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1、解剖与生理学实验内容及学时安排,考核方法,1、考勤（10%）2、课前预习（10%）3、课堂表现：规范操作+随堂抽查（40%）4、实验报告：书写工整、画图及文字说明清楚、分析准确（30%）5、实验室清洁及实验设施的维护（10%）,实验一、四大基本组织的观察,目的要求,联系功能观察了解四种基本组织的结构特点及分布。学习体腔膜或肠系膜平铺片的制作方法。学习疏松结缔组织新鲜平铺片的制作方法及活体染色方法。,材料与器械,蛙，小鼠，解剖器械一套（手术剪、解剖针、眼科镊），注射器及针头，滴管，盖玻片，显微镜，1%硝酸银水溶液，1%台盼蓝生理盐水溶液，甘油，蒸馏水，组织切片,实验步骤,上皮组织,单层扁平上皮1
2、、蛙体腔膜或肠系膜平铺片的制作和观察：将蛙双毁髓处死，取体腔膜或肠系膜放于载玻片上，以解剖针 将其挑开展平，稍晾干；加1%硝酸银水溶液数滴于标本上，将标本浸盖；立即放在日光下晒35min（或在日光灯下1015min）；至标本变为浅褐色时，倾去载玻片上的溶液，用蒸馏水洗净，加上12滴甘油，盖上盖玻片，即可用于显微镜观察。,2、单层扁平上皮组织切片（镀银染色）的观察表面观：细胞呈多边形，胞核扁圆形，位于细胞中央垂直观：细胞扁平，中央有核处较厚，其余部分胞质很薄,图1、单层扁平上皮 3.540 蟾蜍肠系膜涂片 镀银染色,单层立方上皮,取甲状腺切片（HE染色）观察：表面观：细胞呈六角形垂直观：细胞立方
3、形，核圆居于细胞中央,单层柱状上皮,取小肠上皮切片观察：表面观：细胞呈六角形垂直观：细胞呈柱状，核长圆形，靠近基底部,假复层纤毛柱状上皮,由柱状细胞、梭形细胞、锥体形细胞和杯状细胞构成 游离面常见有纤毛 基细胞 一种腺细胞,复层扁平上皮,复层扁平上皮(stratified squamous epithelium)由基底面向游离面依次是：基底细胞 多边形细胞 扁平细胞 皮肤的表皮 口腔、食管、阴道,图5 复层扁平上皮 H-E染色3.540 A 未角化型 人食管 表皮细胞B 角化型 人手指表皮 真皮乳头,变移上皮,取膀胱切片（HE染色）观察：特点：上皮的层次和细胞形态随所在器官的收缩或舒张而改变由
4、基底面向游离面依次是：基底细胞 中间层细胞 表面细胞（盖细胞）,结缔组织,疏松结缔组织1、疏松结缔组织活体染色标本的制作与观察：取小鼠一只，皮下注射1%台盼蓝生理盐水溶液少许，3060min后，颈椎脱臼法处死；剪开皮肤，在注射处附近剪取一小块皮下结缔组织，置于载玻片上；双手各持一解剖针将组织平铺于载玻片上；待标本稍干后，加12滴甘油，盖上盖玻片即可观察。,2、疏松结缔组织切片的观察：,致密结缔组织,取跟踺纵切片（HE染色）观察：,脂肪组织,取小肠切片（HE染色）观察：特点：HE染色标本中，脂滴被溶解，细胞呈空泡状，胞 核和胞质被挤向细胞的一侧（宝石戒指状）,软骨组织,蟾蜍胸骨剑实软骨细胞标本的
5、制作与观察：将蟾蜍处死，剪取胸骨剑突最薄的部分一小块，放入载玻片上的1/3000中性红染液滴中，染色510min；用吸管吸去染液，滴加Ringer液，盖上盖玻片进行观察；在高倍镜下，可见软骨细胞为椭圆形，细胞核及核仁清楚易见，在细胞核的上方胞质中，有许多被染成玫瑰红色大小不一的泡状体，这一特定区域叫“高尔基区”，即液泡系。,骨组织,取骨横磨片观察：特点：由于骨组织内的软组织（神经、血管、淋巴管、结缔组织）及细胞都已腐烂，仅剩下空腔和管道。长骨骨干部的横断面，在低镜下可见34层外环骨板、12层内环骨板、内外环骨板之间的骨单位和间骨板。骨单位是由中央管和其周围呈同心圆排列的多层骨板构成。高倍镜下观
6、察可见骨板内或骨板间的卵圆形骨陷窝及骨陷窝向四周发出的骨小管。,血液,采血、涂片、染色制作血液涂片：取末捎血一滴置于玻片的一端，左手持载玻片，右手以边缘平滑的推片的一端从血滴前方后移接触血滴，使推片与载片夹角保持3040度平稳地向前移动，载片上保留下一薄层血膜。手持玻片在空气中挥动，使血膜迅速干燥，以免血细胞皱缩。加瑞氏染液23滴，覆盖整个血膜，固定0.51.0min，滴加等量或稍多的新鲜蒸馏水，与染料混匀染色510min。用清水冲去染液，待干燥后即可置于显微镜下进行观察。,镜下观察血涂片。低倍镜下分辨白细胞和红细胞，高倍镜观察、辨别各种血细胞和血小板。,图11、人血液涂片 Wright染色
7、3.31001、红细胞质 2、中性粒细胞（杆状核）3、中性粒细胞（分叶核）4、嗜酸性粒细胞 5、嗜碱性粒细胞 6、单核细胞 7、淋巴细胞,肌肉组织,骨骼肌取骨骼肌纵、横切片（HE染色）观察：观察肌纤维的形态、胞核的形状，纵切片上还可见明显的横纹，比较纵切和横切面上的细胞核的位置和结构差异。,心肌,取心室肌纵、横切片（HE染色）观察：镜下可见纵切片上，心肌纤维彼此分支吻合成网状，卵圆形胞核位于中央。缩小显微镜虹彩光圈可见心肌纤维的横纹，但不如骨骼肌纤维明显。在肌纤维及其分支上可见深蓝色的梯形闰盘。横切片上，心肌纤维为不规则的圆形，有或无胞核，注意细胞核的形态和位置。,图14，15、人心肌纤维纵切片HE 染色3.340 闰盘 脂褐素,平滑肌,取小肠纵、横切片（HE染色）观察：观察平滑肌纤维的形态、胞核的形状，比较纵切和横切面上的结构差异。,图15，16、平滑肌纵横切片HE染色 3.340,神经组织,取神经细胞分离装片（Cajal银染色）观察：观察神经细胞的胞体、胞核、突起的形态。,图17、神经细胞分离装片 Cajal银染色 3.340,实验报告,四种基本组织标本的制备、观察与绘图（高倍镜40物镜），要求标注出重点结构，并作简要的文字说明。,
