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1、,微生物学实验,实验三（P68.72.78)微生物菌落形态观察、纯种分离及接种技术,一、实验原理,纯培养：从一个细胞繁殖得到的微生物后代。获得纯培养的方法：,一、实验原理,稀释平板分离法：将待分离样品做系列稀释，使样品中的微生物细胞充分分散。取合适稀释度的样品与培养基混合，培养出现菌落。如稀释度适合在培养基平板上即可出现的单个菌落。平板划线分离法：用无菌接种环挑取待分离材料，在平板培养基表面划线稀释而获得单菌落的方法。,每人从实验二稀释平板测数法的培养基平板上选定一个孤立的菌落，采用划线法分离、纯化出一个菌株。2.观察、比较、识别从土壤中分离的细菌、放线菌、霉菌 的菌落特征。3.学习无菌操作（
2、倒培养基平板、接种环灭菌、划线分离）的基本方法。,二、实验内容,三、实验方法,STEP 1,STEP 2,STEP 3,STEP 4,倒培养基平板,接种环 灭菌,选取单 菌落,培养得到单菌落,无菌操作，在超净工作台酒精灯火焰旁操作,无菌基本操作倒培养基平板,三、实验方法,STEP 1,STEP 2,STEP 3,STEP 4,倒培养基平板,接种环 灭菌,选取单 菌落,培养得到单菌落,无菌基本操作接种环灼烧灭菌,接种和分离工具1.接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 6.接种圈 7.接种锄 8.小解剖刀,接种环灼烧灭菌,三、实验方法,STEP 1,STEP 2,STEP 3,STEP
3、 4,倒培养基平板,接种环 灭菌,选取单 菌落,培养得到单菌落,无菌基本操作划线分离,平板划线分离方法1.分区划线法 2.连续划线法 3.方格法 4.放射法5.四格法,1.严格按照无菌操作要求进行操作；2、划线时接种环与平板之间保持较小角度（30）；3、划线时用力小，不能将培养基划破；4、挑菌量不宜太多。,菌落特征观察,菌落：在固体培养基上（内），一个或几个同种微生物细胞局限在一处大量繁殖，形成的肉眼可见的，有一定形态特征的细胞群体。是细菌鉴定的重要指标。菌落特征观察：形态、大小、色泽、透明度、致密度、边缘,菌落形状,菌落高度,菌落边缘,点状,圆形,丝状,不规则状,假根状,扁平,圆形,隆起,凸透镜状,垫状,脐突状,完整,波状,裂片装,锯齿状,丝状,卷曲状,四大类微生物菌落基本特征,四、实验作业,微生物实验报告册P3：1；P4：1；P5：1.2,
