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1、实验一 刺激频率、刺激强度与骨骼肌收缩形式的关系,【实验目的】1.掌握坐骨神经腓肠肌标本的制作方法。2.观察不同刺激强度与肌肉收缩力量的关系。3.观察不同刺激频率的改变与肌肉形式的关系。,刺激和兴奋,刺激：指细胞所处环境因素的变化。刺激要能使细胞发生兴奋，就必须达到一定的刺激量。,【实验原理】,阈强度能引起组织发生反应的最小刺激强度，又称为阈值。具有阈强度的刺激称为阈刺激。,1.刺激强度与肌肉收缩反应,一条骨骼肌纤维,“全或无”(all-or-none),达到阈值肌纤维收缩超过阈值收缩力不增加,一块骨骼肌,一定范围内，肌肉收缩力的大小与刺激强度成正比,阈下刺激无兴奋收缩阈刺激少数兴奋性最高的肌
2、纤维产生收缩刺激强度 肌纤维被兴奋数量，肌肉收缩力最适强度所有的肌纤维均兴奋，肌肉收缩最大最适强度 收缩力不增加,单收缩：骨骼肌受到一次短促有效刺激时,可发生一次动作电位,随后出现一次收缩和舒张。,2.刺激频率与肌肉收缩反应,动作电位时程(相当于绝对不应期)仅12毫秒,骨骼肌可在机械收缩过程中接受新刺激发生新的兴奋和收缩,收缩过程可达几十几百毫秒,两个阈上刺激，相继作用于神经-肌肉标本，如果刺激间隔大于单收缩的时程，肌肉则出现两个分离的单收缩；较高频率连续刺激作用于标本时，出现多个收缩反应的融合，新收缩过程与上次尚未结束的收缩过程发生总和，称为强直收缩（复合收缩）。,后一收缩发生在前一收缩的舒
3、张期时，称为不完全强直收缩。后一收缩发生在前一收缩的收缩期时，各自的收缩完全融合，肌肉处于持续的收缩状态，称为完全强直收缩。,在生理条件下，支配骨骼肌的传出神经总是发出连续的冲动，所以骨骼肌的收缩都是强直收缩；静息状态下，中枢神经也经常发放低频率神经冲动至骨骼肌，产生一定程度的强直收缩，称为肌紧张(muscle tone)。,【实验药品与器材】探针、镊子、玻璃分针、蛙钉、蛙板、锌铜弓、铁架台、电刺激器、保护电极、铁架台、搪瓷碗、信号采集系统、张力换能器，任氏液等。,【实验对象】蟾蜍,眼科剪：仅用于血管、神经组织剪：软组织粗剪刀：骨骼、肌肉,【实验步骤】（一）制备坐骨神经腓肠肌标本（离体）-方法
4、一.破坏脑和脊髓,（1）持蛙,(2)枕骨大孔的判断,(3)破坏完全的标准,（Occipital foramen),2.剪除躯干上部和内脏,(1),(2),(3),3.剥去皮肤,将标本放在盛有任氏液的培养皿中,4.洗净双手和用过的手术器械,再进行下列操作5.从两腿中间剪开，分离两腿,将标本放在盛有任氏液的培养皿中,7.用玻璃分针游离坐骨神经。,6.将标本固定在蛙板上，腹面向下,8.剪断股骨,膝关节处所有的肌腱,(1),(2),9.检查标本的兴奋性,（一）制备坐骨神经腓肠肌标本（在体）-方法二.破坏脑和脊髓,（1）持蛙,(2)枕骨大孔的判断,(3)破坏完全的标准,（Occipital forame
5、n),将标本腹面向下固定在蛙板上，剪开大腿皮肤，用玻璃分针游离坐骨神经，穿线。剪开小腿皮肤，分离腓肠肌，穿线结扎，离断。固定膝关节。检查标本的兴奋性。,（二）实验装置连接,将电刺激器与保护电极连接，再与生物信号采集系统连接将张力换能器固定在铁架台上（注意上面向上），并与生物信号采集系统连接,张力换能器,RM-6240采集和处理系统,把穿好线的坐骨神经轻轻提起，放在刺激电极上，保证神经与刺激电极接触良好。启动生物信号采集系统软件，设定当前通道“通道功能”下“单收缩波”、“030g”“设置”下“硬件、软件通道清零”。将腓肠肌跟腱的结扎线固定在张力换能器的悬臂梁上（不宜太紧，线与桌面垂直）。,计算机
6、（computer）,（三）实验观察,（1）刺激强度对骨骼肌收缩的影响使用单刺激或自动强度调节方式“05mv”“标记当前通道”,波宽为1ms，刺激强度从零开始逐渐增大，找出刚能引起肌肉出现微小收缩的刺激强度（阈强度）。继续增强刺激强度，观察肌肉收缩反应是否也相应增大。继续增强刺激强度，直至肌肉收缩曲线不能继续升高为止。找出刚能引起肌肉出现最大收缩的最小的刺激强度，即最大刺激强度。,（2）刺激频率对骨骼肌收缩的影响 用最大刺激强度的连续刺激，选择经典方式逐渐增加刺激频率，分别记录不同频率时的肌肉收缩曲线，观察不同频率时的肌肉收缩变化。,【注意事项】,1）双毁髓时应注意捻动探针并使蟾蜍头部前俯，防止耳后腺分泌物射入实验者眼内，如被射入，应立即用生理盐水冲洗眼睛。2）标本制备过程中应经常滴加任氏液，防止标本干燥，以保持正常生理活性。3）避免污染、过度牵拉或用器械夹伤坐骨神经和腓肠肌。,【实验结果？】,
