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1、尿液蛋白质检查,一、尿液微量白蛋白的测定,健康人的尿液白蛋白一般小于20mg/L,大于30mg/L时即提示异常。,定义：微量白蛋白是指尿中白蛋白含量超过 健康人水平，但常规尿蛋白试验为阴性的低 浓度白蛋白。,检测方法：染料结合法、放射免疫分析、酶 联免疫吸附、免疫比浊分析、胶体金纸片,报告方式：定时留尿法（g/ml;mg/24h)晨尿法(mg/L)随机留尿法(mg/mmol Cr;mg/g Cr),国际上以尿白蛋白排泄率20 mg/L 或尿总蛋 白30mg/24h作为尿微量白蛋白的临界值。,临床意义：,尿微量白蛋白在糖尿病肾病中的应用,尿微量白蛋白在心血管疾病中的应用,尿微量白蛋白在炎症方面的
2、应用,其他,二、Bence-Jones protein：,实质是免疫球蛋白轻链或其聚合物，单聚体分子量为2.3万。,凝溶蛋白：pH4.55.5，56条件加热出现白色混浊及凝固，100 煮沸以后混浊消失或明显减退，再冷却时又可重新凝固。,蛋白电泳时可在2至球蛋白区带间的某个部位出现M区带。,检测方法：对甲苯磺酸沉淀筛选实验：灵敏度3mg/L,热沉淀法验证,乙酸纤维素膜电泳或者聚丙烯酰胺凝胶电泳：M带,免疫固定电泳：区带电泳分离蛋白后，立即将浸有特异抗L链血清的薄膜条直接放到预计出现异常蛋白带的位置上，使之产生抗原抗体的复合物反应。,免疫扩散实验：用特异的L链血清进行免疫扩散实验。,临床意义：多发
3、性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症,三、2-microglobulin,性质：一种低分子量的蛋白质（1.18万），是细胞膜上完整组织相溶性抗原HLA的一部分。检测方法：放射免疫分析（RIA）、酶免疫分析（EIA）参考值:血2-M 3.0mg/L 尿2-M0.2 mg/L临床意义：肾小管疾病、血清2-M异常增高,四、尿液血红蛋白、肌红蛋白及其代谢产物检查,1.hemoglobin正常人血浆中游离血红蛋白与珠蛋白结合，以复合物的形式运转至单核-巨噬细胞系统被代谢，不能从尿液中排出。疾病时尿液中血红蛋白有两个来源：1.发生血管内溶血，超过珠蛋白的结合能力，游离血红蛋白从尿液中排出。2.尿路（尤其是上尿路）
4、出血，红细胞在低渗或者高渗的环境下破坏逸出的血红蛋白。,检测方法：试纸法：利用血红蛋白中亚铁血红素具有类过氧化物酶作用，在邻联甲苯胺等供氢体存在下，使过氧化物还原为水，而邻联甲苯胺被氧化成有色物质。免疫测定方法：利用抗人血红蛋白单克隆抗体,临床意义：血管内溶血 泌尿道出血,2.myoglobin 肌红蛋白是横纹肌、心肌细胞内的一种含亚铁血红素的蛋白质，分子量小，易通过肾小球。测定方法：纸片法：原理与血红蛋白测定类似。肌红蛋白能溶于0.8饱和度的硫酸铵溶液中 免疫法：利用单克隆抗体 ELISA、,3.hemosiderin 当发生血管内溶血时，大部分血红蛋白随尿排出，其中一部分血红蛋白被肾小管上
5、皮细胞再吸收后在肾小管上皮细胞内分解形成血铁黄素，再随细胞脱落至尿中排出。,检测方法：Prussian反应，当尿中含有铁血黄素时，其中高铁离子与亚铁氰化钾作用，在酸性环境下，产生蓝色的亚铁氰化钾沉淀。,注意事项：1.避免铁污染；2.清晨第一次尿阳性率较高,临床意义：血管内溶血、行进性血红蛋白尿。,4.porphyrin-氨基酮戊酸、卟胆原 尿卟啉 粪卟啉 原卟啉+Fe 血红素 卟啉尿是指尿中排出过多的卟啉或者其前体测定方法：酸萃取后，紫外线进行检测临床意义：先天性卟啉病、肝性卟啉病,五、TammHorsfall protein,TH蛋白由Henle袢升支与远曲小管的上皮细胞的高尔基复合体产生，
6、是一种肾特异性蛋白质。是构成管型的一种重要蛋白。检测方法：酶联免疫吸附法、放射免疫法 临床意义：协助诊断上尿路疾患 有助于泌尿系统结石形成机制的研究。,六、尿液酶测定,尿液酶的来源：血液的酶：淀粉酶、溶菌酶肾实质的酶：肾小管刷状缘（-GT、AAP、LAP、ALP、-GLU）、溶菌体（NAG、ACP、-葡萄糖醛酸苷酶）、胞浆（LDH）及线粒体（AST）尿路及生殖系统的酶：前列腺（ACP、NAG）、精液（LDH、hyaluronic acid）、肿瘤细胞,尿液酶测定时尿液标本的处理方法：尿液通常为弱酸性，且蛋白质浓度较低，不利于尿酶活力的保存，因此必须及时测定和处理。大部分尿酶活性比血浆酶活性低，
7、在测定时适当加大标本用量或延长酶作用时间。尿液中含有较高浓度的低分子物质，如尿素、尿酸、肌酐、硫酸盐、磷酸盐等，他们可能是某些酶的抑制剂，因此必须对尿液标本进行预处理：超滤法、透析法、凝胶过滤法,1.N-乙酰-D-氨基葡萄糖苷酶(N-acetyl-D-glucosaminidase,NAG）NAG是一种位于溶酶体内的酸性水解酶，存在于所有组织中，以前列腺和肾近球肾小管溶酶体含量最高。临床应用：各种肾脏疾病：急慢性肾功能不全、肾病综合症肾移植排斥反应：早期诊断药物性肾损害：其他系统疾病：糖尿病肾病、高血压肾病,2.-葡萄糖苷酶（-glucosdiase,-GLU）-GLU主要存在于肾小管上皮细胞刷状缘，在血清中的含量极低，且分子量大（9万），不易通过肾小球，因而尿中的-GLU主要来自肾小管上皮细胞。测定：用麦芽糖做底物，经-GLU的水解作用生成葡萄糖，再用葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖的生成率。临床意义：肾小管损伤的敏感指标,3.谷氨酰转移酶（-glutamyl transferase，-GT）-GT广泛存在于人体各组织中，以肾、肝、胰等组织含量最高。尿中-GT浓度较高，原尿无需预先浓缩。用-谷氨酰对硝基苯胺做底物，测定游历的对硝基苯胺量。临床意义：-GT常作为药物性肾损害的诊断指标。-GT在急性肾炎、肾盂肾炎、肾结石时升高-GT在慢性肾衰、肾癌时降低。,
