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1、尿糖、尿酮体检查,主讲 王宝峰,一、尿糖检查尿糖？健康人排出量 2.8 mmol/24h,糖还原实验：葡萄糖含有醛基在热碱性环境中可将Cu2+还原为低价的氧化亚铜。,1.尿液葡萄糖糖测定方法,邻甲苯胺法:(O-TB法):葡萄糖与邻甲苯胺在强酸溶液中加热,葡萄糖的醛基与邻甲苯胺缩合形成葡萄糖基胺,后者脱水生成席夫碱,再经结构重排,生成有色化合物,在630nm有吸收峰。,氧化酶试纸法阴性，还原实验法阳性 试纸质量问题 葡萄糖以外的其他还原糖 尿液中含有较高浓度的还原性物质 存在少量葡萄糖伴有高浓度的还原物质氧化酶试纸法阳性，还原实验法阴性 尿液标本被过氧化物或者次氯酸盐污染,尿糖测定结果分析：,2
2、.尿液其他糖的检验方法,果糖：果糖与溶于强酸的间苯二酚溶液加热后显红色反应。,半乳糖：与硝酸共热，可被氧化为白色的粘酸 结晶。,粘多糖：甲苯胺蓝法、十六烷三甲基溴化铵实验。,戊糖：戊糖与盐酸共沸后生成糠醛，再与二羟基甲苯 作用形成绿色化合物。,3.尿液糖的纸层析法,在层析法中有固定相和流动相，两相间可做相对流动。当样品中各种糖随流动相通过固定相时，即反复发生吸附、脱附、解析或其他亲和作用，由于各种糖在上述性能上的差异而产生移动速度的差异，而相互分离。Rf=溶质斑点中心与起始点距离：溶剂前沿与起始点距离,4.尿糖检查的临床意义,糖尿,非葡萄糖尿,葡萄糖尿,胰岛外性糖尿,生理性糖尿,摄食性糖尿,妊
3、娠性糖尿,神经精神性糖尿,病理性糖尿,真性糖尿,半乳糖尿,果糖尿,戊糖尿,其他糖尿,二、尿液酮体检查酮体：脂肪酸分解代谢的中间产物 丙酮（CH3COCH3）乙酰乙酸（CH3COCH2COOH）-羟丁酸（CH3CH（OH）CH2COOH）24小时排泄量：丙酮3mg；乙酰乙酸9mg；-羟丁酸5mg,1.尿液酮体检查方法,Lange法：Rothera改良法试纸法 尿中丙酮和乙酰乙酸在碱性溶液中与亚硝基铁氰化钠反应生成紫色化合物。注意事项：1.标本新鲜；2.该法对乙酰乙酸的灵敏度最高，-羟丁酸不反应。,尿中乙酰乙酸的检测：（Gerhardt法）试验原理：尿液中的乙酰乙酸与氯化高铁作用形成赭红色乙酰乙酸
4、铁化合物。该法对乙酰乙酸测定的敏感度为700mg/L，尿液久置后乙酰乙酸可转变为丙酮，使结果偏低。尿液中的酚类、安替比林、水杨酸盐和重碳酸钠等药物可呈假阳性反应。,-羟丁酸检测：-羟丁酸+NAD 乙酰乙酸+NADH 在乳酸脱氢酶抑制剂存在下，加入-羟丁酸脱氢酶和NAD，测定340nm NADH增加的速度。,-羟丁酸 脱氢酶,意义：-羟丁酸的肾阈比较高，如尿中出现较多-羟丁酸。表明酮血症加重。,2.尿液酮体检查临床意义,健康人尿中酮体含量甚微。尿中酮体增加时，称为酮尿。常见于未控制的糖尿病、运动、寒冷刺激、饥饿、呕吐、痢疾等。乙酰乙酸是酮尿的主要成分，且在以亚硝基铁氰化纳反应为基础的检查法中反应率最高，故尿中酮体定性即为乙酰乙酸定性。-羟丁酸的肾阈较高，如尿中出现多量-羟丁酸，常说明酮血症加重。,思考题：葡萄糖（试纸法）+-+葡萄糖(邻甲苯胺)+-葡萄糖（班氏法）+-,
