结构域、转录激活结构域、自身活性的调控结构域DNA结合结构域():螺旋-转角-螺旋、锌指结构、亮氨酸拉链、螺旋-环-螺旋转录激活结构域转录调控因子自身活性的调控():配基结合、蛋白质-蛋白质相互作用、蛋白质的糖基化、磷酸化与去磷酸化转录激活因

13、子的作用方式,1.真核生物染色质水平的调控?2.简述组蛋白修饰的种类,说明对基因表达调控的作用3.DNA的甲基化与基因活性的关系,简述DNA甲基化抑制转录的机理4.什么是增强子?它的特点?(2010 武汉大学分子生物学考研试题)5.举例说明转录调控因子自身活性的调控方式,思考题,6.真核生物转录水平的调控机制?转录水平的调控主要是通过顺式作用元件与反式作用因子相互作用来实现的(1)转录起始复合物的形成。(2)顺式作用元件:.反式作用因子:(3)转录起始的调控:反式作用因子的活性调控:反式作用因子与顺式作用元件的结合:反式作用因子的作用方式:反式作用因子的组合式调控:反式作用因子对基因的调控多是

14、几个因子组合发挥特定的作用。,名词解释():原癌基因(proto-oncogene)、抑癌基因(Tumor-suppression genes)癌细胞的主要特征原癌基因激活的分子机制()原癌基因编码信号传导中的组分抑癌基因的特点()抑癌基因的产物简述Rb控制细胞周期机制()简述p53的功能和作用途径(),第七章 Cancer,概念():细胞凋亡、细胞程序性死亡、细胞坏死比较细胞凋亡和细胞坏死及细胞程序性死亡细胞凋亡的形态学变化和生化改变()DNA的片段化、内源性核酸内切酶激活、caspases的激活细胞凋亡过程中Caspases的功能有哪些?()细胞凋亡信号的转导:重点掌握死亡受体途径熟悉凋亡

15、相关基因()细胞凋亡的发生机制:氧化损伤、钙稳态失衡、线粒体损伤,第八章 细胞凋亡,概念():基因治疗、基因添加、基因干预、基因置换、自杀基因治疗、反义RNA、RNAi一、基因治疗策略():基因添加、基因干预、基因置换、自杀基因治疗和基因免疫治疗,第十章、基因治疗,(一)病毒介导的基因转移技术逆转录病毒载体、腺病毒载体、腺病毒相关病毒载体()掌握逆转录病毒的生活周期、前病毒特点及逆转录病毒介导的基因转移系统(二)非病毒载体介导的基因转移系统脂质体介导的基因转移技术()受体介导转移技术基因直接注射技术三、基因干预()掌握反义RNA的定义、作用机制及受体介导反义RNA转移技术()掌握RNAi的定义、作用机制及应用前景掌握用于基因治疗核酶的设计及特点,二、基因转移技术,thanx:),

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