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1、课题1 菊花的组织培养,在人工培养基上，离体培养植物的器官、组织、细胞和原生质体，并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。,组织培养,1.植物组织培养的原理是什么？,植物细胞具有全能性，即生物体的细胞，具有使后代细胞形成完整个体的能力。,思考：,离体的植物器官、组织、细胞（外植体）,脱分化,愈伤组织,再分化,根芽,植物体,2.植物组织培养过程,3.植物组织培养条件,离体状态含有全部营养成分的培养基(包括植物激素)一定的温度、空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等,不同的植物组织,培养的难易程度差别很大.菊花的组培,一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝.,4.实验操作(视频),（一）制备MS
2、固体培养基（二）外植体消毒（三）接种（四）培养（五）移栽（六）栽培,1.下图是植物组织培养的简略表示。据此回答：（1）表示_，它能被培养成为的根本原因是_。（2）表示_，它与相比分化程度_，全能性_。,答案：（1）离体的植物组织或器官 植物细胞具有全能性（2）愈伤组织 低 高,2.你能说出MS培养基中各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？,提示：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。微生物培养基以
3、有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。,3基因型为AaBb的水稻（24条染色体）的花药通过无菌操作，接入试管后，在一定条件下培养形成试管苗。（1）愈伤组织是花粉细胞不断分裂后形成的不规则的细胞团，愈伤组织形成中，必须从培养基中获得 和小分子有机物等营养物质。（2）要促进花粉细胞分裂生长，培养基中应有 和 两种激素。（3）愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根，再由芽发育成叶和茎。这一过程必须给予光照，其原因是。（4）试管苗的细胞核中含有 条脱氧核苷酸链。（5）培育成的试管苗可能出现的基因型有。,答案：（1）水、无机
4、盐（2）细胞分裂素 生长素（3）叶绿素的形成需要光 试管苗的生长发育所需营养来自叶绿体利用光能制造的有机物（4）24（5）AB、Ab、Ab、ab,（一）被子植物的花粉发育,雄蕊：,花丝,花药：囊状结构，内有很多花粉粒,花粉是小孢子母细胞经过减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞。花粉的发育要经历：四分体时期、单核期、双核期,1花粉母细胞,花粉的发育,（二）产生花粉植株的两种途径原因是什么？,这两种途径的区别主要取决于培养基中 激素 的种类及其 浓度 的配比。,（三）影响花药培养的因素1、材料的选择不同植物同一植物的不同生理状况（花期早期初花期）合适的花粉发育期（单核居中期与靠边期之间）
5、此外，植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等.2、培养基的组成,（四）实验操作(视频),1.材料的选取染色镜检2.材料的消毒酒精、氯化汞、次氯酸钙3.接种和培养（五）结果分析与评价,植物组织培养技术与花药培养技术的异同点,离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织，再分化成丛芽，诱导出根，然后进行移栽。,外植体为体细胞，染色体数无需加倍。,取材为花药，培养的为单倍体幼苗，植株弱小，高度不育，必须用秋水仙素处理，使染色体数目加倍，恢复正常植株的染色体数，而且为纯种。,材料的选择：花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。一般，月季的花药培养时间选在五月初到五月中旬，即月季的初花期。选择合适的花粉发育
6、时期也是提高诱导成功率的重要因素。一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。为了挑选到单核期的花药，通常选择完全未开放的花蕾。,（一）材料的选取,选择花药时，一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。最常用的方法有醋酸洋红法。但是，某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。,.现有甲、乙两个烟草品种（2N=48），其基因型分别为aaBB和Aabb，这两对基因位于非同源染色体上，且在光照强度大于800勒克斯时，都不能生长，这是由于它们中的一对隐性纯合基因（aa或bb）作用的结果。取甲乙两品种的花粉分别培养成植株，将
7、它们的叶肉细胞制成原生质体，并将二者相混，使之融合，诱导产生细胞团。然后，放到大于800勒克斯光照下培养，结果有的细胞团不能分化，有的能分化发育成植株。请回答下列问题：（1）甲、乙两烟草品种的花粉的基因型分别为 和。（2）将叶肉细胞制成原生质体时，使用 破除细胞壁。（3）在细胞融合技术中，常用的促融剂是。（4）细胞融合后诱导产生的细胞团叫。（5）在大于800勒克斯光照下培养，有 种细胞团不能分化；能分化的细胞团是由 的原生质体融合来的（只考虑2个原生质体的相互融合）。由该细胞团分化发育成的植株，其染色体数是，基因型是。该植株自交后代中，在大于800勒克斯光照下，出现不能生长的植株的概率是。,答案：（1）aB Ab（2）纤维素酶（3）聚乙二醇（4）愈伤组织（5）2 甲、乙两烟草品种的花粉 48 AaBb 7/16,专题知识归纳,再见!,
