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1、探究实验1：普通牛奶赖氨酸含量低，未来提高牛奶中赖氨酸的含量，吉林大学农学部利用现代生物工程技术，得到一头转入赖氨酸基因的克隆奶牛，预计将来其分泌的乳汁中含有更多的赖氨酸。,问题一：实验中通过什么生物工程可实现目的？其基本步骤有哪些？问题二：实验过程如何设计？,用转基因动物生产药物-动物乳腺生物反应器,获取赖氨酸基因,构建基因表达载体（在赖氨酸基因前加乳腺蛋白基因的启动子）,显微注射导入哺乳动物受精卵中,形成早期胚胎,将胚胎送入母体动物,发育成转基因动物（只有在产下的雌性动物个体中，转入的基因才能表达）,1、获取目的基因的方法2、基因表达载体如何构建？至少包括哪几部分？3、导入生物体内方法？4
2、、如何检测该反应器是否设计成功？,目的基因的获取,目的基因是指：,基因文库中获取（基因组文库，cDNA文库）,PCR技术扩增,条件：,过程：,化学合成法（基因小、核酸序列已知）,主要是指编码蛋白质的基因。也可以是一些具有调控作用的因子,原理：,双链DNA复制,引物 模板DNA 四种脱氧核苷酸 热稳定DNA聚合酶,第一步：加热9095 氢键断裂，DNA解链；第二步：冷却5560，引物结合到互补DNA链；第三步：加热7075，DNA聚合酶从引物起合成互补链。,基因表达载体构建,1、基因表达载体由_、_、_四部分组成。,目的基因,启动子,标记基因,终止子,2、启动子作用：,3、标记基因的作用：,RN
3、A聚合酶识别和结合的位点,鉴别受体细胞中是否含有目的基因 筛选出含目的基因的细胞,导入植物 细胞：,将目的基因导入受体细胞,导入动物 细胞：,导入微生物细胞：,受体细胞 导入方法,体细胞 受精卵,受精卵,显微注射法,Ca2处理法,目的基因是否插入转基因生物染色体的DNA：,目的基因的检测与鉴定,目的基因是否表达：,目的基因是否转录：,鉴定,抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等,检测,动物膀胱生物反应器,与乳腺生物反应器相比其优点：,普通牛奶赖氨酸含量低，未来提高牛奶中赖氨酸的含量，吉林大学农学部利用现代生物工程技术，得到一头转入赖氨酸基因的克隆奶牛，预计将来其分泌的乳汁中含有更多的赖氨酸。（1）获得
4、外源赖氨酸基因所需要的工具酶是，该基因不能从人体细胞中获得，原因是。（2）右图是基因表达载体示意图，构建基因表达载体的目的,图中A片段表示，B片段表示。其中，抗生素抗性基因的作用是.。,限制酶,赖氨酸为人体必需氨基酸，在人体内不能合成（没有相关基因）,使目的基因在受体细胞内稳定存在并进行复制，同时使目的基因能够表达和发挥作用,终止子,启动子,作为标记基因（或有利于对含有目的基因的细胞进行鉴别与筛选）,（3）人体蛋白质基因之所以能“插入”到羊的染色体内，原因是，,空间结构、化学组成相同；有互补的碱基序列,探究实验2运用某生物工程技术将毒性肽融合进入抗体分子，制造出“导弹药物”，它可自动瞄准和攻击
5、体内的靶组织或靶细胞(如癌细胞)。此技术是()A基因工程 B细胞工程C蛋白质工程 D胚胎工程,c,1、该工程的原理是什么？与基因工程有什么差别？2、请设计实验，实现我们的目的,下图为蛋白质工程操作的基本思路，请据图回答下列问题：(1)代表蛋白质工程操作思路的过程是_；代表中心法则内容的是_。(填写数字)(2)写出图中各数字代表的生物学过程的名称或内容：_；_；_。(3)蛋白质工程的目的是_，通过_实现。(4)从图中可以看出蛋白质工程的基本途径与中心法则是_的。,折叠,分子设计,DNA合成,对蛋白质的结构进行分子设计,基因合成或修饰,相反,蛋白质工程流程图,从预期的蛋白质功能出发设计预期的蛋白质
6、结构推测应用的氨基酸序列找到相应的脱氧核苷酸序列,总结比较：基因工程和蛋白质工程,1、下列有关DNA重组技术的基本工具的相关叙述，不正确的是 A.DNA重组技术的基本工具有三种：限制酶、DNA连接酶和载体 B.载体需要具有多个限制酶切点，以便于目的基因的鉴定和选择 C.限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的 D.DNA连接酶根据其来源分为两类：E.coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶,B,当堂检测,2下列关于目的基因的检测与鉴定的叙述，错误的是()A目的基因在真核细胞中能否稳定遗传的关键是目的基因是否插入质DNA中B检测受体细胞是否含有目的基因及其是否成功转录的方法都是分子杂交法C目的基
7、因的鉴定通常是在个体水平上进行的D如在受体细胞内检测到目的基因表达的蛋白质，可确定目的基因首端含有启动子,A,3下列说法不正确的是()A干扰素是动物或人体细胞受到病毒侵染时产生的一种糖蛋白B基因治疗是治疗遗传病的最有效手段C体内基因治疗是基因治疗的一种形式D体外基因治疗仅指体外完成基因转移这个环节,D,4.科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄细胞的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有Pst、Sma、Hind、Alu等四种限制酶切割位点，下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因)，其中是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，、表示相关结构或细胞。请据图回
8、答问题。(1)在构建基因表达载体时，可用一种或者多种限制酶进行切割。为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实例中，应该选用_限制酶，分别对_进行切割，切割后产生的DNA片段分别为_种。,Pst、Sma,含鱼抗冻蛋白基因的DNA、质粒,4、2,(2)培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长，要利用该培养基筛选已导入鱼抗冻蛋白基因的番茄细胞，应使基因表达载体中含有_，作为标记基因。(3)研究人员通常采用农杆菌转化法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。通常采用_技术，在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质。(4)利用组织培养技术将导入鱼抗冻蛋白基因的番茄组织细胞培育成植株。图中、依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的_过程。,脱分化、再分化,抗氨苄青霉素基因(ampr),抗原抗体杂交,
