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1、第二十二章 球菌-学习重点,1.SPA的定义与应用 2.致病与非致病性葡萄球菌的区别 3.金葡菌的致病性（致病物质及其所致疾病）4.链球菌属的分类5.A群链球菌的致病性（致病物质及其所致疾病）抗O试验原理及意义6.甲型溶血性链球菌、B群、D群链球菌所致疾病 7.肺炎链球菌的形态培养特性及其与甲型链球菌的区别 肺炎链球菌致病性 8.脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌的形态、培养特性、致病性,第二十二章 球菌 page 257,又名化脓性细菌G+球菌葡萄球菌属链球菌属肺炎链球菌 G-球菌奈瑟氏菌属 莫拉菌属,第一节 葡萄球菌属(Staphylococcus),是球菌中最常见的种类分布广,种类多，有32个种致
2、病性较强的是 金黄色葡萄球菌(S.aureus)“金葡菌”是医院内感染的重要菌种可引起化脓性炎症 还可导致食物中毒、烫伤样皮肤综合症、中毒性休克等,一、生物学性状,形态与染色 G+直径0.51.5 m 无芽孢、无鞭毛葡萄状排列可变为L型细菌,培养与生化,兼性厌氧营养要求不高,在血琼脂平板培养基上形成溶血环,耐盐、产生脂溶性色素 可用于筛选菌种,金黄色葡萄球菌-金黄色色素,培养特点,触酶(Catalase)也称过氧化氢酶可催化过氧化氢的分解,生化反应,分解葡萄糖 麦芽糖 蔗糖甘露醇产酸不产气,触酶阳性,鉴定分类,3抗原构造,SPA（Staphylococcal protein A)是金黄色葡萄球
3、菌表面蛋白/表面抗原 可与IgG 的Fc段非特异结合，发挥：抗调理-抗吞噬作用IgG的Fab段还可与抗原（）结合：协同凝集试验-用于辅助诊断复合物-超敏反应-损伤细胞、血小板等多糖抗原群特异性是一种磷壁酸介导细菌黏附,4.分类,根据色素、生化反应等分为3个speciesp-258 table 22-1根据凝固酶的有无分为两大类(+)/(-),5.抵抗力,较强，仅次于芽孢杆菌60 1h可以杀死耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Methicillin-resistant S.aureus,MRSA)逐渐增多院内分离(hospital-acquired)MRSA是医院感染最常见的菌种 社区分离(commun
4、ity-acquired)MRSA不容忽视,凝固酶（Coagulase)鉴定致病性的指标，分为2种游离凝固酶 血浆凝固结合凝固酶 细菌凝聚葡萄球菌溶血素（Staphylolysin）-有、四种溶血素有致病性能破坏细胞膜溶解红细胞等杀白细胞素（leukocidin）-使细胞膜通透性增强可破坏neutrophile 和 macrophage 肠毒素（enterotoxin）-外毒素、超抗原对热稳定、对胃蛋白酶有抗力刺激呕吐中枢引起以呕吐为主症的食物中毒 剥脱性毒素（exfoliatin)或称表皮溶解毒素裂解细胞间桥小体，引起皮肤角质层分离-脱落-烫伤样皮炎 中毒性休克综合征毒素-(TSST-1)-
5、外毒素/超抗原引起发热、休克,二、致病性与免疫性,保护细菌，使感染局限化和形成血栓,（一）致病物质,7.其他酶类,葡激酶耐热核酸酶透明质酸酶脂酶,*金黄色葡萄球菌存在两个核酸酶编码基因1.葡萄球菌核酸酶(Staphylococcalnuc1ease,SNase),命名为nuc12.耐热核酸酶(ThermonucIease,TNase),命名为nuc2,脑脓肿,病例及其思考,某校多名学生在食堂进餐后24小时后出现恶心、呕吐症状 取剩余食物作细菌培养，培养菌落染色镜检后确定为G球菌，生化反应该菌可分解甘露醇 请思考：1.该组病例可能是何种病原菌所致？2.其致病物质是什么？3.要确定该病原菌，还应作
6、哪些检测？4.该菌还可以引起哪些疾病？,（二）所致疾病,.侵袭性疾病-引起化脓性炎症 局部感染好发于皮肤，如疖、痈、毛囊炎、甲沟炎、麦粒肿等内脏感染气管炎、肺炎、脓胸、中耳炎、心包炎、心内膜炎等全身感染 败血症、脓毒血症 病变特点：病灶局限化，脓汁粘稠.毒素性疾病食物中毒(呕吐为主)伪膜性肠炎-耐药菌株的肠毒素所致 烫伤样皮肤综合征 毒素性休克综合征,金黄色葡萄球菌,脓疱疮-“黄水疮”,（三）免疫性,人体对“金葡菌”具有天然免疫力皮肤粘膜受损/免疫力降低时感染免疫原性弱人体可反复感染,三、微生物学检查,标本 直接涂片染色镜检分离培养与鉴定鉴定致病性：甘露醇发酵试验 血浆凝固酶试验 耐热核酸酶试
7、验食物中毒测定肠毒素,四、防治原则,避免创伤性感染避免食物中毒避免医源性感染 顽固性疖疮用自家菌苗防治根据药敏试验选择用药,第二节 链球菌属 Streptococcus,一、生物学性状形态与染色G+，0.61.0m，链状排列有菌毛样结构，含有型特异性M蛋白培养与生化营养要求高-需血液、糖多数是兼性厌氧,3.抗原结构,（1）蛋白质抗原/表面抗原Type（型）特异性A群链球菌有M、T、R、S蛋白抗原其中M 蛋白与致病性有关（2）多糖抗原/C抗原Group(群）特异性（3）核蛋白抗原/P抗原-无特异性-与葡萄球菌有交叉,4.分类,分类方法较多而复杂，主要有2种：根据溶血性分类可分为甲、乙、丙三个溶血
8、型 根据抗原结构分类可分为若干个“群”和若干个“型”,（1）根据溶血性分类,甲型（）溶血性链球菌不完全溶血，称为甲型（）溶血，形成草绿色溶血环又称草绿色链球菌，多为条件致病菌乙型（）溶血性链球菌完全溶血，称为乙型（）溶血，形成透明溶血环又称溶血性链球菌，致病性强可以引起化脓性炎症，又称化脓性链球菌丙型（）链球不溶血，又称不溶血性链球菌，一般不致病,（2）根据抗原结构分类,按多糖抗原（C抗原）将链球菌分为AH、KT、U、V共20个群 对人致病的主要是A群B、C、D、G群偶尔致病 按表面蛋白抗原（M抗原）可将A群链球菌分为100多个型B群分为4个型C群分为13个型 群别与溶血性间无平行关系但是，对
9、人致病的A群链球菌多呈乙型溶血,二、致病性和免疫性,（一）致病物质1.细胞壁成分 脂磷壁酸-粘附细胞作用F蛋白-与纤维粘连蛋白结合，利于细菌在宿主体内定植和繁殖，增加抗吞噬能力 M蛋白抗吞噬和抵抗吞噬细胞内的杀菌作用 与心肌、肾小球基底膜有共同抗原，参与/超敏反应性疾病,2.链球菌溶血素(streptolysin),根据对O2的稳定性分为两种：链球菌溶素O(streptolysin O,SLO)是一种含有-SH基的蛋白质，对O2敏感溶解红细胞、破坏巨噬细胞、神经细胞刺激机体产生“抗O”（ASO）是链球菌近期感染的指标是风湿热活动期/或急性肾小球肾炎的辅助诊断指标链球菌溶素S(streptoly
10、sin S,SLS)是小分子糖肽，对O2稳定无免疫原性,3.致热外毒素(SPE),曾称红疹毒素（erythrogenic toxin）或称猩红热毒素（scarlet fever toxin)由A 群链球菌溶原菌菌株产生的耐热蛋白有超抗原的活性引起发热、出疹猩红热,4.侵袭性酶类,透明质酸酶(hyaluronidase)或称扩散因子 链激酶(streptokinase,SK)或称链球菌溶纤维蛋白酶 链道酶(streptodornase,SD)或称链球菌DNA酶 胶原酶(co1lagenase)溶解胶原纤维-引起扩散性炎症,（二）所致疾病,A群链球菌的致病性1.化脓性疾病 如咽炎、扁桃腺炎、淋巴管
11、炎、淋巴结炎等还有产褥热、坏死性筋膜炎2.毒素性疾病 呼吸道感染引起小儿猩红热 3.超敏反应性疾病 风湿热-风湿性关节炎、风湿性心脏病等 急性肾小球肾炎,化脓性扁桃腺炎,4.其他链球菌引起的疾病,甲型溶血性链球菌为口腔、上呼吸道、阴道的正常菌群引起龋齿、亚急性细菌性心内膜炎 B群链球菌（无乳链球菌）为鼻咽部、直肠和阴道的正常菌群可引起皮肤感染、产后感染；新生儿败血症、化脓性脑膜炎、肺炎等 D群链球菌 上呼吸道的正常菌群衰竭、肿瘤病人易感,（三）免疫性,M蛋白、红疹毒素抗体有保护作用 猩红热病后，可获牢固免疫力但是对异型也无免疫力链球菌型别多，各型间无交叉免疫力故可反复感染,三、微生物学检查,脓
12、汁直接涂片染色-G+分离培养和鉴定与葡萄球菌/肺炎链球菌区别,一般不分解菊糖 不被胆汁溶解,不产生触酶,鉴别甲型链球菌与肺炎链球菌,鉴别葡萄球菌,血清学试验 抗O实验(ASO Test):是一种体外毒素抗毒素中和实验测定病人血清中的ASO含量，辅助诊断风湿热和肾小球肾炎,四、防治原则,彻底治疗咽炎、扁桃体炎防止超敏反应发生 青霉素为首选药物，阿莫西林等,第三节 肺炎链球菌 S.pneumoniae,又名肺炎双球菌/肺炎球菌自然界分布广泛40-70%人鼻咽腔带菌 免疫力低下时致病引起细菌性/大叶性/典型肺炎,一、生物学性状,形态与染色G+矛头状双球菌（尖端向外）毒力菌株在机体内有荚膜 培养与生化
13、血平板生长良好，形成草绿色溶血环 可产生自溶酶被胆汁、胆盐激活-溶解细菌可分解菊糖与甲型链球菌鉴别 用胆汁溶解试验 或菊糖发酵试验,3.抗原结构,荚膜多糖抗原-型特异性，分为90个型其中有20多个型可致疾病菌体抗原M蛋白-型特异性抗原，但与毒力无关C多糖-为各型共同抗原可用来辅助诊断活动性风湿热原理：C多糖可与血清中CRP（C reactive protein）形成沉淀，CRP在炎症活动期增高，故-,二、致病性与免疫性,（一）致病物质 荚膜最主要 肺炎链球菌溶素O-溶解RBC 脂磷壁酸黏附素作用 神经氨酸酶-水解细胞膜上的神经氨酸 sIgA蛋白酶分解粘膜表面的sIgA,有利于细菌在粘膜上定居繁
14、殖和扩散,（二）所致疾病,大叶性肺炎，并发胸膜炎中耳炎、鼻窦炎，并发脑膜炎-“化脑”败血症等,（三）免疫性,荚膜多糖型特异抗体，对同型有免疫力,三、微生物学检查法,直接涂片染色镜检-分离培养鉴定：在血平板上形成草绿色溶血环 用胆汁溶解试验或菊糖发酵试验与甲型链球菌鉴别 动物实验 小鼠,四、防治原则,多价肺炎链球菌的荚膜多糖疫苗预防小儿、老年人肺炎、败血症、脑膜炎,第四节 奈瑟菌属(Neisseria),一、脑膜炎奈瑟菌(Nmeningmdis)俗称脑膜炎球菌是“流脑”的病原体,(一）生物学性状,1.形态与染色G-肾型双球菌在患者脑脊液中多位于中性粒细胞内,2.培养与生化,营养要求高需要血清用巧
15、克力色血平板培养专性需氧能产生自溶酶,3.抗原结构,荚膜多糖抗原-群特异性根据本菌的夹膜多糖抗原的不同，通过血凝试验将本菌分为13个血清群，以A、B、C群为多见 我国流行菌群95%为A群，B群仅占少数,4.抵抗力,弱，室温3H死亡对干燥、热力，消毒剂敏感对青霉素敏感对磺胺耐药（耐药率10%一20%）,（二）致病性与免疫性,1.致病物质 菌毛-与受体结合荚膜-抗吞噬内毒素-最重要，内毒素血症-发热-血管内皮损伤、栓塞、出血-中毒性休克，DIC,病例分析与思考,患儿 2岁，3月末发病主要症状：发烧，食欲不振，恶心，喷射性呕吐查体：皮肤出血性淤斑（+），颈强直(+)印象诊断：脑膜炎请思考：患儿可能是
16、哪种细菌感染？其依据？如要培养该病原菌应选用何种培养基？为什么？患儿皮肤淤血斑说明什么？还有哪些细菌能引起化脓性脑膜炎？,2.所致疾病,传播途径：呼吸道传播传染源：病人、带菌者 感染过程：在鼻咽部定植引起局部炎症“上感”绝大多数菌血症,重者发生败血症-发热、出血性皮疹为特征细菌到脑脊髓膜引起化脓性脑膜炎（流行性脑脊髓膜炎）重者-爆发性脑膜炎-内毒素休克-DIC-死亡，病死率40%60%,3.免疫性,人体对本菌天然具有抵抗力sIgA可以阻止细菌黏附呼吸道感染后多为带菌者，仅2-3%发病病后有牢固免疫力，以体液免疫为主,（三）微生物学检查法,涂片镜检：脑脊液/出血点涂片分离培养:用巧克力色血平板
17、快速诊断:用ELSA测定可溶性抗原 或用SPA-协同凝集实验,预防 A群特异多糖疫苗预防 治疗 青霉素脑膜炎双球菌对青霉素的耐药率逐年上升 但目前仍作为治疗脑膜炎双球菌感染的首选药物 磺胺类药物目前一般耐药率在10%一20%因为其经济并能通过血脑屏障-尚属首选药物,（四）防治原则,二、淋病奈瑟氏球菌 N.gonococcus,（一）生物学性状形态与染色与脑膜炎双球菌相似-肾形双球菌、有荚膜、有菌毛多位于中性粒细胞内,2.培养与生化,与脑膜炎双球菌相似专性需氧、需5-10%CO2营养要求高巧克力色平板生长良好 氧化酶试验阳性,3.抵抗力与脑膜炎双球菌相似1%硝酸银1min内死亡,（二）致病性与免
18、疫性,1.致病物质 菌毛 粘附牢固荚膜和外膜蛋白-抗吞噬 IgAl酶 破坏IgAl促进细菌的黏附定植 内毒素-局部化脓性炎症,2.所致疾病-淋病,传染源 病人和带菌者传播途径性传播、垂直传播、其他途径 男性尿道炎、前列腺炎、附睾炎女性尿道炎、宫颈炎、盆腔炎等可导致不育症 淋病性结膜炎新生儿-脓漏眼-产道感染,STD,3.免疫性,无天然免疫免疫原性差可反复感染,（三）微生物学检查法,直接涂片染色镜检病灶分泌物涂片染色镜检中性粒细胞内的G-双球菌细菌分离培养与鉴定:用巧克力色血平板 用SPA-协同凝集实验 用ELSA测定可溶性抗原,（四）防治原则,加强性病防治的教育，切断传播途径青霉素等抗生素治疗
19、淋病性结膜炎，用1%硝酸银或氯霉素、链霉素药水滴眼,微生物学各论-核心内容,三性,两法,免疫性,生物学特性,致病性,微生物学检查法,防治原则（方法）,感谢聆听,TANKS！,4.分类-根据色素、生化反应等分为三个种,三种葡萄球菌鉴别的主要性状,进入90年代以来，社区分离型MRSA逐渐引起感染监控专家的注意,人类与社区分离MRSA的斗争才刚刚开始,社区感染(community-acquired)MRSA 排除院内感染危险因素，起源于社区的MRSA,耐药性金葡菌流行病学研究,美国MRSA感染率调查,CHN：community Health Network of San Francisco,LTCF
20、：long term care facility,乌拉圭爆发MRSA感染流行,MRSA在丹麦1994-2005,北欧诸国MRSA感染,Sweden：瑞典；Finland：芬兰；Denmark：丹麦；Norway：挪威；Iceland：冰岛,1.该组病例可能是何种病原菌所致？2.其致病物质是什么？,病原菌-金黄色葡萄球菌感染根据染色与形态特性-G球菌生化反应特点-该菌可分解甘露醇 致病物质是 肠毒素 根据-肠毒素特点：热稳定蛋白，加热后不被破坏对胃蛋白酶有抵抗力，进食1-6 h后发病刺激呕吐中枢引起以呕吐为主症的食物中毒,3.要确定该病原菌，还应作哪些检测？,血浆凝固酶检测耐热核酸酶检测肠毒素检
21、测SPA检测？,4.该菌还可以引起哪些疾病？,侵袭性疾病引起化脓性炎症常见于皮肤、呼吸系统、心包及心内膜等器官特点：病灶局限化，脓汁粘稠全身感染败血症等 毒素性疾病食物中毒（呕吐为主）伪膜性肠炎 烫伤样皮肤综合征 毒素性休克综合征,烫伤样皮肤综合征-剥脱性皮炎,金黄色葡萄球菌分离培养鉴定基本程序,化脓性链球菌,-形成透明溶血环,G+,食肉菌入侵,英经济学家24 小时内丧命,新华每日电讯/2007 年/1 月/16 日/第007 版（健康）现年43 岁的英国著名经济学家戴维沃尔顿去年6月突然去世，其死因不明 英国每日邮报揭开了这个谜团：导致沃尔顿丧命的是“食肉菌”对沃尔顿在短短24 个小时之内就
22、被可怕的食肉菌“吃”掉的恐怖一幕，为他治疗的医生至今仍心有余悸，“细菌就在我们面前扩散，从他的大腿一直蔓延到胸腔和肩头”。医生眼睁睁地看着沃尔顿全身被细菌侵蚀却无可奈何 病理学家基思麦卡锡博士确认：这种在入侵沃尔顿身体后不到24 小时便夺去了他生命的，是化脓链球菌的感染而引发坏死性筋膜炎 这种细菌皮肤伤口-皮下组织广泛性肌肉和脂肪坏死蜂窝织炎坏疽全身衰竭-死亡,标本中的肺炎链球菌,如要培养该病原菌应选用何种培养基？为什么？,需要在含有血清或血液的巧克力平板培养基因为该菌的营养要求高,患儿皮肤淤血斑说明什么？,因为有细菌入血引起菌血症或败血症内毒素血症导致小血管和毛细血管内皮损伤-局部血管栓塞及
23、出血出血性皮疹或瘀斑,能引起“化脑”的细菌,常见有 4种：脑膜炎双球菌肺炎双球菌B族链球菌（无乳链球菌）-新生儿脑膜炎嗜血流感杆菌-小儿脑膜炎（见呼吸道感染细菌),淋病种种,淋病种种,淋病性淋巴肉芽肿,成人淋病性结膜炎,淋病眼，淋菌性脓漏眼,二、肠球菌,1.形态 G+卵圆形球菌2.分布 存在于人和动物肠道3.致病 医院内感染的常见菌群 引起尿路感染 腹腔术后感染 免疫低下者可致败血症,三、卡它布兰汉菌,又名 粘膜炎布兰汉菌1.形态 G-球菌，痰液中呈肾形双球菌 应注意与脑膜炎双球菌区别 2.分布 存在于人和哺乳动物呼吸道3.致病 是医院内呼吸道感染的重要菌群 可引起黏膜卡它炎症、咽喉炎、支气管炎、肺炎、中耳炎、脑膜炎等,
