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实验5 分光光度法测定青菜中的叶绿素,江南大学食品化学课程小组,一、目的,了解叶绿素的分子结构、性质，理解叶绿素性质不稳定的根源，从而提高解决青菜类蔬菜在加工、储藏等过程中出现问题的能力。掌握食品中某些有效成分的提取、分离以及测定方法。,二、仪器及材料,天平、组织捣碎机、水循环真空泵、抽滤瓶、滤纸、布氏漏斗、容量瓶（1000 mL、100 mL）、分液漏斗2个、尖嘴管、铁架台、铁圈2个、分光光度计；青菜叶、碳酸钙、丙酮（80%）、乙醚、无水硫酸钠。,三、原理,总叶绿素=7.12 A660.016.8 A642.5叶绿素a=9.93 A660.00.777 A642.5叶绿素b=17.6 A642.52.81 A660.0,转移,四、实验步骤,五、注意事项,使用乙醚萃取时，需在通风橱中操作，实验前检查好分液漏斗的密封、通畅性，萃取时勿激烈振摇，以防产生乳化层叶绿素遇光照和高温不稳，在提取过程中必须控制好这些因素，尽可能在低温、弱光下进行，并缩短实验时间，防止叶绿素的破坏使用分光光度计时，先要预热；测定时要用乙醚作空白,六、思考题,1、测定叶绿素a、b含量为什么要选用红光的波长？2、在破碎青菜叶组织时，为什么要加入碳酸钙或碳酸钠？3、为什么叶绿素测定时应尽量可能在低温和避光的条件下进行？4、叶绿素a和叶绿素b的结构有何不同？5、叶绿素在酶、热、酸的作用下会发生什么变化？,
