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1、生物科学综合实验,离体肠段平滑肌的生理特性,目的要求,1学习离体肠段平滑肌的实验方法。2了解肠段平滑肌的生理特性。,基本原理,1、离体实验法原理：将离体组织器官置于模拟体内环境的溶液中，可在一定时间内保持其功能。本实验以台氏液作灌流液，在体外观察及记录哺乳动物离体肠段的一般生理特性。,基本原理,2、哺乳动物消化管平滑肌生理特性：具有肌组织共有的特性，如兴奋性、传导性和收缩性等。但消化管平滑肌又有其特点，即兴奋性较低，收缩缓慢，富有伸展性，具有紧张性、自动节律性，对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等。这些特性可维持消化管内一定压力，保持胃肠等一定的形态和位置，适合于消化管内容物的理化变化，在体内受
2、中枢神经系统和体液因素的调节。,动物与器材,动物：兔仪器：麦氏浴槽、支架、烧瓶夹、酒精灯(电炉)或恒温水浴锅，烧杯(500ml 3个、lOOml 1个)，20ml注射器、张力传感器、计算机采集系统、二联球、温度计(2支)药品：台氏液(配方见p220)、肾上腺素(1：10 000)、乙酰胆碱(1：10 000)、阿托品针剂(1支)。,方法与步骤,1准备工作：自由组合，6人组成一个实验小组，每个小组选出一名组长，作为实验召集人和联络人，并对实验全程负责；以小组为单位认真研读实验教材，将实验原理和步骤熟记于心；购买动物，要求活体，健康状况要好，不能太小也不能太老；（每个大组采购一只兔子，由大组长负责
3、）药品配制，主要是台式液的配制，每个大组选派12名成员共同配制，数量为5L，配制好后将2L台式液放入冰箱冷藏室，其余室温存放备用；,方法与步骤,2实验过程：（1）装好实验装置，向麦氏浴漕内加入台氏液至浴槽高度的2/3处。外部容器为水浴锅加自来水。启开电源，恒温工作点定在38。（2）标本制备：用立掌(或木槌)猛击兔后头延髓部或静脉注射空气，致其昏迷，腹部剪毛后，沿正中线切开皮肤和腹壁，找到胃幽门与十二指肠交界处，快速沿肠缘剪去肠系膜，在十二指肠起始端扎一线，剪取十二指肠、空肠，放入4左右的冷台氏液内。用20m1注射器冲洗肠内容物，冲洗干净后剪成若干约23cm长的小肠段(每一实验小组一段)。在其两
4、端结扎，将一端结扎线连于浴槽，另一端扎线与张力传感器相连。将肠段完全浸浴在调好温度的麦氏浴槽中。适当调节传感器的高度，使其与标本之间松紧度合适。此相连的线必需垂直，并且不能与浴槽壁接触，避免摩擦。,方法与步骤,（3）开启计算机采集系统，接通与张力传感器相连的通道。调节增益与扫描速度，使肠段的运动曲线清晰地显示在显示器上并记录肠段活动曲线。（4）实验观察观察、记录38 台氏液中的肠段节律性收缩曲线。观察、记录25台氏液中的肠段节律性收缩曲线。当出现明显变化后，立即用新鲜37台氏液冲洗，待恢复正常。同法加入45台氏液并记录曲线变化，同时观察肠段紧张度变化。当出现明显变化后，立即用新鲜37台氏液冲洗
5、并待恢复。由于以上台式液中未加入药物，可以回收使用。以下加入药物的台式液不可再用。,方法与步骤,待麦氏浴槽内的台氏液的温度稳定在38后，加1:10 000肾上腺素12滴于麦氏浴漕中，观察肠段收缩曲线的改变。在观察到明显的作用后，用预先准备好的新鲜38台氏液冲洗三次。同法加入12滴乙酰胆碱(1：10000)，观察并记录曲线变化。加入3滴阿脱品后立即加入与同样剂量的乙酰胆碱，记录并观察曲线变化。比较曲线有何不同,注意事项,1标本安装好后，应在新鲜38台氏液中稳定510min，有收缩活动时即可开始实验。2加药前必须准备好更换用的38台氏液。3上述药物剂量只是参考，效果不明显可补加，每次加药出现效果后，必须立即更换浴槽内的台氏液并冲洗3次，待肠肌恢复正常活动后再观察下一项目。4浴槽内台氏液要保持一定高度。,参考曲线,思考题,1本实验是否可用麻醉动物的肠段?为什么?2进行哺乳类动物离体组织器官实验时，需控制哪些条件?3为什么加入各种药物会引起离体肠段活动的变化?其机理是什么?4加人阿托品后再加入乙酰胆碱，肠段活动受到抑制，为什么?5根据实验结果说明平滑肌的生理特性。,创新与探索,1设计实验，观察腹泻或止泻药物对离体肠段平滑肌的影响。2设计实验，分析哪些体液因素会对肠平滑肌产生影响。,
