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1、临床检验标本采集,同济医院检验科程黎明,1.检查患者2.申请化验3.患者准备4.标本采集5.标本运送,临床检验分析前质量控制,临床检验标本采集,血液标本的采集尿液标本的采集粪便标本的采集脑脊液标本的采集浆膜腔积液标本的采集细菌学检验标本采集,血液样本的采集,1.影响临床检验结果准确性的因素,生物因素：固定的生物因素：性别、年龄、种族、遗传、妊娠可变的生物因素：营养、饮食、饮酒、体重、肌肉重量、体力活动、姿势、气候、采血时间、作息规律、治疗药物干扰因素：溶血、脂血、胆红素抗凝剂、治疗药物及其代谢产物、输注液抗凝剂、细菌、真菌,标准餐后：TG50%；AST20%；胆红素、P、GLU15%；ALT1
2、0%；尿酸、总蛋白、白蛋白、尿素、钙、钠、胆固醇5%饮食结构的不同,对上述指标影响不同：高脂肪饮食会使甘油三酯大幅度升高；高蛋白饮食会使氨、尿酸和尿素值升高较多。饮酒后：TG、乳酸、UA、乙酸、醛固酮、肾上腺素：Glu、LDL-C 饮咖啡(因)后：Glu、脂肪酸、血管紧张素、儿茶酚胺,1.影响临床检验结果准确性的因素,生物因素：固定的生物因素：性别、年龄、种族、遗传、妊娠可变的生物因素：营养、饮食、饮酒、体重、肌肉重量、体力活动、姿势、气候、采血时间、作息规律、治疗药物干扰因素：溶血、脂血、胆红素抗凝剂、治疗药物及其代谢产物、输注液抗凝剂、细菌、真菌,剧烈运动后：k、Ca、Na、P、Glu、U
3、REA、UA、BiL、ALP、AST、ALT、CK、乳酸等,1.影响临床检验结果准确性的因素,生物因素：固定的生物因素：性别、年龄、种族、遗传、妊娠可变的生物因素：营养、饮食、饮酒、体重、肌肉重量、体力活动、姿势、气候、采血时间、作息规律、治疗药物干扰因素：溶血、脂血、胆红素抗凝剂、治疗药物及其代谢产物、输注液抗凝剂、细菌、真菌,应用青霉素对常见试验结果的影响：AST、CK、Cr、蛋白电泳、K(静脉注射青霉素钾盐)、血浆蛋白、尿蛋白、BUN、UA、尿17-KS：血浆白蛋白、胆红素(新生儿)、HCT、Hb、RBC、PLT、K(静脉注射青霉素钠盐)、WBC应用VitC对常见试验的干扰：皮质激素、C
4、rea、UA、17-OH、17-KS、AST、胆红素：CHO、Glu、LDH、TG、大便隐血试验阴性、PT缩短,1.影响临床检验结果准确性的因素,生物因素：固定的生物因素：性别、年龄、种族、遗传、妊娠可变的生物因素：营养、饮食、饮酒、体重、肌肉重量、体力活动、姿势、气候、采血时间、作息规律、治疗药物干扰因素：溶血、脂血、胆红素抗凝剂、治疗药物及其代谢产物、输注液抗凝剂、细菌、真菌,2.如何控制分析前的影响因素,（1）采血前的准备 采血前禁食12小时，采血前应不喝茶、咖啡和酒，不吸烟 避免剧烈运动 一贯的体位 在不服药期间采血 在每一天的同一时间采血,理想的采血时间是在早晨7至8点，最后一次食物
5、和液体的摄入应在前一天下午6至7时；在早晨服药前采血；采集血样时患者应采取仰卧位。,（2）血液样本的采集 使用真空采血管 采血管的选择 采血带的使用 采血带使用时间在1分钟之内，大部分检验指标不受影响 回血后应立即松开止血带 避免反复握拳 采血的顺序,让真空管充血致管内真空耗尽，血流自动停止,CLSI 国际标准真空采血管 充盈的标准,血流自动停止后，把真空管从持针器拔掉,先把真空管从持针器拔掉，然后拔采血针,马上把含添加剂的真空管摇匀5至10次,持針器,（2）血液样本的采集 使用真空采血管 采血管的选择 止血带的使用 止血带使用时间在1分钟之内，大部分检验指标不受影响 回血后应立即松开止血带
6、避免反复握拳 采血的顺序,CLSI真空採血順序,细菌培養红蓝黃綠紫灰黑,生化免疫指标凝血指标生化免疫指標生化免疫指標血常規血糖血沉指標,采血量 血液比例过高由于抗凝剂相对不足，血浆中出现微凝血块而阻塞仪器的采样针。血液比例过低抗凝剂相对过剩易溶血样本量不足 凝血功能检查 血常规检查,凝血功能检查务必要求采血量准确,采用枸橼酸三钠抗凝抗凝剂:血=1:9采血量不足，PT、APTT明显延长,采血量 血液比例过高由于抗凝剂相对不足，血浆中出现微凝血块而阻塞仪器的采样针。血液比例过低抗凝剂相对过剩易溶血样本量不足 凝血功能检查 血常规检查,血常规检查,采用EDTAK2抗凝EDTA在血中浓度达到2.5mg
7、/ml时，中性粒细胞会肿胀，分叶消失，血小板会肿胀，崩解，影响血常规结果。采血量1.5-2mL,采血部位 避免在输液过程中采血！严禁在静脉输液侧采血!避免从留置血导管采血！静脉血生化、血常规、免疫等。动脉血血气分析时,充分混匀，避免血凝！避免溶血！,造成溶血的因素,用力推血采血不顺利混匀过猛运输采血量不足酒精未干漏气试管质量,推荐使用真空采血系统！,3.血液样本的运送,标本运送要注意防止标本外溢、蒸发和污染(标本管要盖盖子),应严密包装;有特殊要求的标本要按特殊要求运送(如血气分析标本应严格密封,与外界空气隔绝;测定维生素A、维生素B6、2胡萝卜素、胆红素等标本,应注意避免暴露于光线下,用黑纸
8、或铝箔保护标本)。血样应竖直放置避免晃动血样,产生溶血,快！,立即送检：血氨、血沉、血气、酸性磷酸酶、乳酸、各种培养0.5h内：血糖、电解质、血液细胞学、体液细胞学、涂片找细菌、真菌12h内：各种蛋白质类、色素类、激素类、脂类、酶类、抗原、抗体、尿液超过2h，分离血清或血浆保存,特殊样本血气分析,1.标本要求全血,以动脉血或动脉化毛细血管血为主只有动脉血才能真实反映体内代谢氧化作用和酸碱平衡的状况动脉血液的气体含量几乎无部位差异，从主动脉到末梢循环都是均一的对O2检测的有关指标必须采集动脉血，才能真正反映体内氧的运输状态对PCO2和pH的检测也以采集动脉血为好。血液循环无障碍的病人，静脉血的这
9、两项指标基本也可反映体液酸碱状况,特殊样本血气分析,动脉血：部位：肱动脉、股动脉、前臂动脉以及其他任何部位的动脉均可采血：专用的血气分析针采集动脉化毛细血管血：指局部组织末梢经45温水热敷，使循环加速，血管扩张，局部毛细血管血液中PO2和PCO2值与毛细血管动脉端血液中的数值相近，此过程称为毛细血管动脉化静脉血：静脉血所测结果不适用于了解体内O2的运输状态，故PO2及有关推算数据仅供参考，对pH及PCO2等酸碱平衡指标是适用的。采静脉血尽可能不使用止血带,特殊样本血气分析,3.标本采集的注意事项卧床5分钟治疗过程中采血要特别注意病人所处的状态肝素抗凝，冻干肝素优于液体肝素注意防止血标本与空气接
10、触标本放置时间：按要求，采取的血标本应在30分钟内检测完毕，如30分钟后不能检测，应将标本置于冰水中保存，最多不超过2小时，在30分钟到2小时之间，血PO2值是个怀疑值，仅供参考,尿液标本的采集,晨尿或随机尿 清洁、专用容器，避免经血、白带、精液、粪便等污染 2h内送检24h尿 中段尿,24h尿留取方法,清晨8时排尿弃去；8时后的尿液全部收集于一个大的容器内（由检验科提供，预先加入防腐剂），至第二日晨8时，将最后一次尿液排入容器中。将全部标本混合均匀后，用量桶量取总量并记于化验单之上，再从混合均匀的尿液中取出适量的尿标本送检。,晨尿或随机尿 清洁、专用容器，避免经血、白带、精液、粪便等污染 2
11、h内送检24h尿 中段尿,中段尿留取方法,-四块肥皂饱和的纱布、四块干纱布、手套、无菌容器-戴上手套、两腿分开站在抽水马桶前，用一只手分开阴唇-用肥皂饱和的纱布从前到后擦洗生殖器区域4次-用干纱布从前到后擦4次-排尿入抽水马桶-将盛尿容器置于尿流中-将残尿排入抽水马桶晚上尽量憋尿，留取晨尿2小时内处理，若不能及时运送，保存于4不超过6小时。,粪便标本的采集和送检,洁净、有盖、专用容器不得混有尿液，不可有消毒剂及污水不得用卫生纸包裹留取10g以上（拇指大小）粪便重点留取黏液、脓血等肠脱落组织及可疑部位外观无异常的粪便可在表面及内部不同部位取材 及时送检查阿米巴滋养体应保温、快送,脑脊液标本采集,
12、一般分3瓶收集第一瓶作细菌培养第二瓶作化学分析和免疫学检查第三瓶作一般性状及显微镜检查（脑脊液常规）每瓶收集12ml 立即送检！,浆膜腔积液标本采集,浆膜腔积液包括胸水、腹水、心包液、关节液及鞘膜液等。胸水及腹水抽取10 mL，心包液、关节液等抽取25 mL。一般检查分装于两试管中，一管加抗凝剂，另一管不加抗凝剂。立即送检或置4冰箱保存。抗凝剂为100g/L的乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）或肝素钠,其他,十二指肠液胃液精液前列腺液白带阴道/宫颈脱落细胞,细菌学检验标本采集及注意事项,总原则,无菌操作，有盖无菌容器，尽量不用棉拭子(咽喉及生殖道除外)应把握采样时机，选择采样部位应在使用抗生素
13、前采集标本，如已经用药，需停药三天采集标本；如不能停药者，应在下次用药前采集尽快送检，如不能及时送检应予冷藏保存(脑脊液、血培养瓶除外)标本中不可添加防腐剂,血液及骨髓,血培养检测指征:发热（38）或低体温（36）；寒战；白细胞增多，特别有“核左移”时 粒细胞减少血小板减少；皮肤黏膜出血；昏迷和多器官衰竭等,血液及骨髓,1.采血时间抗生素使用前采集；若已用药，应在下次用药前采集细菌进入血流约1小时出现寒战、高热，尽可能在寒战、高热前，或寒战、高热时立即采集。发热被抑制后，随时间延迟，检出率下降若热型稳定，最好在发烧前采集皮肤消毒，防止污染（毛囊内含有细菌，须待消毒剂发挥作用使细菌崩解后抽血，皮
14、肤上有很多SCN）含碘制剂需要足够消毒时间（碘酊、洗必泰30s，碘伏1.52m）血培养瓶：瓶盖0.5%碘伏消毒30s1 min 标本采集：无菌操作，静脉采集，尽可能不经留置导管采集，避免污染；轻颠倒混匀防凝固；污染率应小于3%,血培养前10位病原菌,血液及骨髓,2.样本量：血培养常规血培养包括需氧/厌氧各1瓶（1套）成人每次20ml 30ml；儿童-ml；婴儿及新生儿尽量采集。每次采血均分至两瓶（成人每瓶10ml；儿童每瓶1-3ml）。血量不足-先需氧瓶，剩余血接种厌氧瓶。（减少1ml，阳性率降低35%）建议每次采二套，最好三套（不同时间，不同部位）。骨髓培养：尽量采集(2ml)贴条码和标签：
15、标签不可遮盖条码 立即送检 保存：备用瓶应置室温，绝不可放冰箱；,血液及骨髓,输液反应血培养剩余液体 剩余液体很容易污染（经很多途径），有时浓度不高不足以致病。若只培养液体，很难说明是输液的原因。若血培养无，则不能说明是液体的原因。,血液及骨髓,血培养瓶（BD）的选择：灰色瓶盖-成人中和抗生素需氧瓶(10ml)粉红色瓶盖-儿童中和抗生素需氧瓶(1-3ml)金黄色瓶盖-中和抗生素厌氧瓶(10ml),血液及骨髓,血培养瓶（BacT/Alert）的选择黄色瓶盖-儿童中和抗生素需氧瓶(1-3ml)浅绿色瓶盖-成人中和抗生素需氧瓶(10ml)金黄色瓶盖-中和抗生素厌氧瓶(10ml)红色瓶盖分支杆菌培养瓶
16、（10ml）,呼吸道标本,上呼吸道标本清水漱口将咽拭子越过舌根到咽后壁或悬雍垂的后侧，或扁桃体上涂抹明显发红或伪膜存在的部位避免触及舌，口腔粘膜和唾液下呼吸道标本晨痰：用清水反复嗽口后用力自气管深部咳出当日第一口浓痰，于带盖无菌杯中，尽快送检,中段尿培养,见前,其他标本,脓 液 及 伤 口70%的酒精消毒,无菌生理盐水冲洗若是开放式脓肿或伤口，用棉拭子擦入脓肿深部边缘采样，因为脓肿表面可能混合有污染的细菌如是封闭式脓肿，用注射器抽吸脓肿壁边的脓液浆膜腔积液：无菌抽取胸水腹水510ml；心包液和关节液抽15mL，直接用注射器加盖送检或打入血培养瓶中送检脑脊液:必须立即送检，注意保温!,厌氧培养,无菌、密闭容器立即送实验室避免使用棉签采集标本(厌氧菌对空气、干燥十分敏感),谢谢,
