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1、实验技术二 普通光学显微镜油镜的使用,一、实验目的熟悉普通光学显微镜的构造及各部分的功能；2.学习并掌握油镜的原理和使用技术；3.观察常见微生物的形态。,二、显微镜的基本结构及油镜的工作原理,显微镜的基本结构,机械部分,光学部分,底座镜柱镜臂 镜筒 载物台 物镜转换器粗准焦螺旋细准焦螺旋,目镜物镜反光镜聚光器,油镜的工作原理,油镜的使用需在载玻片与镜头之间加滴香柏油，主要原因有：,1.增加照明亮度.因其折射率与玻璃相同，光线通过载玻片直接通过油质进入物镜而不发生折射,其中NA=n.sin。为光线最大入射角的半数，一般来说最大只能达到90，而n为介质折射率。由于香柏油的折射率（1.51）比空气及
2、水的折射率（分别为1.0和1.33）要高，因此以香柏油作为介质的油镜所能达到的数值孔径值要高于低倍镜、高倍镜。,2.增加显微镜的分辨率,三、实验器材 示玻片：放线菌、细菌三型、青霉 菌、曲霉菌染色玻片标本。2.试剂：香柏油、二甲苯。3.其他器材：显微镜、擦镜纸、吸水纸。,四、操作步骤,1.观察前的准备：,2.显微镜观察：（1）低倍镜观察：（2）高倍镜观察：（3）油镜观察：,（1）取镜安放（2）光源调节,滴香柏油,调焦,低倍镜的观察,高倍镜的观察,侧面注视，升载物台使油镜与香柏油接触,油镜的观察,转油镜,调焦,选定视野,放置切片,调节光源和焦距,（4）还原各部件。反光镜垂直于镜座，将物镜转 成“
3、八”字 形，再向下旋。同时把聚光镜降下。,（1）降下载物台，取下载玻片。,3.显微镜用毕后的处理,（2）擦香柏油,（3）用擦镜纸清洁其他物镜及目镜；用绸布 清洁显微镜的金属部件。,先用擦镜纸拭去镜头上的香柏油，再蘸少许二甲苯擦去残留油迹，最后用干净擦镜纸擦去残留二甲苯。,五、思考问题,1.用油镜观察时应注意哪些问题？在载玻片和镜头之间加滴什么油？起什么作用？,2.比较低倍镜、高倍镜及油镜各方面的差异。为什么在使用高倍镜及油镜时应特别注意避免粗调节器的误操作？,3.什么是物镜的同焦现象？它在显微镜观察中有什么意义？,4.影响显微镜分辨率的因素有哪些？,5.根据你的实验体会，谈谈应如何根据所观察微生物的大小，选择不同的物镜进行有效的观察。,
