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1、实验七 果蝇的三点测验,湖州师范学院 生命科学学院生物系,一、实验目的：,1、掌握三点测交的原理及方法；2、学习三点测交的数据统计处理及分析方法；3、了解绘制遗传学图的原理和方法。,二、实验材料：,黑腹果蝇品系：野生型果蝇（+）红眼、长翅、直刚毛三隐性果蝇（wmsn3）白眼、小翅、焦刚毛,三隐性个体为白眼（w）、小翅（m）、焦刚毛（sn3），这三个基因都位于X染色体上。,三、实验材料及仪器设备：,体视显微镜、恒温培养箱、培养瓶、麻醉瓶、毛笔、滤纸、培养皿等。乙醚、酵母粉、蔗糖、丙酸、玉米粉等。,位于同一条染色体上的基因是连锁的，而同源 染色体上的基因之间会发生一定频率的交换，使子代中出现一定
2、数量的重组型。重组型出现的多少反映出基因间发生交换的频率的高低。而根据基因在染色体上直线排列的原理，基因交换频率的高低与 基因间的距离有一定的对应关系。基因图距就是通过基因间重组值的测定而得到的。如果基因座位相距很近，重组率与交换率的值相等，直接将重组 值作为基因图距；如果基因间相距较远，两个基因间往往发生两次以上的交换，必 须进行校正，来求出基因图距。,四、实验原理：,三点测交：以三对基因为基本单位，通过1次杂交和测交，同时确定三对基因在染色体上的位置和排列顺序。方法：用三杂合体和三隐性个体杂交，获得三因子杂种（F1），再使F1与三隐性基因纯合体测交，通过对测交后代表现型及其数目的分析，分别
3、计算三个连锁基因之间的交换值，从而确定这三个基因在同一染色体上的顺序和距离。通过一次三点测验可以同时确定三个连锁基因的位置，即相当于进行三次两点测验，而且能在实验中检测到所发生的双交换。干涉 一般用并发率表示干涉的大小。并发率,P：F1：,反 交,雌蝇X染色体上三对基因之间发生交换重组，产生8种雌配子,雄蝇产生两种配子,因为F1代雄蝇为三隐性个体，所以F1代雌雄蝇自交时，即进行测交，F2代可以得到8种表型。,五、实验步骤：,1、选处女蝇：正交选野生型为母本，三隐性雄蝇为父本。反交选三隐性雌蝇为母本，野生型为父本，将母本旧 瓶中的果蝇全部麻醉处死，在8-12h内收集处女蝇5只，将处女蝇和5只雄蝇
4、转移到新的杂交瓶中，贴好标签，于25培养；2、7d后，释放杂交亲本（一定要干净）；3、再过4-5天，F1成蝇出现，在处死亲本7天后，集中观 察记录F1表型及性别。4、选取5对F1代果蝇，转入一新培养瓶，于25培养，其余F1代果蝇处死；5、7d后，处死F1亲本；6、再过5d，F2成蝇出现，开始观察记录，连续统计7d，观察眼色，翅形及刚毛形态。正交只需统计雄性个体。,要求每组至少统计200只果蝇。,思考：正交组合F2统计为什么只需统计雄性个体？其雌性F2代个体的表型如何？,P：F1：,8种配子,六、实验结果：,1、将观察到的F2代各表型个体数填入书本P17表5-1中，确定基因间重组发生的情况；2、计算基因间的重组值及双交换值；3、根据计算结果画出遗传学图。注意用双交换值对位于两端的基因间距离进行校正；4、计算并发系数和干涉值；,
