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1、实验六 酵母核糖核酸的分离 及组分鉴定,一 实验原理,1.酵母核酸中RNA含量较高；RNA可溶于碱性溶液，在碱提取液中加入酸性乙醇溶液可以使解聚的核糖核酸沉淀，由此即可得RNA的粗制品。2.核糖核酸含有核酸、嘌呤碱、嘧啶碱和磷酸各组分；加硫酸煮沸可使其水解，从水解液中可以定性测出上述组分的存在。,二 实验步骤,1.取10g 酵母放入研钵用量筒量取60ml 0.04mol/L NaOH 溶液（202020三次添加）倒入锥形瓶在沸水浴中加热20min冷却2.倒入大离心管，盖上盖子离心10min,V=5000上清液倒入烧杯A用量筒量取20ml酸性乙醇溶液倒入烧杯B然后将烧杯A液缓缓倒入烧杯B,注意不
2、断搅拌待核酸沉淀下来后离心5min,V=5000弃去上清液,3.沉淀加入10ml 95乙醇搅拌均匀倒入小离心管中离心5min,V=5000弃去上清液沉淀中加入10ml乙醚搅拌均匀过滤滤纸上的物品即为核酸自然风干一星期,4.取200mg风干的核酸放入小烧杯用量筒量取10ml 1.5mol/L H2SO4溶液倒入小烧杯用玻璃棒搅拌使其溶解在沸水浴中加热10min制成水解液然后进行各项的组分鉴定,4.1 嘌呤碱鉴定：取1ml水解液加入过量浓氨水再加入1ml0.1mol/LAgNO3溶液观察有无沉淀4.2 核糖鉴定 取1ml水解液于试管中加入三氯化铁浓盐酸溶液2ml再加入苔黑酚乙醇溶液0.2ml放沸水浴中煮10min观察溶液是否变绿色4.3 磷酸鉴定 取1ml水解液于试管中加入1ml定磷试剂在水浴中加热观察溶液是否变蓝色,
