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1、慢性非细菌性前列腺炎与细胞因子的关系研究,怀化医专：李树平,主要内容,一、研究背景二、相关基本知识三、CAP与细胞因子的关系研究,一、研究背景,前列腺炎(prostatitis)是成年男性泌尿生殖系统常见疾病之一,约有50%的男性在一生中的某个时期会受到前列腺炎的影响1。虽然前列腺炎不是一种直接威胁生命的疾病,但它严重影响患者的生活质量。其中慢性前列腺炎(chronic prostatitis,CP)更为多见,有资料显示CP患者占所有前列腺炎患者60%80%2。,据WHO统计,慢性前列腺炎发病率逐年增高，二十世纪六七十年代，发病率为10%,到目前为止，增加近3倍。其中大于60岁的老年人约50%
2、患有前列腺疾病,大于70岁发病率高达88%。目前,其病因和发病机制尚未完全阐明。,图1 前列腺炎发病趋势,慢性非细菌性前列腺炎（chronic abacterial prostatitis，CAP）又是前列腺炎中最常见的类型，约占慢性前列腺炎的90%以上。许多研究表明：前列腺炎患者前列腺液中细胞因子水平的变化与前列腺炎的发病机制有关。为了探讨血清和前列腺液中细胞因子检测对CAP的辅助性诊断和分型的价值，提出此研究课题。,二、相关基本知识,（一）前列腺解剖及功能 1.前列腺解剖 前列腺为男性特有的器官，是男性生殖器官中最大的附属性腺。其形态像栗子样大小，重约15g左右。由腺细胞、纤维组织和平滑肌
3、组成。,前列腺前面观 前列腺后面观,它位于盆腔底部，其上方是膀胱，下方是尿道，前方是耻骨，后方是直肠，上界是膀胱颈部，下界是尿生殖隔。,2.前列腺功能,外分泌功能,前列腺分泌的前列腺液参与精液组成，约占精浆的12%32%，对维持精子的正常功能具有重要作用。前列腺液中含有高浓度的酸性磷酸酶和纤维蛋白溶解酶，使凝固的精液重新液化。前列腺液为碱性，可缓冲阴道中的酸性分泌物，以适应精子的生存，有利于精子的活动。另外，前列腺液中含有大量透明质酸酶，使精子容易穿过子宫颈粘液栓及卵细胞的胶状腺，有利于受精及着床。,内分泌功能,前列腺内含有丰富的5-还原酶，可将睾酮转化为具有生理活性的双氢睾酮。双氢睾酮在良性
4、前列腺增生症的发病过程中起重要作用。因此，临床上，通过阻断5-还原酶，可减少双氢睾酮的产生，从而使增生的前列腺组织萎缩，对前列腺增生症的治疗有一定的作用。,排尿功能,前列腺包绕尿道，与膀胱颈贴近，构成了近端尿道壁，其环状平滑肌纤维围绕尿道前列腺部，参与构成尿道内括约肌。当想要排尿时，伴随着逼尿肌的收缩，内括约肌松弛，膀胱腔内的高压与尿道的低压，形成明显压力差，致使尿液从膀胱顺利排出。,排精功能,由于两条射精管从前列腺实质内通过，当射精时，前列腺和精囊腺的肌肉收缩，协同盆底肌肉共同收缩，将输精管和精囊腺中的内容物经射精管压入后尿道，同时尿道内括约肌闭合，进而排出体外。,（二）前列腺疾病分类,（三
5、）前列腺炎分类,（四）慢性前列腺炎检查与治疗,（五）前列腺炎病因,主要指什么？,（六）细胞因子概念及命名,细胞因子是免疫细胞和炎症细胞产生的调节局部和全身免疫反应的小分子蛋白质,主要以自分泌和旁分泌产生。目前,已发现的细胞因子总数30余种。其中，18种细胞因子以白细胞介素(interleukin,IL)命名,如：IL-2、IL-4等，其他细胞因子仍以其最初生物学效应命名,如肿瘤坏死因子(tumornecrosis factor,TNF)等。,什么是细胞因子？,细胞因子分类及作用,抑制炎症反应，促进组织修复和再生,促进炎症反应,促进细胞增殖和分化，参与细胞免疫调节,三、慢性非细菌性前列腺炎与细胞
6、因子的关系研究,为什么会想到研究此内容？（一）资料与方法1.临床资料 2.标本采集 3.试剂器材 4.检测方法 5.统计学分析,1.临床资料,依据美国国立卫生院前列腺症状指数（NIH-CPSI）评分、前列腺液常规检查、前列腺按摩前、后尿标本细菌培养和白细胞计数检测将筛选的出86例CAP患者分为两组。(1)CAP组:60例(2)CAP组:26例(3)正常对照组：20例,CAP组（26例）,CAP组（60例）,2.标本采集,病例组和对照组均抽静脉血3.0ml,分离血清待用。按摩取得前列腺液标本，除少许行常规检查外，其余标本全部收集于离心管中，储存于-20备用；前列腺按摩前、后分别取患者尿标本做细菌
7、培养。,3.试剂器材,IL-2、IL-4、IL-8、TNF-的ELISA试剂盒均购自上海森雄科技实业有限公司,全自动酶标仪为美国BiRad产品。,4.检测方法,采用ELISA法测定IL-2、IL-4、IL-8、TNF-,PCR法检查病原体，操作严格按试剂盒说明书进行。,5.统计学分析,数据以x s表示，采用SPSS10.0软件包进行统计学分析，CAP组、CAP组、对照组三组间的比较用t检验，WBC数与细胞因子间的相关性比较采用spearman等级相关分析。引起CAP不同病原体间血清细胞因子水平的比较用方差分析，再用Q检验进行两两比较，P0.05有显著性差异。,（二）结果,1.病例组和对照组血清
8、中的4种细胞因子检测结果,Compared with the control group,P 0.05，P 0.01Compared with the CAP group,P 0.05,表1 病例组和对照组血清中4种细胞因子的比较（xs）,图2 血清中4种细胞因子在病例组和对照组的含量变化,2.病例组和对照组前列腺液中的WBC和4种细胞因子检测结果,表2 病例组和对照组前列腺液中WBC、4种细胞因子比较（Xs）,Compared with the control group,P 0.05;:r0.11,P 0.05;:r0.62,P 0.05,图3 前列腺液中4种细胞因子在病例组和对照组的含量
9、变化,CAP组血清和前列腺液中的IL-2、IL-8、TNF-，以及血清IL-4均有不同程度的升高，与CAP组和正常对照组相比差异有显著性（p 0.05或 p 0.01），前列腺液中的IL-4在CAP组、CAP组、正常对照组间比较差异无显著性（P 0.05），CAP组血清和前列腺液中的IL-2、IL-4、TNF-与正常对照组相比无显著性差异（P 0.05）；前列腺液中WBC数与IL-8水平存在正相关（r0.62，p 0.05）。,3.血清中4种细胞因子水平在不同病原体间的变化,表3 不同病原体感染的CAP患者血清中4种细胞因子含量（Xs，pg/ml）,图4 血清中4种细胞因子在不同病原体间和对照
10、组的含量变化,表4 不同病原体感染的CAP患者血清中4种细胞因子含量均数间Q检验结果,注:：P0.05，：P0.05，：P0.01,28例衣原体与31例支原体感染患者血清中的IL-2、IL-4、IL-8、TNF-与对照组、未检出病原体组相比差异显著（p0.05)，其中IL-4与对照组、未检出病原体组比较差异均无显著性(p0.05)；10例未检出病原体患者血清中的IL-2、IL-4、TNF-与对照组比较差异也均无显著性(p0.05)，其中IL-8含量在衣原体、支原体、病毒感染及未检出病原体患者血清中依次减少，与对照组间的差异均有极显著性（p0.01）。因此IL-8可作为CAP诊断、分型的较佳指标
11、。,（三）讨论,细胞因子由免疫细胞和炎症细胞产生，其主要作用是通过信号转导调节局部和系统的免疫反应，控制周围环境。病理研究表明，前列腺细胞之间存在大量的T细胞，所以前列腺局部存在复杂的细胞免疫，而细胞免疫是通过细胞因子之间相互作用实现的。IL-2、IL-4、IL-8及TNF-均为具有广泛生物学功能的细胞因子，主要介导和调节免疫应答及炎症反应；在机体某部位存在炎症时，各种细胞因子水平可有不同程度的变化。,1.白细胞介素-2（IL-2）,IL-2是一种重要的免疫因子，它既可激活T细胞系统产生细胞免疫，又可激活B细胞系统产生体液免疫。我们的研究结果显示，CAP组血清和前列腺液中IL-2与CAP组、对
12、照组间差异有显著性（P 0.05）,因此，测定血清和前列腺液中IL-2含量有助于CAP的分型诊断。,2.白细胞介素-4（IL-4）,IL-4属于Th2细胞产生的特征性细胞因子，又称B细胞生长因子，其作用主要是抑制细胞免疫，促进体液免疫，增强特异和非特异性杀伤作用。测定结果显示，CAP组血清中IL-4含量与CAP组、对照组间差异有显著性（P 0.05），而前列腺液中IL-4含量在CAP组、CAP组、对照组间无显著性差异（P 0.05），与杨士杰等4研究的结果基本一致，因此，测定血清中IL-4含量有助于CAP的分型诊断。,3.白细胞介素-8（IL-8）,IL-8是一种强效相对低分子质量炎症趋化因子
13、，主要由单核巨噬细胞、成纤维细胞、内皮细胞和多种上皮细胞产生，其主要功能是诱导中性粒细胞和单核细胞向炎症部位聚集和调节白细胞黏附分子的表达，诱导局部炎症反应中白细胞的趋化活性，引起局部组织炎症和损伤。,本研究结果显示,血清和前列腺液中IL-8水平在CAP组、CAP组、对照组间差异均有显著性（p 0.05或 p 0.01），且在同一患者前列腺液中的含量比血清约高4倍，前列腺液中WBC数与IL-8水平呈正相关（r0.62,P 0.05），与文献报道5，6的研究结果一致，因此IL-8可作为CAP分型诊断的较佳指标之一。,4.肿瘤坏死因子（TNF-）,TNF-主要由活化的单核巨噬细胞产生，在慢性前列腺
14、炎的发生发展过程中起重要作用;它主要作用于内皮细胞，增加某些黏附分子的表达，而促进炎症细胞粘附、游走、浸润和促进巨噬细胞释放炎症介质而参与炎症反应；此外，在前列腺局部组织中TNF-可以激活中性粒细胞和单核巨噬细胞，刺激它们分泌IL-1、IL-6、IL-8和TNF-等，从而加剧炎症反应。,我们的测定结果显示，CAP组血清和前列腺液中的TNF-含量明显增高，与CAP组、对照组间差异均有显著性（p 0.05或 p 0.01），提示TNF-可能与CAP有关，可作为辅助诊断CAP的指标之一。,综上所述，CAP组血清和前列腺液中IL-2、IL-8和TNF-水平明显高于CAP组和正常对照组，在CAP组和对照
15、组间无显著性差异，提示检测CAP患者血清和前列腺液中的IL-2、IL-8和TNF-水平，对CAP的辅助性诊断和分型具有重要意义。,Dear Dr.Li,From your article titled“Clinical evaluation of four cytokines in serum and prostatic fluid in chronic abacterial prostatitis”(Zhonghua Nan Ke Xue.2006 Jan;12(1):25-7.),we learned of your research with IL4 and thought you mi
16、ght be interested in knowing that GenWay currently has a product related this target.Dear Dr.Li,From your article titled Clinical evaluation of four cytokines in serum and prostatic fluid in chronic abacterial prostatitis(Zhonghua Nan Ke Xue.2006 Jan;12(1):25-7.),I learned of your research with Tumo
17、r necrosis factor.I thought you might be interested to know that GenWay has an antibody for Tumor necrosis factor,with the give rsion number 18152208.These reagents should work well with Human.,Dear Dr.Li SP，On behalf of the organizing committee,I am pleased to invite you to attend the EPS 2011 Jing
18、zhou International Symposium on Oncology,to be held on October 29-30,2011 in the beautiful and historical city,Jingzhou,Hubei,China.We would like to welcome you to our Conference as our valuable speaker and present your recent work and ideas ofClinical evaluation of four cytokines in serum and prost
19、atic fluid in chronic abacterial prostatitis.that were published in Zhonghua Nan Ke Xue.Please visit our website at and for program details.The conference will be hosted by EPS Global Medical Development Inc.,which is a Canada based medical and biotech consulting agency.Our organization maintains su
20、stainable connections over 1000 hospitals and research organizations in states across China,which gives an estimate of the scale of our functioning.Our conferences and forums are of global magnitudes which set the stage for tomorrows educational,research and business collaborations in area of life s
21、ciences.Sincerely,You Lu,MD,PhDExecutive Chair of EPS 2011 Jingzhou International Symposium on Oncology,Dear Dr.Li SP，Emerging infectious,rising rates of obesity and problems for health from pollution have all raised the profile of public health not only in Hong Kong globally.As part of their 10th a
22、nniversary,CUHK School of Public Health and Primary Care(SPHPC)will host the International Conference on Global Health and Public Health Education at CUHK School of Public Health Building,Hong Kong,on 25 27 October 2011.We are always grateful for your support and we look forward to seeing you in Oct
23、ober!,启 示,1.课题来源于生活，留意日常生活中的问题，做生活的有心人。2.课题来源于工作，针对工作中的问题或失误，提出研究课题。3.扎实的专业基础，才能针对问题，提出研究方法和策略。,参考文献,1那彦群,孙光.中国泌尿外科疾病诊断治疗指南M.北京:人民卫生出版社,2009:120.2 Penna G,Mondaini N,Amuchastegui S,et al.Seminal plasma cytokines and chemokines in prostate inflamma-tion:interleukin 8 as a predictive biomarker in chro
24、nic prostatitis/chronic pelvic pain syndrome and benign pros-tatic hyperplasiaJ.Eur Urol,2007,51(2):524.3Jang TL,Sehaeffer AJ.the roles of cytokines in prostitisJ.World J Urol,2003,21(2):95.4杨士杰,孙新成,李文平.前列腺液中IL-4与慢性非细菌性前列腺炎的关系J.河北医学,2003,9(11):961.5段志国，杨为民.慢性前列腺炎患者前列腺液中IL-2、IL-8及IL-10水平分析J.中华男科学杂志，2005，11（3）：201-203.6贺大林，周 锋，何 辉，等.前列腺按摩液中IL-8和TNF-测定在慢性前列腺炎诊断、分型中的临床意义J.中华男科学杂志，2004，10（10）：740-742.,谢 谢,谢 谢,
