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1、血磷浓度检测试剂盒说明书微量法100T/96S注意：正式测定之前选择23个预期差异大的样本做预测定。澜定意义：血磷主要指血中的无机磷，以无机磷盐的形式存在。血浆中钙、磷浓度关系密切，在以mg/dL表示时，二者的乘积（CaP）为3040。当（CaXP）40,则钙和磷以骨盐形式沉积于骨组织；若（CaXP）35则妨碍骨的钙化，甚至可使骨盐溶解，影响成骨作用。血钙和血磷含量的相对稳定依赖于钙、磷的吸收与排泄和钙化及脱钙两种代谢的相对平衡。上述平衡受到维生素D3、甲状旁腺素和降钙素等激素的调节。渊定原理：去除血清中有机磷后，无机磷盐与锯酸钺试剂生成磷铝酸，被硫酸亚铁还原后呈蓝色，在620nm有光吸收；通
2、过测定62Onm吸光度，计算血液中磷含量。自备仪器和用品：离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、和蒸馅水。试剂组成和配置:试剂一：液体IOomLXl瓶，4保存。试剂二：液体1.6mLl瓶，4保存。试剂三：粉剂Xl瓶，4C保存。临用前配制，依次加入UmL蒸储水充分溶解，再加入试剂二，充分混合。标准液：液体Xl支，1mmol/L无机磷，4保存。血磷浓度漓定操作：1 .分光光度计/函标仪预热30min以上，调节波长到620nm,蒸储水调零。2 .取出标准液，室温解冻。3 .血清预处理：吸取50L血清，力口950L试剂一，混匀后室温800OrPm,离心IOmin,取上
3、清液，待测。4 .空白管：取微量石英比色皿/96孔板，依次加入50L蒸储水，50L试剂一，100L试剂三，混匀后静置IOmin,于620nm测定吸光度，记为A空白管。5 .标准管：取微量石英比色皿/96孔板，依次加入50L标准液，50L试剂一，100L试剂三，混匀后静置IOmin,于620nm测定吸光度，记为A标准管。6 .测定管：取微量石英比色皿/96孔板，依次加入50L上清液，50L试剂一，100L试剂三，混匀后静置IOmin,于620nm测定吸光度，记为A测定管。注意I空白管和标准管只需测定一次。血磷浓度计算：血磷含量（mmol/dL）=C标准液X（A测定管-A空白管）（A标准管一A空白管）x样品稀释倍数XV样总=2（A测定管一A空白管）（A标准管一A空白管）C标准液：1mmol/L：样品稀释倍数：（50L血清+950L试剂一）50L血清=20：V样总：100mL=OJ1.o注意事项：1、试剂三需临用前配制，如未用完，4保存，最多可使用3天；2、测定过程中，应尽量避免溶血，因为红细胞中有机磷酯进入血清后可被旃水解而使得血清无机磷含量增高。3、最低检出限为10molLo强优利科（上海）生命科学有限X
