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1、(2)接种后的培养皿_于37 恒温箱中培养。若培养基中存在含脲酶的细菌，其菌落周围会出现_，这是由于尿素被分解产生氨气，遇培养基中的_产生的颜色变化，从而证明这一菌株能以尿素为氮源。(3)分离能利用尿素的细菌时所用的培养基成分上最主要的特点是_。(4)下列操作需要在酒精灯火焰旁进行的是_。A称取葡萄糖、琼脂糖等培养基成分B倒平板C涂布平板D微生物的培养,(5)与LB全营养培养基上的菌落数相比，尿素培养基上的菌落数只有少数菌落的原因是_。答案(1)无菌水320(2)倒置红色环带酚红指示剂(3)只有尿素作为唯一氮源的(固体)培养基(4)BC(5)土壤中能利用尿素的细菌在土壤菌群中只占极少数量,2(
2、经典高考)有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答下列问题。(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲，该培养基属于_培养基。(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即_和_。,(3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力_。(4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_和_。无菌技术要求实验操作应在酒精灯_附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。,解析(1)可以将所需要的微生物从混杂的微生物群中
3、分离出来的培养基为选择培养基。欲筛选出能降解原油的菌株，则培养基中应只含有原油而无其他碳源，这样不能降解原油的细菌在此培养基上不能生存，能降解原油的细菌才能在只含原油这一碳源的培养基上生存。(2)分离纯化菌种时，接种的方法有划线分离法和涂布分离法，其目的都是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单菌落，以便于纯化菌种。(3)降解原油能力越强的菌株，在菌落周围形成的分解圈越大。,(4)实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌(如接种环)、干热灭菌(如培养皿)和高压蒸汽灭菌(如培养基)等。无菌技术要求整个实验操作都要在酒精灯火焰附近进行，以避免周围微生物的污染。答案(1)原油选择(2)划
4、线分离法涂布分离法(3)强(4)干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰,对点强化请回答下列有关细菌的培养与分离问题。(1)环卫部门要检测某地饮用水的大肠杆菌超标问题，通常采用_法。用此法分离时，需要将待测水样稀释若干倍，再取_ mL。稀释度不同的待测样品加在固体培养基上，用_涂布在培养基平面上，盖好培养皿并将培养皿倒置，在37 恒温培养箱中培养1224 h，可以得到相互分开的菌落。计数时为了减小误差，每个水样_。,(2)下图4支试管分别代表4种微生物在半固体培养基(琼脂含量3.5 g/L)中的生长状态，最可能是大肠杆菌生长状态的是_。,(3)从土壤中分离出有脲酶的细菌时，在配制好尿素固体培养基后，加入尿素溶
5、液往往要通过_过滤，使之无菌。由于脲酶能水解尿素，会使培养基中的酚红指示剂变为_，从而在其菌落周围出现_。答案(1)涂布分离0.1玻璃刮刀至少要做三个(或要做多个)浓度的分离培养，取其平均值(2)D(3)G6玻璃砂漏斗红色着色的环带,以尿素为氮源微生物的培养分离的综合考查,(1)在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有_，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现_色环带。(2)下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是_灭菌。A高压蒸汽 B紫外灯照射C体积分数为70%酒精浸泡 D过滤(3)步骤X表示_。在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液_到培养基平面上。菌液稀释的目的是
6、为了获得_菌落。,(4)在培养时，需将培养皿倒置并放在_中。若不倒置培养，将导致_。(5)临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将14C标记的_分解为NH3和14CO2。,解析(1)幽门螺杆菌(Hp)含有脲酶，能以尿素为氮源，在加入尿素和酚红指示剂的培养基中培养Hp，由于尿素经脲酶的降解可产生碱性的NH3，NH3能使培养基中的酚红由红黄色变成红色，故菌落周围会出现红色环带。(2)由于尿素加热会分解，对尿素溶液进行灭菌最好用G6玻璃砂漏斗过滤。(3)微生物的分离和培养步骤是：配制培养基灭菌、倒平板接种培养。为获得单菌落，接种操作前应先将菌液稀释，然后将菌液涂布到培养基平面
7、上即可。(4)微生物培养时需将培养皿倒置并放在恒温培养箱中，若不倒置培养，则无法形成单菌落。(5)幽门螺杆菌能将14C标记的尿素分解为NH3和14CO2，故临床上常用14C呼气试验检测人体内幽门螺杆菌的存在。,答案(1)脲酶红(2)D(3)接种涂布单(4)恒温培养箱无法形成单菌落(5)尿素,对点强化(2013浙江宁波二模)请回答微生物培养和分离的有关问题：(1)欲从土壤中分离出能利用尿素的细菌：以_为唯一氮源且加入了_指示剂的培养基，用_法分离细菌。若培养基平板上有菌落存活且颜色变_，则说明分离成功。(2)分离以尿素为氮源的细菌和分离大肠杆菌都使用了LB培养基，其成分_。A前者含琼脂，后者不含琼脂和琼脂糖B两者都含有琼脂C前者含有琼脂糖，后者不含琼脂糖但含琼脂D两者都不含琼脂和琼脂糖,解析(1)分离能利用尿素的细菌，只需以尿素为唯一氮源，加酚红作指示剂，采用涂布分离法分离细菌，只要培养基中的指示剂变红，标志着存在脲酶水解尿素的作用，证明菌株可以以尿素为氮源。(2)分离以尿素为氮源的细菌所用培养基应含有琼脂糖，而分离大肠杆菌所用培养基则不含琼脂糖而含琼脂。答案(1)尿素酚红涂布分离(或涂布)红(2)C,
