生物制药工艺学第3章预处理.ppt

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1、第三章 生物材料的预处理和液固分离,第一节 生物材料的预处理,1、含量低 如胰岛素在胰脏中的含量为0.02%,胆汁中胆红素含量为0.050.08%2、杂质多 3、易变性失活,一、选择预处理方法的依据,1、生物活性物质来源、存在状态“胞内”、“胞外”、前体2、后续工艺要求3、稳定性 可被材料中酶、微生物破坏,还可能受酸、碱、盐、重金属离子、机械搅拌、温度、甚至空气和光线作用改变活性。,二、动物材料的预处理,绞肉机绞匀浆和组织捣碎,三、细胞培养液的预处理,(一)、杂蛋白质的去除 1、加入凝聚剂 凝聚作用(coagulation)是指在某些电解质作用下,使胶体粒子的扩散双电层的排斥电位降低,破坏了胶

2、体系统的分散状态,而使胶体粒子聚集的过程。(P117页),在发酵液中加入具有相反电性的电解质:、中和胶粒电性,降低双电层排斥力。、离子的水化作用,破坏胶粒的水化层。影响凝聚作用的主要因素有无机盐的种类、化合价以及无机盐的用量等。阳离子对带负电荷的胶粒凝聚能力的次序为:Al3+Fe3+H+Ca2+Mg2+K+Na+Li+常用的凝聚剂有:Al2(SO4)318H2O、AlCl36H2O、FeCl3、ZnSO4、MgCO3等。,2、加入絮凝剂 絮凝剂是天然的或人工合成的有机高分子化合物,如壳聚糖、海藻酸钠、明胶及酰胺类衍生物、聚苯乙烯类衍生物和聚丙烯酸类等。絮凝剂具有长链线状的结构,易溶于水,其分子

3、量可高达数万至一千万以上,在长的链上含有相当多的活性功能团。,影响絮凝效果的因素主要有:(1)絮凝剂的分子量:(2)絮凝剂的用量:(3)溶液pH值:(4)搅拌速度和时间:,3、变性沉淀 4、等电点沉淀 5、加各种沉淀剂沉淀 6、吸附 例如四环素发酵液中加入黄血盐和硫酸锌,生成亚铁氰化锌钾 K2Zn3Fe(CN)62的胶状沉淀,能将杂蛋白质和菌体等黏附在其中而除去。,二、多糖的去除,可用酶转化为单糖 黏多糖可与一些阳离子表面活性剂如十六烷基溴化铵(CTAB)生成沉淀去除。三、高价金属离子的去除 1、离子交换法 2、沉淀法 Ca2+草酸 Mg2+磷酸盐,三聚磷酸钠 Fe3+黄血盐,第二节 细胞破碎

4、,一、机械法 1、匀浆法 2、珠磨法 3、超声波,三、化学法 1、化学试剂处理 2、酶解法 3、制成丙酮粉,二、物理法 1、干燥 2、冻融 3、渗透压冲击,一、机械法,(一)高压匀浆器,(二)高速珠磨机,(三)超声波振荡器,二、物理法,(一)干燥法 空气干燥、真空干燥、喷雾干燥、冷冻干燥(二)冻融法(三)渗透压冲击法 先把细胞放在高渗溶液中,细胞发生收缩,然后将介质快速稀释或将细胞转入水或缓冲液中,细胞快速膨胀,使产物释放至溶液中,三、化学法,(一)、加入化学试剂 1、用碱处理 2、用脂溶性有机溶剂 3、表面活性剂(二)酶解法(三)制成丙酮粉,四、选择破碎方法的依据,(一)、规模及成本 工业规模:高压匀浆和珠磨(二)、目的物的稳定性(三)、破碎效果和产物释放率,第三节 液-固分离,一、过滤(一)过滤方式 1、常规过滤 2、错流过滤,(二)、过滤设备,1、板框过滤机,2、真空鼓式过滤机,(三)过滤介质和助滤剂 1、过滤介质:滤布或膜 2、助滤剂:要求为惰性物质、无毒、有一定细毒及硬度,成本低廉。常用有:硅藻土、纸浆、石棉、纤维素等,二、离心分离,1、过滤式离心机2、沉降式离心机,3、管式离心机,三、影响液-固分离的因素,(一)、悬浮物种类(二)、悬浮液黏度(三)、其他因素,

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