实验五药物对离体肠的.ppt

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1、实验七 药物对离体肠运动的影响,一、实验原理,本实验制备兔离体肠道标本,与张力换能器相连,在BL-420型生物信号显示与处理系统上显示用药后的肠运动状态(张力、幅度和节律),从而观察药物对离体肠运动的影响。,二、实验目的,学习兔离体肠道标本的制备方法观察药物对离体兔肠运动的影响,三、实验材料,(一)动物 家兔(二)器材 BL-420型生物信号显示与处理系统,数显恒温平滑肌槽,术剪,眼科镊,注射器,培养皿,缝针,棉线。(三)药品 0.05%硫酸新斯的明,0.01%肾上腺素,0.05%硫酸阿托品,0.001%乙酰胆碱,台氏液,四、实验步骤与观察项目,离体兔肠段标本的制备:取空腹家兔1只,左手持髂上

2、部,右手握木棒,猛击枕骨部致死。迅速开腹,自幽门下6cm处剪取空肠,立即置入盛有冷台氏液的培养皿中,剪去肠系膜,清洗肠内容物,将肠管剪成 2 3cm 的小段,两端各穿一线备用。,2.连接实验装置 标本一端用线系于Z型沟的弯钩上,并置于数显恒温肌槽的内槽中,另一端系在已调好的BL-420型记录仪的张力换能器上,缓缓通入空气(每秒钟气泡12个)。浴槽的营养液以能浸没标本为宜。水浴温度为380.5。,3.软件操作打开分机,再开电脑。点击打开BL-420型生物信号显示与处理系统点击“实验项目”“消化实验”“消化道平滑肌的生理特性”,编辑标记条。,4.实验步骤1待离体肠适应后(收缩张力和频率规则后),打

3、开记录仪描记一段离体小肠平滑肌的正常收缩曲线,注意观察肠平滑肌张力及收缩幅度的变化情况。,2.给药,记录正常曲线后,在药槽中加入0.05%硫酸新斯的明0.5ml,观察肠平滑肌张力及收缩幅度的变化情况,放掉药槽中的台氏液,加入预先准备好的38新鲜台氏液,重复更换23次新鲜台氏液,待肠段活动恢复至对照水平时,进行下一项实验。在药槽中加入0.01%肾上腺素24滴,观察肠平滑肌张力及收缩幅度的变化情况。后续处理同上。在药槽中加入0.001%乙酰胆碱24滴,观察后续处理同上。观察及后续处理同上。在药数显恒温平滑肌槽中加入0.05%阿托品24滴,待作用明显后,描记变化情况,立即加入0.001%乙酰胆碱24

4、滴,后续处理同上。,五.实验结果,对图形进行分析,比较给药前和给药后离体肠收缩曲线的张力、强度(幅度)、频率(次/10分钟),分析讨论药物对离体肠作用的特点和机理。打印曲线并粘贴在实验报告上。,六注意事项,1.游离及取出肠段时,动作要快,要轻柔。为保持离体肠段的活性,游离肠段及穿线在预冷的营养液中进行。2.悬挂肠段不宜在空气中暴露过久,以免影响其活性。3.加药时不要把药液直接加到肠管上,以免影响结果。4.记录电位时,要保持安静,避免振动实验台,以免影响实验结果。,七.思考题1进行哺乳类动物离体组织器官实验时,需控制哪些条件?2.加入阿托品后再加入乙酰胆碱,肠段活动将如何变化,为什么?加入阿托品

5、后再加入乙酰胆碱,可观察到加入阿托品后肠断收缩力不变,再加入乙酰胆碱肠段的收缩不再被促进;同时加入一定量的阿托品和乙酰胆碱,曲线上升,但不如单纯加入相同浓度乙酰胆碱时上升的那么明显。这说明阿托品是乙酰胆碱的抑制剂,其主要的作用机理是:乙酰胆碱与肠道的平滑肌细胞上的特殊位点结合,促进钙离子在肌浆网中的传递,从而增强平滑肌的收缩;当加入阿脱品后,阿脱品与平滑肌细胞上的乙酰胆碱结合位点结合,竞争性阻碍了乙酰胆碱与平滑肌细胞的结合,从而抑制了乙酰胆碱的作用,但只加如阿脱品时对平滑肌的收缩没有影响。,介绍数显恒温平滑肌槽,1.控氧:打开供氧开关,调节通气量,以每秒钟气泡12个为宜;2.控温:打开设定开关,设定为37,调节恒温开关加热;关闭设定开关,打开测量开关,检测温度,当温度显示为37时,将恒温旋钮调至最低,此时开始保持恒温。由于很多仪器的数显不很准确,为避免影响实验,用温度计进行监控是可靠的办法。,3.冲洗:(1)放出内槽中的溶液:用夹子夹紧保温液和营养液之间的胶管,阻断水流。打开调节阀一,内槽溶液从换液口流出;(2)补充内槽溶液:待内槽溶液流尽后,关闭调节阀一,并用夹子夹住换液口的胶管,打开调节阀二,松开保温液与营养液之间胶管的夹子,溶液从外槽流向内槽。如此反复3次,即可将内槽中的药液冲洗干净。,

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