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1、2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 第1课时,人造皮肤,一、动物细胞培养,动物细胞培养：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。,？,动物细胞培养的过程是怎样的？培养时又需要提供哪些必要的条件呢？,动物细胞培养的过程,？,进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？,用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性。胰蛋白酶作用的适宜环境pH为7.28.4。多数动物细胞培养的适宜pH为7.27.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性
2、，而胰蛋白酶在此环境中活性较高，因此胰蛋白酶适宜用于细胞培养时的消化。,胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？,胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。,培养贴附性细胞时需注意什么？,细胞要能够贴附于底物上才能生长增殖，这就要求培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒，易于贴附。,什么是原代培养？,什么是传代培养？,动物组织消化后的初次培养。,原代培养一段时间后，贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。这样的培养过程通常称为传代培养。传代培养的细胞一般传至10代后就不易传下去了。,动物细
3、胞培养的过程,讨论,多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的内环境的知识，思考并讨论以下问题：,2.体外培养的细胞需要什么样的环境条件？,充足的营养供给、适宜的温度、适宜的pH和气体环境。,无菌、无毒的环境。,1.体外培养细胞时需要提供哪些物质？,动物细胞培养的条件,1.无菌、无毒的环境,2.营养,对培养液和所有培养用具进行无菌处理，通常还会在培养液中加抗生素。定期更换培养液,糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。使用合成培养时，通常需加入血清、血浆等一些天然成分。,必需氨基酸、胰岛素、生长激素、多种生长因子,3.温度和pH,36.50.5 7.27.4,4.气体环境,O2 CO2（95%空气加5%O2的混合气体）,动物细胞培养技术的应用,1.生产生物制品,新型艾滋病病毒疫苗,干扰素,单克隆抗体,2.基因工程,基因工程技术中常用的受体细胞。,3.检测有毒物质,4.培养正常或各种病变的细胞，用于生理、病理、药理等方面研究，如用于筛选抗癌药物。,动物细胞培养的过程,动物细胞培养的条件,动物细胞培养技术的应用,总结,
