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技术路线,质粒构建分子克隆,原理,质粒构建分子克隆,原理,原核表达、蛋白纯化,(一)质粒的复制,(二)目的基因的表达,(三)蛋白的纯化,目的蛋白中组氨酸上的咪唑环与镍柱结合,其他蛋白不结合;再用高浓度的咪唑组氨酸置换下来,得到纯化的目的蛋白。,IPTG,间接ELISA、免疫组化、western blot,淋巴细胞增殖试验,T淋巴细胞,不增殖,大量增殖,未受刺激,加入非抗原性刺激物;或特异性抗原性刺激物,MTS比色,线粒体脱氢酶,行为学试验(水迷宫),