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1、实验七 厌氧性细菌(anaerobic bacteria),录像:无芽胞厌氧菌的感染示教:破伤风梭菌及产气荚膜梭菌的形态染色性及培养特性Nagler反应无芽胞厌氧菌的形态(脆弱类杆菌消化链球菌)厌氧培养方法操作:产气荚膜梭菌致病性试验肠道致病菌粪便标本的分离与鉴定(续)血清学反应,破伤风梭菌(C.tetani)革兰染色涂片:菌体细长,芽胞正圆,比菌体粗,位于菌体顶端,使细菌呈鼓槌状。,破伤风梭菌电镜图,形 态,产气荚膜梭菌(C.perfringens)革兰染色涂片:菌体粗大,两端几乎平切。芽胞呈椭圆形,位于次极端,不大于菌体,体外很少形成芽胞。,产气荚膜梭菌荚膜(体内易形成):,培 养 特 性
2、,Clostridium perfringens shows stormy fermentation of litmus milk.Acid turns the pH indicator litmus from blue to pink,acid and enzymes coagulate the proteins in the milk,and gas tears the curds apart.,汹涌发酵:stormy fermentation,Nagler 反应,产气荚膜梭菌产生卵磷脂酶(毒素),在蛋黄琼脂平板上,卵磷脂酶分解蛋黄中的卵磷脂,生成的甘油二酯在菌落周围形成乳白色混浊圈。当加入相应抗毒素后,卵磷脂酶活性丧失,菌落周围不出现混浊圈。,产气荚膜梭菌致病性试验,培养液注入小鼠腹腔 断颈处死 剖腹肝脏印片石炭酸复红负染染色涂片自然干燥 染液 迅速水洗 印干 油镜检,375-8h,厌氧培养方法,1.物理法:厌氧箱或厌氧缸。用物理方法将氧气吸走,充入氮气、二氧化碳、氢气。2.化学法:氢气+氧气 水3生物法:厌氧菌与需氧菌一起放入密闭空间培养。,钯,肠道致病菌粪便标本的分离与鉴定(续)血清学反应,标本,选择鉴别培养基(SS平板),生化反应,血清学鉴定,37,24h,已知Ab检测未知Ag(玻片凝集试验),