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1、病理生理学实验,沧州医专病理教研室 李志红,缺 氧,实验目的,1.复制乏氧性、血液性、CO中毒性缺氧。2.观察不同类型缺氧时呼吸和血液颜色的变化。3.通过机体神经系统机能状态改变、外界环境温度变化对缺氧耐受性的影响，了解条件因素在缺氧发病中的重要性和临床应用冬眠、低温治疗的实用意义。,【实验原理】氧是生命活动所必需的物质。当组织得不到充足的氧或不能充分利用氧时，组织的代谢、功能、甚至于形态结构都可能发生异常变化，这个病理过程就叫做缺氧。根据缺氧的原因和血氧指标的变化，把缺氧分为了4个类型，包括乏氧性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织性缺氧。不同的缺氧条件均可造成动物的缺氧状态，并表现出相应的机
2、能代谢改变。但动物的不同年龄、不同机能状态，对缺氧的耐受能力也不尽相同,【实验动物】成年小白鼠及初生小白鼠【药物与器材】钠石灰，甲酸，浓硫酸，5%亚硝酸钠，1%美兰，0.1%氰化钾，生理盐水。1%咖啡因，0.25%氯丙嗪，生理盐水，温水，碎冰块，制冰机，恒温水浴箱小白鼠缺氧瓶(100125ml带塞锥形瓶或广口瓶)，CO发生装置，广口瓶，5ml和2ml刻度吸管，lml注射器，酒精灯，剪刀，锤子，温度计，天平，剪刀，镊子等,【实验步骤】一、几种类型的缺氧1乏氧性缺氧（1）取钠石灰少许(约5克)放入缺氧瓶内，小白鼠一只放入此缺氧瓶内，观察动物的一般情况，呼吸频率、深度、皮肤和口唇的颜色，然后塞紧瓶塞
3、，记录时间，观察动物缺氧后的表现与正常有何不同，直到动物死亡为止。记录死亡时间。（2）保留动物尸体，待2、3、4实验做完后，再依次打开其腹腔，比较血液和内脏的颜色。,2一氧化碳中毒性缺氧（1）装好CO发生装置（2）将小白鼠一只放入广口瓶中，观察其正常表现，然后与CO发生装置连接。（3）取甲酸3ml放入试管内，加入浓硫酸2ml，塞紧，若CO产生不足，可用酒精灯在试验管底部加热，加速CO的产生，但不可以过热至液体沸腾，以防试管爆炸或CO产生过多过快，动物死亡，血液颜色改变不明显。（4）观察指标与方法同上。,CO 发生装置,3亚硝酸钠中毒性缺氧（1）取体重相近的两只小白鼠，观察正常表现后，分别向腹腔
4、注入5%亚硝酸钠0.3ml，其中一只注入亚硝酸钠后，立即向腹腔内注入1%美兰溶液0.3ml，另一支注入生理盐水0.3ml。（2）观察指标与方法同上，比较两鼠表现及死亡时间有无差异。,4氰化钾中毒性缺氧（1）取小白鼠一只，观察正常表现后，腹腔注射0.1%氰化钾0.2ml。（2）观察指标同上。,5另取一只正常小白鼠，用颈椎脱臼法处死，与上述四只小白鼠依次打开其腹腔，比较血液和内脏的颜色。,二、影响缺氧耐受性的因素 1环境温度变化对缺氧耐受性影响（1）取小白鼠缺氧瓶三个。各放入钠石灰少许。（2）取500m1烧杯二个，一个加碎冰块和冷水、将其水温调到04，另一个加入热水，其温度调到4042。（3）取体
5、重相近的小白鼠三只，称重后，分别装入缺氧瓶内，将三个缺氧瓶分别置于冷水、室温、温水中，瓶塞盖紧后开始计时。（4）持续观察各鼠在瓶中的活动情况，待小鼠死亡后，计算存活时间。比较三只小白鼠表现及死亡时间有无差异。,2神经系统机能状态不同对缺氧耐受性的影响（1）取体重相近的小白鼠三只 甲鼠：腹腔注射咖啡因0.1m1/10g体重。乙鼠：腹腔注射0.25%氯丙嗪0.1m1/10g体重.丙鼠：腹腔注射0.25%生理盐水0.1m1/10g体重。（2）约1520分钟后，将三只小白鼠分别放入有钠石灰的缺氧瓶内，密闭后开始计算存活时间。比较三只小白鼠有何差异。,3年龄对缺氧耐受性的影响 新生小白鼠和成年小白鼠一同
6、放入缺氧瓶内，分别记录其死亡时间。,【实验结果】,不同类型缺氧时观察指标的结果比较,环境温度变化对缺氧耐受性影响,神经系统机能状态不同对缺氧耐受性的影响,年龄因素对缺氧耐受性的影响,【注意事项】1缺氧瓶一定要密闭，可用凡士林油涂在瓶塞边缘。2小白鼠腹腔注射，应稍靠左下腹，勿损伤肝脏，也应避光将药液注入肠腔及膀胱内。3氰化钾有剧毒，应妥善保存，使用时勿沾染皮肤、黏膜、特别是破损处，实验后将物品洗干净。4一氧化碳有毒，防止其过度溢出。5在血液肝脏颜色的对比观察时，事先编号，以免搞错。,【讨论思考题】1.一氧化碳中毒和亚硝酸钠中毒性缺氧血液颜色有何异同?2.在乏氧性缺氧实验中，如果缺氧瓶中不加钠石灰对实验结果有何影响?3.通过本实验解释低温麻醉的原理?,谢谢,
