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1、选修1生物技术实践,专题34微生物的培养与应用 基础知识点复习,遵化市堡子店中学生物组 王海泉,基础自主复习,1,回扣教材 自主梳理 夯实基础,营养物质,生长繁殖,水,碳源,氮源,无机盐,特殊营养物质,氧气,液体,凝固剂,固体,天然,合成,选择,鉴别,温和,有害的微生物,芽孢,孢子,煮沸消毒法,巴氏消毒法,3微生物培养的基本技术(1)配制培养基：称量混合溶化调pH分装包扎。(2)灭菌：加水加培养基密封排冷气维持压力取出倒平板(或搁置斜面)。,二、微生物的利用1菌种保藏(1)临时保藏,甘油管藏,20,2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数,复合,C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶,纤维二糖,葡萄糖,刚果红染
2、色,透明圈,纤维素粉,选择培养,梯度稀释,鉴别纤维素分解菌,产生透明圈,考点分类透析,2,解读考点 拓展升华 直面高考,一、微生物的营养要素及培养基配方基本营养要素：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐。此外还要满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。,名师提醒(1)微生物最常用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐。(2)对异养微生物来说，含C、H、O、N的有机化合物既是碳源，又是氮源、能源。,二、培养基的种类和用途,名师提醒(1)加入培养基中的凝固剂(如琼脂)，一般不能被微生物利用，只起到凝固作用。(2)选择培养基一般只生长具有特定特点的微生物，鉴别培
3、养基可以存在其他微生物，而且能鉴别特定的微生物。,三、比较消毒和灭菌,四、微生物的纯化培养及菌种的保藏1原理在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。2纯化分离的方法一平板划线法(如图),3纯化分离的方法二稀释涂布平板法.系列稀释操作(如图),.涂布平板操作如图所示,4比较解读两种分离纯化方法,名师提醒(1)两种接种方法作用不完全相同：平板划线法和涂布平板法都能使细菌纯化，但平板划线法不易分离出单个菌落，不能计数；涂布平板法能使单菌落分离，便于计数。(2)涂布平板法的缺点：涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目低。这是因为当两个或多个细胞连
4、在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。,一、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1筛选菌株的原理微生物的选择培养：在选择培养基的配方中，把尿素作为培养基中的唯一氮源，原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长。2统计菌落数目的方法(1)显微镜直接计数法原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。方法：用计数板计算。缺点：不能区分死菌与活菌。,(2)间接计数法(活菌计数法)原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。操作：a设置重复组，增强实验的说服力与准确性。b为
5、了保证结果准确，一般选择菌落数在30300的平板进行计数。计算公式：每克样品中的菌株数(CV)M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。,3土壤中纤维素分解菌的筛选流程土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落。,名师提醒(1)分离微生物所用的选择培养基一定是固体培养基，因为菌落只能在固体培养基上形成。(2)平板划线法只适合用于微生物的提纯，不适合进行计数，并且在最后一次划线的末端处的菌种最纯。(3)分离能分解纤维素的微生物时，有时需要进行选择培养，选择培养的目的是增大选择对象在样液中的浓度，以确保用刚果红染色法鉴别时确实能得到所需菌种。,生 物,提高效率创造未来铸就辉煌,
