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1、,生化需氧量(BOD5)的测定,生化需氧量（BOD5）：在有溶解氧的条件下，好氧微生物在分解水中有机物的生物化学氧化过程中所消耗的溶解氧量.,生化需氧量（BOD5）测定,BOD5 是反映水体被有机物污染程度的综合指标，也是研究废水的可生化降解性和生化处理效果，以及生化处理废水工艺设计和动力学研究中的重要参数。,20五日培养法（BOD5法）：分别测定水样培养前的溶解氧含量和在201C培养五天后的溶解氧含量，二者之差即为五日生化过程所消耗的氧量。,实验原理,实验内容,第一次实验内容硫代硫酸钠溶液的标定稀释水和被测水样(两个稀释倍数)培养前溶解氧的测定,第二次实验内容(5天后)硫代硫酸钠溶液的标定
2、稀释水和被测水样(两个稀释倍数)培养后溶解氧的 测定,(1)保证有充足的溶解氧（20曝气4-6h）(2)稀释水中还应加入一定量的无机营养盐和缓冲物质以保证微生物生长的需要。磷酸盐缓冲液、硫酸镁溶液、氯化钙溶液和氯化铁溶液。,对稀释水的要求,pH=7.2,BOD5小于0.2 mg/L.,1.不稀释水样的测定 溶解氧含量较高，有机物含量较少的地面水，可不经稀释，而直接以虹吸法，将约20的混匀水样转移入两个溶解氧瓶内，转移过程中应注意不使产生气泡。以同样的操作使两个溶解氧瓶充满水样后溢出少许，加塞。瓶内不应留有气泡。其中一瓶随即测定溶解氧，另一瓶的瓶口进行水封后，放入培养箱中，在201培养5d。,稀
3、释倍数的确定,2.稀释水样的测定 稀释倍数的确定：,稀释倍数的确定,典型的R值,稀释倍数的确定,水样的稀释倍数,实验步骤,1 在碘量瓶中装稀释水2瓶(空白)。2 稀释5两个倍数的水样(50倍、100倍)，每个稀释倍数的水样装碘量瓶两瓶。不要有气泡,在量筒中稀释3 测培养前的DO(空白+2个样品)。4 1个空白和2个样品进行标记，置于托盘中，放入培养箱中20 培养。5 5天后，硫代硫酸钠标定及水样DO测定。7 数据处理,计算公式,c1水样在培养前溶解氧的浓度(mg/L)c2水样经5天培养后剩余溶解氧的浓度(mg/L)B1稀释水在培养前的溶解氧的浓度(mg/L)B2稀释水在培养后的溶解氧的浓度(m
4、g/L)f1 稀释水在培养液中所占的比例f2 水样在培养液中所占的比例,水样的预处理,1.水样的pH值若超出6.57.5范围时，可用盐酸或氢氧化钠稀溶液调pH值近于7，但用量不要超过水样体积的0.5%。若水样的酸度或碱度很高，可改用高浓度的碱或酸液进行中和,2.水样中含有铜、锌、铅、镉、铬、砷、氰等 有毒物质时，可使用经驯化的微生物接种液 稀释水进行稀释，或提高稀释倍数，降低毒物 的浓度。,水样的预处理,3.当采集水样温度偏低时，应迅速升温至20C左右，在不使满瓶的情况下充分振摇时开塞放气，以赶出饱和的溶解氧。当采集的水样温度偏高时，应迅速时水样冷却至20C左右，并充分振摇，使与空气中的氧分压
5、接近平衡。4.含有大颗粒的物、需要较大稀释倍数的样品或经冷冻保存的样品，测定前均需将样品搅拌均匀均质化。,水样的预处理,4.若样品中含游离氯或结合氯，应加入亚硫酸钠溶液，使游离氯和结合氯失效，应避免加过量。亚硫酸钠加入量的计算方法：取已中和好的水样100ml，加入乙酸钠10ml，碘化钾溶液1ml，混匀，暗处置放5min。用亚硫酸钠滴定析出的碘至淡黄，加入1ml淀粉溶液呈蓝色。再继续滴定至蓝色刚刚褪去，即为终点，记录所用亚硫酸钠的体积，由亚硫酸钠所用的体积，计算出水样应加亚硫酸钠溶液的体积的。,碘量法测定溶解氧的原理,溶解氧（O2,mg/L）=,M硫代硫酸钠溶液浓度（mol/L）V滴定时消耗硫代
6、硫酸钠溶液体积（mL）,在水样中加入硫酸锰和碱性碘化钾，水中的溶解氧将二价锰氧化成四价锰，并生成氢氧化物沉淀。加酸后，沉淀溶解，四价锰又可氧化碘离子而释放出与溶解氧量相当的游离碘。以淀粉为指示剂，用硫代硫酸钠标准溶液滴定释放出的碘，可计算出溶解氧含量。,碘量法测定溶解氧的原理,溶解氧测定实验步骤,将移液管插入液面下2.0mL浓硫酸,待棕色絮状沉淀降到瓶的三分之一时，再颠倒3次,待全部溶解后，取100mL此溶液，用硫代硫酸钠滴定,虹吸法将稀释好的水样转移到溶解氧瓶,将移液管插入液面下加入1mL硫酸锰,盖好瓶塞，勿使瓶内有气泡，颠倒混合15次，静置5min,将移液管插入液面下加入2mL碱性碘化钾溶
7、液,硫代硫酸钠溶液的标定,于250mL锥形瓶中加入,10碘化钾150ml,25ml蒸馏水,10mL重铬酸钾标准溶液,5mL1:5硫酸，放置5min,用硫代硫酸钠滴定,待溶液变成淡黄色，加淀粉溶液,蓝色刚好退去为终点,注意事项,水中有机物的生物氧化过程分为碳化阶段和硝化阶段，测定一般水样的BOD5时，硝化阶段不明显或根本不发生，但对于生物处理池的出水，因其中含有大量硝化细菌，因此，在测定BOD5时也包括了部分含氮化合物的需氧量。对于这种水样，如只需测定有机物的需氧量，应加入硝化抑制剂，如丙烯基硫脲（ATU）C4H8N2S等,注意事项,水样中含有亚硝酸盐会干扰碘量法测定溶解氧，可采用叠氮化钠修正法
8、（除了将碱性碘化钾改为碱性碘化钾-叠氮化钠以外，其他与普通碘量法相同）。此法适用于多数污水及生化处理出水。2I-+2NO2-+4H+I2+2H20+2NO 加叠氮化钠溶液消除亚硝酸盐干扰的反应如下 2NaN3+H2S042HN3+Na2S04 HN3+HNO2N2+N20+H20,注意事项,当水样中三价铁离子含量较高时，干扰测定，可加入氟化钾或用磷酸代替硫酸酸化来消除。,为了测定可靠，最好同时培养23瓶，从测定值算出平均值,注意事项,稀释用的量器及BOD培养瓶要充分洗净，因为高倍稀释时，即使轻微的污染，也能影响BOD值。,样品稀释时，水样及稀释水用虹吸管插入容器底部，轻轻流入防止产生气泡。,B
9、OD培养瓶中装入样品时瓶内不能有气泡，盖瓶塞和封瓶口后，瓶内不可存在气泡。,注意事项,一般认为稀释过的培养液在20温度下，经培养5天后溶解氧减少4070%较为合适。减少量过多或过少都会带来较大误差，所以一份水样应同时做23稀释度，消耗溶解氧应大于2 mg/L和剩余溶解氧应大于1 mg/L，最后只采用溶解氧降低在40%70%之间的平均值为测定结果。,对于结果小于100mg/L的，保留一位小数；1001000mg/L的取整数位；大于1000mg/L的以科学计数法报出。结果报告中应注明是否经过过滤、冷冻或者均质化处理。,注意事项,为检查稀释水和接种液的质量，以及化验人员的操作技术，可将20mL葡萄糖-谷氨酸标准溶液用接种稀释水稀释至1000 mL，按测定BOD5的步骤操作，测其BOD5，其结果应在180230 mg/L之 间。否则，应检查接种液、稀释水或操作技术是否存在问题。,参考文献,HJ/T 505-2009 水质 五日生化需氧量（BOD5）的测定 稀释与接种法GB/T 7489水质 溶解氧的测定 碘量法HJ/T 91地表水和污水监测技术规范,
