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1、第五章 呼吸道感染的细菌,以呼吸道作为侵入门户，感染致病的一大类细菌。结核分支杆菌脑膜炎奈瑟菌肺炎支原体肺炎链球菌白喉棒状杆菌,概述：细长略弯曲的杆菌，有分枝生长趋势。含分枝菌酸，细胞壁大量脂质，抗盐酸乙醇脱色，又称抗酸杆菌。对人致病的分三类：结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)麻风分枝杆菌(Mycobacterium leprae)非结核分枝杆菌(Nontuberculosis mycobacteria),第一节 分枝杆菌属(Mycobacterium),流行病学,结核病的病原菌 1886年德国细菌学家 Koch 证明全球性卫生问题 是艾滋病高发区人群的首要死
2、因世界防治结核病日 3月24日再现传染病（re-emerging infection disease,EID),结核病的病原，以卡介苗预防对人致病：人型、牛型回升的原因与人类免疫缺陷病毒感染多种耐药菌株的出现多种社会因素全球处于结核病紧急状态中（新发病例800万/年）我国是全球22个结核病高负担国家之一（总计600万活动性肺结核患者）,结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis),无芽胞、鞭毛，有荚膜脂质含量高抗酸染色+含大量分枝菌酸,不易着色异烟肼致其形成细菌L型多形性，呈球形、长丝状或串珠状,生物学性状,结核杆菌抗酸染色,抗酸染色法（齐-尼Ziehl-Neelsen
3、抗酸染色)：用苯酚复红加温染色后，不易被盐酸乙醇脱色，再用亚甲蓝进行复染，结核分枝杆菌即不再脱色而呈现石炭酸复红的红色。,生物学性状,培养特性专性需氧（表面膜-索状生长）营养要求高且特殊:罗氏培养基，内含蛋黄、甘油、马铃薯、无机盐和孔雀绿等；生长缓慢（18小时/1代）固体培基粗糙、菜花状 液体培基表面生长，表面生长成菌膜,懒，馋，变,生物学性状,抵抗力三抗：抗干燥、抗酸、碱三敏感：湿热、紫外线、消毒酒精变异性 形态、菌落耐药性：链霉素、异烟肼、利福平毒力卡介苗（Bacilli Calmette-Guerin,BCG）用于预防结核病的牛型结核杆菌的减毒活疫苗,致病性,致病物质：菌体成分，不产生内
4、，外毒素脂质磷脂：促单核细胞增生，抑制蛋白酶对组织的溶解索状因子：破坏线粒体、抑制白细胞游走，不能四处走 蜡质D：佐剂，激发迟发超敏反应硫酸脑苷脂：抑制吞噬体与溶酶体融合，使结核菌在吞噬细胞内存活。蛋白质：结核菌素（本身不够大）+蜡质D，致迟发超敏反应,多糖：（荚膜的主要成分）1.多糖能与吞噬细胞表面的补体受体3（CR3）结合，有助于结核分枝杆菌在宿主细胞上的粘附与入侵；2.多糖能防止宿主的有害物质进入结核分枝杆菌3.多糖中有多种酶可降解宿主组织中的大分子物质，供入侵的结核分枝杆菌繁殖所需的营养；4.抑制吞噬体与溶酶体的融合、5.抑制MHCII类分子的表达，干扰加工和递呈,所致疾病,多途径感染
5、结核病：呼吸道-肺结核 消化道-肠结核 损伤皮肤-皮肤结核,肺部感染方式原发感染,多发生于儿童（第一次感染，不一定是儿童）原发综合征（primary syndrome)形成结核结节转归,发病机制,结核结节：是在细胞免疫的基础上形成的，由上皮样细胞，郎罕巨细胞加上外周局部集聚的淋巴细胞和少量反应性增生的成纤维细胞构成的特异性肉芽肿。典型的结核结节中央常有干酪样坏死。,细胞大量死亡,液化吸收不完全,干酪样坏死,空洞：咯血再传染,原发感染,少量mtb 在肺部形成结核结节,希望尽快找到吞噬细胞,肺门淋巴结,到达第二个病灶,恢复,哑铃状影：x光,转归,病变完全吸收，钙化或硬结（隐伏或痊愈）此种转归最常见
6、。原发病灶扩大，产生空洞，支气管淋巴结周围炎，形成淋巴结支气管瘘，导致支气管内膜结核或干酪性肺炎，支气管淋巴结肿大，造成肺不张或阻塞性肺气肿，结核性胸膜炎。恶化，血行播散，导致急性粟粒性肺结核或全身性粟粒性结核病。,肺部感染：肺结核病原发感染常见于儿童呼吸道侵入-原发综合征，可扩散或多数感染者因纤维化和钙化而自愈 继发感染 逃出的mtb,往肺尖产生新的病灶，病灶多局限，不累及邻近淋巴结,免疫性与超敏反应,免疫性细胞免疫为主,抗感染免疫与超敏反应同时存在柯赫现象再感染时溃疡浅、易愈合、不扩散，表明机体已有一定免疫力再感染时溃疡发生快，说明在产生免疫的同时有超敏反应的参与,肺外感染继发感染,免疫力
7、低下患者常见于脑、肾、骨、关节、生殖系统少数形成全身粟粒性结核或播散性结核,结核性脑膜炎 结核性腹膜炎结核性胸膜炎 结核性关节炎骨结核 肠结核肾结核 睾丸结核,免疫性与超敏反应,结核菌素试验（Tuberculin test)应用结核菌素进行皮肤试验来测定机体对结核分枝杆菌是否能引起迟发型超敏反应（型变态反应）的一种试验。辅助诊断是否有过感染。,结核菌素试验方法与观察,结核菌素试验结果判断：红肿硬结大于5mm=阳性：机体有抗结核免疫力（曾感染过结核杆菌/接种BCG）大于15mm=强阳性：活动性结核小于5mm=阴性：未感染/未接种过BCG，但必须除外：感染初期、老年人、严重结核患者或同时患其他传染
8、病而致免疫功能低下者。,结核菌素试验,应用用于选择BCG接种对象及免疫效果的测定作为婴幼儿（未接种BCG）结核病诊断的参考测定肿瘤病人的细胞免疫功能未接种BCG人群结核杆菌感染的流行病学调查,卡介苗的保护0-80%，平均小于50%，但迄今无更好的疫苗。,微生物学检查法,直接涂片镜检,标本直接涂片或集菌后涂片，用抗酸染色若找到抗酸阳性菌即可初步诊断金胺染色：在荧光显微镜下呈金黄色荧光,分离培养,结核分枝杆菌生长缓慢，一般需24周长成肉眼可见的菌落,动物试验,将集菌后的材料注射于豚鼠腹股沟皮下，34周后若局部淋巴结肿大，结核菌素试验阳转，即可进行解剖。观察肺、肝、淋巴结等器官有无结核病变，并作形态
9、、培养等检查。,快速诊断,多聚酶链反应（PCR）扩增技术应用于结核分枝杆菌DNA鉴定，每ml中只需含几个细菌即可获得阳性，且12d得出结果。操作中需注意实验器材的污染问题，以免出现假阳性。,预防,卡介苗接种：出生后24小时、7岁、12岁（复种前先作结核菌素试验，阴性者种）,治疗,合理营养，注意休息早期，联合，适量，规律，分阶段治疗和治疗完全程督导治疗（Directed Observed Treatment DOT）,第二节 脑膜炎奈瑟菌 N.meningitidis,生物学性状G双球菌，肾形或蚕豆形，新分离的菌株有荚膜和菌毛营养要求高，常用巧克力培养基培养对低温比较敏感，低于30不能生长产生自
10、溶酶，培养时间过长，细菌死亡,脑膜炎奈瑟菌,致病性 致病物质 荚膜 菌毛 内毒素 所致疾病：流脑 普通型 占90左右 临床表现 暴发性 少见 慢性败血症型 少见,在患者脑脊液中，位于中性粒细胞内,微生物学检查,标本,分离培养与鉴定,脑脊液、血液、出血点渗出液、鼻咽拭子保暖、保湿、立即送检，培养基预温,直接涂片镜检,中性粒细胞内、外有革兰阴性双球菌，可作出初步诊断。,巧克力（色）培养基,快速诊断,对流免疫电泳，SPA协同凝集试验,脑膜炎奈瑟菌,防治原则,儿童 注射流脑荚膜多糖疫苗进行特异性预防,治疗用抗生素,脑膜炎奈瑟菌,生物学特性,原核细胞型微生物无细胞壁,细胞膜含固醇二分裂方式繁殖目前所知在
11、无生命培养基中繁殖的最小微生物营养要求较高；菌落呈荷包蛋样抵抗力较弱,第四节 支原体 mycoplasma,支原体属(Mycoplasma)：肺炎支原体 人型支原体、生殖器支原体、穿透支原体,脲原体属(Ureaplasma)：溶脲脲原体,形态与结构,没有细胞壁具高度多形态性能通过除菌滤器（0.1-0.3um)G，Giemsa染色呈淡紫色,肺炎支原体(M.pneumonia),培养特性,需氧和兼性厌氧营养要求较高繁殖较慢油煎蛋样的菌落,荷包蛋样菌落,致病性,毒力因子:顶端结构（PI蛋白）：粘附宿住细胞不侵入宿主细胞，产生毒性代谢产物：如神经毒素，过氧化氢等荚膜：抗吞噬，有毒性,致病性与免疫性,肺
12、炎支原体,宿主细胞,吸收营养损伤细胞膜释放核酸酶，过氧化氢，细胞溶解，肿胀，坏死,顶端结构吸附,体液免疫为主有些具有丝裂原，刺激T，B细胞转化-自身免疫具与宿主相同抗原-免疫逃逸，或免疫损伤,支原体与细菌L型的区别,肺炎支原体(M.pneumonia),传播途径：呼吸道传播 所致疾病：支原体肺炎（原发性非典型肺炎）症状：发热，咳嗽，伴胸骨后疼痛。非呼吸道并发症：脑膜炎、心肌炎、胰腺炎等 微生物学检查：分离培养 冷凝集试验：非特异性,俗称肺炎球菌，常寄居于正常人鼻咽腔中，多数不致病，少数有致病性，引起的疾病主要为大叶性肺炎。,一：肺炎链球菌（pneumococcus）,第五节 其他细菌,1、生物
13、学性状G+、成双排列、有荚膜，无鞭毛、无芽胞营养要求高(需血液、血清、10%CO2)，-溶血。发酵菊糖，胆汁溶菌试验、奥普托辛试验阳性。能产生自溶酶，48小时后自溶。对多数理化因素抵抗力较弱。,肺炎链球菌,抗原结构：荚膜多糖抗原 M蛋白 C多糖抵抗力：较弱，有荚膜菌株的抗干燥能力较强,肺炎链球菌,致病性与免疫性致病物质荚膜肺炎链球菌溶素O脂磷壁酸神经氨酸酶所致疾病大叶性肺炎免疫性：感染后可获得较牢固的免疫力,肺炎链球菌,肺炎链球菌与甲链的鉴别胆汁溶菌试验Optochin（奥普托辛）试验荚膜肿胀试验,（-）（+）,(Bile solubility test),Not optochin sensi
14、tive,optochin sensitive,微生物学检查法 1、标本 2、直接涂片镜检 3、分离培养和鉴定 防治原则：荚膜多糖疫苗,肺炎链球菌,G+，属放线菌，含短链分枝菌酸 无荚膜、无鞭毛，不产生芽胞致病菌：白喉棒状杆菌,二：白喉棒状杆菌,Albert染色,培养特性,需氧或兼性厌氧，营养要求较高Loeffler(吕氏)血清斜面（含有凝固血清）上生长迅速，异染颗粒明显。分离培养：鉴别选择培养基（含0.03%0.04%亚碲酸钾）的血平板,黑色菌落。,抵抗力,对湿热抵抗力弱，58，10min；煮沸1min死亡抗寒冷和干燥5%石炭酸中min、3%来沙尔中10min死亡对消毒剂、青霉素、氯霉素、红
15、霉素敏感对消毒剂敏感，对青霉素、氯霉素、红霉素敏感对磺胺、卡纳、庆大不敏感,致病物质 白喉外毒素：有携带棒状杆菌噬菌体的溶原性白喉杆菌才能产生外毒素。,致病性与免疫性,白喉杆菌的溶原性转换,Fe2+0.14g/ml：适合产生毒素Fe2+0.5g/ml：抑制毒素产生渗透压，氨基酸浓度，PH等,致病机制A-B型，A有酶活性，B有结合功能毒素进入细胞，使（肽链延长因子）失去转位活性，细胞蛋白质合成受阻，细胞死亡，产生病变。,致病性与免疫性,所致疾病,传染源：患者及带菌者传播途径：飞沫或污染临床表现（白喉病）引起局部炎症：假膜全身中毒症状：如心肌炎、软腭麻痹、声嘶、肾上腺功能障碍等症状,免疫性,持久感染后机体可获得牢固的免疫力抗毒素免疫,标本,分离培养,鼻、咽、喉病变部位，,涂片镜检,亚甲蓝染色后观察,Loeffler(吕氏)血清斜面，亚碲酸钾血平板,毒力鉴定,动物实验、Elek实验、细胞培养法、协同凝集实验,微生物学检查法,白喉毒素的应用,剧毒成人与鼠对白喉毒素有一定耐受性肿瘤组织对白喉毒素高度敏感将肿瘤单克隆抗体与毒素A亚单位结合，可使A亚单位对肿瘤有特异性杀伤作用，以此作为生物导弹来治疗肿瘤,防治原则,预防人工主动免疫：注射白喉类毒素（白百破三联疫苗）人工被动免疫：注射白喉抗毒素药物预防：如注射青霉素或口服红霉素治疗白喉抗毒素-皮肤试验、早期使用抗生素,谢 谢！,
