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1、免疫浊度测定及其临床应用,免 疫 测 定IMMUNOASSAYI A,免疫测定原理利用抗原抗体反应检测标本中微量物质 抗原+抗体 抗原抗体复合物 Ag+Ab Ag*Ab,免疫测定特点特异性 抗原性不同的物质不干扰敏感性 g-ng-pg可测物 蛋白质，酶，激素，药物，毒品,免疫测定分类,免疫浊度测定 g ng标记免疫测定 ng pg,免疫浊度测定,免疫沉淀反应,海德堡曲线 Heidelbergs Curve,抗体过剩,抗原过剩,Ag*Ab,免疫浊度测定分类透射浊度法散射浊度法,透射浊度法和散射浊度法的光路,检测器A,(透射浊度法),检测器B,(散射浊度法),I0,I,浑浊样品,光源,散射浊度法,
2、Analyte Antibody Other stuff,Analyte-antibody complexing,What happens inside the flow cell?,Fluid in the cell has causes little scatter,Adding sample increases scatter slightly,Adding antibody causes a large increase in light scattering,免疫浊度测定分类2,终 点 法速 率 法,终 点 法固定时间法,速率散射浊度法,速率峰的测定,速率峰的测定,抗原过剩的测定,R
3、ATE of SCATTER,抗体过量时的反应,抗原过量时的反应,60,85,0,反应时间(秒),ARRAY抗原过量自动检测,加入校正液,药物浓度测定,免疫浊度抑制测定(小分子物质),免疫浊度测定试剂,抗体试剂的要求,1 特异性,2 亲和力,3 反应时保持抗体过剩,测定范围应包括高于及低于 正常值的50%,5 测定的精密度应在5%左右,校正曲线：聚乙二醇的增强作用,抗原浓度,C1,C2,C3,吸光度,4%聚乙二醇,不加聚乙二醇,试剂组成配方举例,试剂1100mmol Tris或磷酸缓冲液 pH7.2 8.24%聚乙二醇(分子量6000或10000)1%非离子型表面活性剂150mmol氯化钠或硫
4、酸钠0.1 g/l 叠氮钠,试剂2100mmol Tris或磷酸缓冲液 pH7.2 8.220%多克隆羊抗血清150mmol氯化钠0.1 g/l 叠氮钠,抗体过剩,抗原过剩,Ag*Ab,技术特性,并行的检测系统:Rate NIPIARate Nephelometry,NIPIA：近红外颗粒速率法免疫分析,BenefitsAbility to expand the menu into high sensitivity assaysincluding:Ferritin,Digoxin,and IgE.NIR eliminates the interferenceof biological substances such as biliribin and hemoglobin.,NIPIA：近红外颗粒速率法免疫分析,优点扩展检测菜单，增加高敏项目分析：如铁蛋白，地高辛，IgE，超敏CRP等近红外波长分析消除生物物质如胆红素和血色素的干扰,NIR：940nm波长近0oC检测角检测颗粒大小：200500nm直径速率法测定,NIPIA：940nm LED光源速率散射法：670nm 激光光源,蛋白应用分类,心血管功能监测载脂蛋白A1载脂蛋白B脂蛋白a,
