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1、*,第二章 样品的采集与处理,第一节 样品的采取和制备第二节 样品的处理,*,样品的采集和保存样品的预处理*分析方法的选择及试样的测定分析数据的处理分析报告的撰写,卫生分析工作的第一步：样品的采集,卫生样品分析的一般程序：,影响结果准确度,*,第一节 样品的采取和保存,总体：分析对象的全体,一、几个基本概念,样品：从总体中抽出部分个体，代表全部待分析物料的平均组成。,采样目的：获得能代表全部待分析总体平均组成的样品。,采样：按一定规则，从总体中抽取分析样品的过程。,*,二、样品采集的原则,代表性、典型性和适时性,1.代表性,采集的样品必须能充分代表被分析总体的性质,2.典型性,根据检测目的，采
2、集的样品必须能充分说明此目的的典型样品,3.适时性,某些样品的采集要有严格的时间概念,*,非典时期的支原体与衣原体之争 当广东开始非典流行时，国内权威机构报道非典是由“衣原体”导致的时候，我的第一个反应是怀疑。但基于以下理由觉得迷惑：一、依据明显缺乏科学性：医学研究绝对不是这样的，仅仅从几个尸解病人的标本中发现衣原体“包涵体”（在细胞浆或细胞核内形成的具有一定形态的病变结构）就仓促下结论是违背科学精神的。二、治疗效果：如果非典真的是衣原体造成的，那就一点也不可怕了。因为只要正确使用抗菌素，衣原体感染是可以控制的。当时那么多国内甚至国际一流的专家会不考虑到这个？,*,后来的发展证实了我的看法，相
3、信国内很多医务人员也经历过和我一样的疑惑。那么，为什么在非典的病人标本上会发现衣原体“包涵体”呢？这其实是病原学研究时，最基本的需要分辨的，即“宿主”还是“过客”这一最基本的问题。“宿主”是指病原体是造成疾病的病因；“过客”是指病原体只是在疾病出现后，由于环境的改变，适合它在此繁殖，即上面文章中所说的“继发感染”。具体到上述的在非典的病人标本上会发现衣原体“包涵体”的原因是这样：非典病人受到冠状病毒的侵犯后，肺部环境发生了巨大的变化。原来衣原体无法生存的地方变成衣原体生长的“沃土”，从而出现了继发衣原体感染。,*,三、各类样品的采集方法,（一）空气,大气监测工作场所空气中有害成分监测室内空气质
4、量监测公共场所空气质量监测,样品的采集方法,*,1.直接采集法,容器预先抽真空，在现场采集样品；或通过采样泵将气体样品直接引进容器。,2.浓缩采集法（富集法）,空气样品中待测组分浓度较低时，使用此法。,*,3.采样装置,收集器流量计采样动力,基本组成,（二）水,见书 p10,*,（三）食品,*,小龙虾致肌溶解,肌溶解(rhabdomyolysis)是当肌肉受伤时，肌肉中的一种叫做肌球素(Myoglobin)的蛋白质被释放出来，进入血液循环系统。这种蛋白质在肾脏会被过滤，并可能被分解成有毒物质，危害肾脏，这可能就是为啥我们会看到酱油尿。,*,造成肌溶解的原因有很多，常见的是酗酒、外伤、癫痫、机体
5、过劳、肌肉缺血性萎缩、遗传原因等等，但某些药物也可能造成这种病，几乎每个地方都提到的是降胆固醇药statins、可卡因、安非他明、海洛因，等等。,*,龙虾中毒引发的肌肉损伤和肌红蛋白血症有如下可能原因：1)龙虾被重金属污染，2)龙虾被某种细菌污染，3)龙虾中还有某种化学物质能抑制线粒体的功能，具体原因等待卫生部的调查。,*,（四）生物材料,生物材料：人或动物的体液、排泄物、分泌物和脏器等,1.血,包 括：全血、血浆和血清,采样部位：手指血、耳垂血和静脉血,保存方法：置于聚四氟乙烯、聚乙烯或 硬质玻璃管中密塞，4下 保存，长期保存在-20。,*,2.尿,采样仪器：聚乙烯瓶或用硝酸溶液 浸泡过的玻
6、璃瓶,3.毛发,取样方法：枕部距头皮2cm左右的发段,4.组织,取样：肝、肾、肺等脏器，冷冻保存,*,第二节 样品的处理,一、样品处理的目的和要求,1.样品处理的目的,使被测组分从复杂样品中分离出来，制成可被测定的形式。,可通过衍生化使难测定物质转化为易于测定的物质形式,去除干扰测定的物质,必要时进行浓缩富集,*,2.样品处理的要求,必须使样品分解完全，回收率足够高,不能引入干扰测定的物质和待测物质,方法简单易行，速度快,二、样品溶液的制备方法,1.溶解法,*,2.分解法,*,三、常用的分离与富集方法,问题的提出,实际样品的复杂性,干扰的消除,控制实验条件,使用掩蔽剂,分离,分析方法灵敏度的局
7、限性,满足对灵敏度的要求,选择灵敏度高的方法,富集,*,例：,海水中 U（IV）的测定,C=1 3 g/L,难以测定,富集为 C=100 200 g/L,可以测定,分离效果,干扰成分减少至不再干扰,待测组分有效回收,*,分离效果的好坏用回收率衡量,常量组分，含量 1%，,回收率 99%以上,微量组分，含量 0.01%，,回收率 95%或更低,*,常用分离方法,沉淀与共沉淀分离法,溶剂萃取分离法,固相萃取与微萃取法,色谱分超临界流体萃取法,挥发和蒸馏分离法,膜分离法,*,（一）溶剂萃取分离法,在含有被分离物质的水溶液中，加入萃取剂和与水不相混溶的有机溶剂，振荡，利用物质在两相中的分配不同的性质，
8、使一些组分进入有机相中，使另一些组分仍留在水相中，从而达到分离的目的。,*,1.萃取分离的基本原理,物质,亲水性,疏水性,离子型化合物,极性,共价键化合物,弱极性或非极性,相互转换,萃取分离的实质,将待萃取组分由亲水性转化为疏水性，使其萃入有机相中。,例.8-羟基喹啉-CHCl3对Al 3+的萃取,萃取的反过程（将组分从有机溶液中萃取到水溶液中）。,反萃取,*,例.8-羟基喹啉-CHCl3对Al 3+的萃取,溶于CHCl3,8-羟基喹啉,CHCl3,萃取剂,溶剂,水合离子的正电性被中和，亲水的水分子被疏水有机大分子取代,*,(1)分配系数,有机溶剂从水相中萃取溶质A，若A在两相中的存在形态相同
9、，平衡时，在有机相的浓度为Ao,水相的浓度为Aw之比，用KD表示。,萃取平衡,分配定律,*,(2)分配比,如果溶质A在两相中存在多种型体，如离解、缔合、络合、聚合等，则把溶质A在两相中各种型体的浓度之和相比，称为分配比D。,溶质在两相中存在形式完全相同时，DKD。两相体积相等时，若D1，溶质进入有机相的量多。在实际工作中，一般要求D至少大于10。,*,（3）萃取率E,萃取效率和分配比的关系是：,式中Vw/Vo称为相比。萃取率由分配比和相比决定,*,在实际分离工作中，萃取率E 最有意义。最常采用-等体积溶剂进行萃取，即相比为1，此时萃取率可写成:,如果 D 值较小而要得到较高的萃取效率，可以采取
10、连续多次萃取。,一次萃取：E 90%以上，D10 E 90%以上，D100,*,n次萃取后,式中，n 为萃取次数，m 为被萃取物质的总量，mn 为经 n 次萃取后留在水相中被萃取物质的量，Vw 为水相体积，Vo 为每次萃取所用有机溶剂的体积。,*,例2.用8-羟基喹啉氯仿溶液，于pH=7.0时从水溶液中萃取La3+，已知它在两相中的分配比D=43。现取含La3+为lmgmL-1的水溶液20.00mL，用20.00mL萃取液，计算一次萃取和分两次萃取（每次10.00mL）的萃取效率。,解:一次萃取,*,两次萃取,上例结果说明，用同样数量的萃取液，分多次萃取比一次萃取的效率高。,*,2.重要的萃取
11、体系,根据组分的性质不同，萃取体系分：,用于萃取的有机溶剂称为萃取溶剂,简单分子萃取体系螯合物萃取体系离子缔合物萃取体系溶剂化合物萃取体系,*,3.萃取条件的选择,萃取溶剂的选择,溶液酸度的选择,其它试剂的选择,4.萃取操作,*,（二）固相萃取法 Solid phase extraction，SPE,固相萃取：液-固分离分离载体：一般为硅氧基甲烷，颗粒直径40-80 m分离原理:利用样品中被分离组分与萃取柱中固定相的作用力（吸附、分配和离子交换等）不同而进行分离。,固相萃取柱,*,固相萃取装置：由柱管、筛板和固定相三部分组成,*,图 2-3 固相萃取过程,*,选适宜SPE管,加入样品溶液到载体,洗涤除去共存物,洗脱待分离物质,润湿载体,固相萃取法一般程序为：,固相萃取柱,*,始于1992年，加拿大的Janusz Pawliszyn,（三）固相微萃取技术,*,（四）超临界流体萃取法,1.原理,超临界流体萃取:气-固萃取,萃取剂:超临界条件下的气体,特 点：粘度低，接近零的表面张力，比很多液体容易渗透固体颗粒，易于除去。,*,超临界萃取分离设备组成及流程：,*,内容选择：,结束,第一节 样品的采取和制备第二节 样品的处理,
