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1、实验十四离体小肠平滑肌的生理特性,目的,通过观察化学物质、温度变化对离体小肠平滑肌收缩的影响，使学生掌握离体小肠平滑肌收缩的记录方法，加深对平滑肌某些基本特性的理解。,原理,平滑肌除具有肌肉的一般生理特性外，还具有自动节律性收缩的特性，并且受肠壁内神经丛与外来植物性神经的支配。离体肠段虽然失去外来神经的支配，但肠壁神经丛仍存在，在适宜的条件下，仍能保持平滑肌收缩的特性及肠壁神经丛的作用。离体小肠实验不仅在理论上可以证明平滑肌的生理特性，而且还可用来研究各种因素对平滑肌的影响。,方法与步骤,一、实验准备,1.恒温平滑肌浴槽装置,向中央标本槽内加入台氏液至浴槽高度的2/3处。外部容器为水浴锅加自来
2、水。启开电源，恒温工作点定在38。,2.标本制备,向兔耳缘静脉注射空气(或用木棒猛击兔的后脑部)使其致死，背位固定于手术台上，腹部剪毛后，沿正中线切开皮肤和腹壁，找到胃，以胃幽门与十二指肠交界处为起点,快速沿肠缘剪去肠系膜，然后再剪取2030 cm长的十二指肠，置于4左右的台氏液中轻轻漂洗，可用注射器向肠腔内注入台氏液冲洗肠腔内壁，并置于46台氏液中备用。,3.仪器连接,实验时将肠管剪成23 cm的肠段，用棉线结扎肠段两端，将一端结扎线连于浴槽内的标本固定钩上，另一端连于张力换能器，适当调节换能器的高度，使其与标本之间松紧度合适。此相连的线必需垂直，并且不能与浴槽壁接触，避免摩擦。用塑料管将充
3、满气体的球胆或增氧泵与浴槽底部的通气管相连，调节塑料管上的螺旋夹，让通气管的气泡一个一个的溢出，为台氏液供氧。将张力换能器输入端与系统的通道相连，进入生物机能实验系统，选择对应通道项目为张力。,二、实验项目,1.观察、记录38 台氏液中的肠段节律性收缩曲线。,2.观察、记录25台氏液中的肠段节律性收缩曲线。,3.待中央标本槽内的台氏液的温度稳定在38后，加1:10 000肾上腺素12滴于中央标本槽中，观察肠段收缩曲线的改变。在观察到明显的作用后，用预先准备好的新鲜38台氏液冲洗三次。,4.待肠段活动恢复正常后，再加1:10 000乙酰胆碱12滴于中央标本槽中，观察肠段收缩曲线的改变，作用出现后
4、同上法冲洗肠段。,5.向中央标本槽内加入1 molL-1NaOH溶液12滴，观察肠段收缩曲线的改变。作用出现后同上法冲洗肠段。,6.向中央标本槽内加入1 molL-1HCl溶液12滴，观察肠段收缩曲线的改变。待作用出现后同上法冲洗肠段。,7.向中央标本槽内加入1%CaCl2溶液23滴，观察肠段收缩曲线的改变。,注意事项,1.实验动物先禁食24 h，于实验前1 h喂食，然后处死,取出标本，肠运动效果更好。,2.标本安装好后，应在新鲜38台氏液中稳定510min，有收缩活动时即可开始实验。,3.注意控制温度。加药前，要先准备好更换用的新鲜38台氏液，每个实验项目结束后，应立即用38台氏液冲洗，待肠
5、段活动恢复正常后，再进行下一个实验项目。,4.实验项目中所列举的药物剂量为参考剂量，若效果不明显，可以增补剂量，但要防止一次性加药过量。,结果与分析,一、低温对离体肠肌活动的影响,离体肠肌收缩减弱。温度降低，肠肌细胞兴奋型降低，代谢相关酶活性降低，肠肌代谢水平降低，肠肌收缩减弱。,二、滴加肾上腺素,离体肠肌收缩减弱。肾上腺素可与肠肌细胞膜上肾上腺素能受体（、型）结合，一方面可使Ca2+、K+外流增加，细胞膜电位发生超极化，兴奋性降低；另一方面可促进肌膜和肌浆网膜上钙泵活动加强，使肌浆内Ca2+浓度降低，肌张力减弱。,三、滴加乙酰胆碱,离体肠肌收缩加强。乙酰胆碱可与肠肌细胞膜上M型受体结合，使肌膜上Ca2+通道开放，Ca2+内流，肌浆内Ca2+浓度升高，肠肌收缩加强。,四、滴加NaOH,离体肠肌收缩加强。H+浓度降低，促进Ca2+通道开放，Ca2+内流增加；促进肌浆网释放Ca2+；促进Ca2+与肌钙蛋白结合，最终导致肠肌收缩加强。,五、滴加HCl,离体肠肌收缩减弱。H+浓度升高，抑制Ca2+通道开放，Ca2+内流减少；抑制肌浆网释放Ca2+；抑制Ca2+与肌钙蛋白结合，最终导致肠肌收缩减弱。,六、滴加CaCl2,离体肠肌收缩加强。滴加CaCl2后，肠肌细胞膜内外Ca2+浓度差加大，Ca2+顺浓度差内流，使肠肌细胞胞浆内Ca2+浓度升高，肠肌活动加强。,
