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1、NQOl基因多态性与食管癌易感性的病例比照探讨NQOl基因多态性与食管癌易感性的病例比照探讨NQOl基因多态性与食管癌易感性的病例比照探讨作者：周明丽，陈华芳，史习舜，周紫荆，李国梁，潘培川，陈子龙，吴清波【摘要】目的探讨NQOI基因多态性与食管癌易感性的关系。方法采纳I：2配对的病例比照探讨，运用PCR,RF1.P技术检测NQOl基因C609T多态性。结果NQ01609CC.CT和TT各基因型在病例组中的频度分别为%、%和乐在比照组分别为、和,两组间的分布差异有统计学意义。携带NQ0160911基因型的个体患食管癌的风险高于腰携带609CC或609CT基因型者。蟒吃葱蒜与NQOl基因型IT之
2、间存在次崭相乘模型的交互作用(OR=,95%CI=-)；饮烫茶与NQolTT危急基庖因型之间存在次相乘模型的交互作用(0梆R=,95%CI=).结论NQ01609TT基因型是食管癌的危急因素之一；609TT基因型食管癌发生风臆险的作用有明显的放大效应。【关键词】食管肿瘤病例比照探讨NQOl基因3多态性交互作用ACase,cont幻KolStudyonthePoIym巽OrPhiSmSofNQOIandS+usceptibiIityofEso斛phageaICancerAbs纳tract:PurposeToi&nvestigatetherelat二ionshipbetweengene珏ticpo
3、lymorphismofNQoiandsusceptibi1i味tyIoesophagealcanc梆er.MethodsThisin晖Vestigationwascond贱uctedbyl:2matchedc整ase,controlstudy,a哈ndtheC609Tpo)ymorphiSmingeneNQO1wasd琥eterrainedwithPCR,R物F1.Ptechnique.Resu齐ItsThefrequencies硫ofNQ01609CC,CTandTTgenotypeinesophag意%,%and%respectivelntrolgroup,respect子iOnwass
4、tatiStical1脱encebetweenbothgro挹ryingNQO1609TTgcnoIincreasedriskfore狒justedOR=,95%CI:h609CCor609CTgenot肋teractionofsubmultenal1Iumvegetables租TTgenotype(OR=,95%驳er,Iiotteadrinkinga郢ndNQ(臆ealcancergroupwere附y,whi1e%,%and%inco瞠ively.Thedistribut汞ysignificantdiffer菽ups.Individualscar呐4typehadasignifican刃
5、KSophagealcancer(ad骄)Coniparedtothosewitype.Therewerethein骇iplIcitymodelbetwe梦ConsumptionandNQOl欺CI:),andbetweenov)lgene(OR=,95%扔CI:).Conclusions濯NQO1609TTgcnotypciSoneoftherisksfor疑esophagealcancer.T部heNQ01609TTgenotyp兜ehassignificantampificationeffectontheriSkofesophagea馋Icancer.Keywords:徜esophage
6、a1neop1asm疾s;case,controlstud褶y;NQO1genepo1ymorpohisms;interaction代嵬谢酶基因多态性是不同个体代谢醉活性差(10)异的主要缘由，从而影响个体患癌的易感衢性。依靠还原型辅酶I/H：醍氧化还原醯(NQoI)又称D,硫辛酰胺脱氢酶墨，催化醐类及其衍生物发生还原反应转化碘为氢酸，为人体内一种重要的11相反应酶伴。而醍是一类在自然界中广泛存在的有毒卜化合物，能诱发哺乳动物细胞癌变和坏死欣.探讨发觉NQOl存在多态性，即C6茕09T,这个变异使酶活性显著降低。我们以福建省食管癌高发区安溪县为探讨现阀场，在进行环境因素调查探讨的同时.，对咎N
7、QOl基因多态性与食管癌的关系进行莠了探讨，并结合安溪高发区的环境危急因顽素对基因与环境的交互作用进行了初步分析。1材料与方法探讨对象病例琥组为XX年11月至XX年8月间，经安焦溪县医院内婉镜及病理诊断确诊为食管癌卜的新发病例，剔除年龄75岁及体质虚忸弱者。比照组按1：2配对，选择与病例居住同一乡村、无血缘关系、同民族、同性别、年龄相差3岁以内的同期同院的逍非肿瘤患者为比照。病例和比照均为安溪(县居民，并为当地常住户口(20年以上睐)o调查方法及内容采纳统一编制的徘调杳表，由经过培训考核合格的调查员宜漏接询问每名探讨对象后填写。调查内容主氓要有：一般状况、口常生活行为习惯、饮靖食习惯、饮食结构
8、、居住史、家庭消费情暂况，消化系统疾病史及食管癌家族史等。NQOl基因多态性的检测运用聚合酶唯链反应限制性片段长度多态性技术检测鞍探讨对象的NQ01C609T基因型。茫标木收集及DNA提取抽取各探讨对阅象外周血5ml,置于一次性生化采血管镁中，离心分层，分装上层血清和下层血凝吊块，置于低温冰箱保存。采纳常规高盐沉淀法提取基因组DNA1.PCR冒扩增(1)引物序列为：Pri逍merF：5,GCCCGC-CAACTTCT,3,Primer伞R：5,GcgtttcttccatCCTTC,3,由上海博亚生物技术葱有限公司合成。2 2)PCR扩增反应体檐系：反应总体积为251,其中含10徙PCRbuff
9、erbmjnol/1.MgCl2,200mol1.dNMTPs,引物F、R各mol1.,TaqDNA聚合酣，基因组DN80n贲g100ngo(3)PCR循环参数：95C预变性5min,然后94变株性30s、56C复性30s、72*C延哀伸45s,35个循环后，72延长1Omir1。Hinfl酶切反应酶切T体系为201,包括：IObuff弑er21.Hinf1内切酣1,超纯水1,PCR扩增产物IOlo前缀切反应条件为：37C水浴6h三酶切产笔物用2%琼脂糖凝胶、电压90V电泳1h。NQOl基因型的推断：防切片段仅195bp者为纯合野生基因型CC；措195bp、119bp和76bp者为寡杂合基因型
10、CT：119bp和76bp：者为纯合突变基因型TTo统计分析方寇法全部数据采纳软件建立数据库。运用2检验比较NQOl基因频率的Har而dy,WEinberg遗传平衡检验，铢NQ01C609T基因在病例组和比照诊组分布的特点和差异。运用叉生分析的原错理视察NQ01C609T基因型、环境喳因素、遗传因素之间的交互作用。参照文晶献3的方法评价交互作用:多因素1.铭OgiSIiC回来模型中包括单独遗传因素、单独环境因素和两因素共同组成变炖量的效应,g、e和eg分别为三湖者的回来系数，也即ORg.ORe和0剩Reg的自然对数。交互作用系数=焰ege,1,表示遗传因素对环编境暴露效应有放大作用；VI,表示
11、遗曜传因素对环境暴露效应有减弱作用；=1,则两者没有交互作用。当OReg=熄OReORg为交互作用的相乘模型：苒ORegOReORg为交互作用的的超相乘模型：ORegVOReOR趺g为交互作用的次相乘模型:OReg=触0Re+0RgT时，则为相加模型。术2结果病例组和比照组一般特征的偈描述本次探讨按1:2配对，共有96降对完成了问卷调查和试验室检测，其中男锹性58对，女性38对，性别比为：1.葛食管癌病例组和比照组在性别、年龄、经毋济状况及文化程度等方面的分布差异无统检计学意义，但职业分布差异有统计学意义，与比照组相比，食管癌患者以农夫为主i,文盲所占比重较高。NQOl基因型天频率及遗传平衡检
12、验对病例组和比照组NQ01C609T基因型频率进行了H字ardy,WEInberg遗传平衡检鳄验，两组的基因型频率视察值与期望值之菅间差异无统计学意义，表明病例组和比照眉组的NQOl基因型频率均符合Hard肃y,Weinberg遗传平衡定律，样咯本具有群体代表性。食管癌病例组和对照组NQOl基因型分布及等位基因频率奏见表2、3、4。NQ01609CC、CT和TT各基因型在病例组中的分布分别为、和乐在比照组中的分布分别傍为、和,表明NQOl各基因型在剥病例组和比照组的分布差异有统计学意义普。与609CC和609CT基因型相比罂，609TT基因型与食管癌的发生有显始著性关联，在年龄、性别和住址等因
13、素调霁整后OR=,95%CI=。病例组与比照组609T等位基因频率分别为%和填%,两组间的差异有统计学意义。NQ01基因多态性与各危急因素的交互作用蕨的分析分别分析NQ01609CC.起CT,TT基因型及危急基因型TT与食善管癌发生相关危急因素的交互作用o经年龄、性别、居住地、经济状况及文化程度祀等因素调整后，仅发觉TT基因型与不吃措葱蒜之间存在交互作用。未发觉NQOl并基因多态性与饮酒、高盐饮食、食用红薯鹏干、食管癌家族史及食用簇新蔬菜之间存在交互作用。与食用葱蒜史之间交互作瑞用分析结果显示，在TT基因型存在时，不吃葱蒜者患食管癌的风险增大，OR值化为，而吃葱蒜者OR值降至，TT基因型与不吃
14、葱蒜存在次相乘模型的交互作用。灼饮乌龙茶与食管癌的关系本次探讨发现饮烫茶的人群较饮温茶或凉茶的人群更胛易患食管癌，而且茶叶质量越好患食管癌的风险越低。交互作用分析中发觉喝烫茶嗦与NQOl基因多态性及食管癌家族史之阳间存在显著的交互作用，结果见表6、7睛。表6显示，单独暴露于饮烫茶的估计麓相对危急性ORe为,当同时携带NQO槌In危急基因型时，其OReg值升至斤，增加了暴露于饮烫茶的危急效应，两者淞的交互作用符合次相乘模型。而食管癌家族史与饮烫茶之间的交互作用为超相乘效除应，同时暴露于食管癌家族史和饮烫茶者发生食管癌的风险明显高于单独暴露于食晃管癌家族史者或饮烫茶者。3 探讨NQ01,即NAD(
15、P)H:鼠氧化还原卒梅，是体内一种重要的H相反应前。NQwOl以NAD(P)H为受体,可将N注DH或NADPH的电子传递给醍类及其他衍生物，发生双电子还原反应，生成低毒席的氢醍类化合物，其催化特性在于无单电胭子还原产物半隈及H由基等转化产物形成肝，避开了对细胞的损伤，降低具有致癌性砍和致畸性的醍类化合物的危害4.N抓QOl与其他1、11相代谢酣一起构成了体内对外源致癌物质的代谢网络，在机体孱的解毒代谢中发挥着重要作用。在正常粳人群中，该曲的活性存在差异。20世纪卵90年头初期，有探讨发觉NQOl基因彩cDN609位点上存在c间单核罔仰酸多态性，可能变更了酶的二级结构,使酶的活性降低,增加了氧自
16、由基的生成啻5,6o纯合野生基因型CC具有完全的即Ol膈活性,杂合基因型CT的旁酶活性较纯合野生型降低3倍，纯令突变搁基因型TT的酶活性则完全丢失7,8泮。因此，NQOl缺陷可降低细胞解毒澧致癌物的实力，从而影响细胞代谢途径，臻增加致癌物负荷并能导致某些易感个体恶挚性变。由于NQOl在鼠类化合物的解毒勺过程中起着很重要的作用，所以它的基因媛多态性口益受到人们的重视。经探讨发觉瞽NQOl多态性与大肠癌9、肺癌钥10、白血病11,12等有显著颗相关性。目前关于NQOl多态性与食杏管癌关系的探讨并不多，我们采纳匹配的毯病例比照探讨，以福建省食管癌高发区之给一安溪县为现场，分析了NQOl基因多微态性与
17、当地食管癌易感性的关系，探讨发忤现NQOl基因多态性与食管癌的遗传易略感性有关。因为携带纯合突变基因型TT吟者完全丢失NQOl酶活性，故我们进一睡步分析比较了病例组和比照组TT基因型啾的分布差异，结果表明，携带纯合突变基腾因型TT的个体发生食管癌的危急性比携带野生型基因型CC和杂合突变基因型C洵T的个体高倍，提示具有纯合突变基因型祈TT的个体可能是当地发生食管癌的高危人群。ZhangJ等13探讨显示蝶NOQ1C609T基因型分布在高加索彬人和中国人群中具有显著差异，携带TT祛基因型者比携带CC.CT基因型的个体发生食管癌的危急性分别增高倍和倍，与镖本次探讨结果相像。交互作用分析结果制表明：不吃
18、葱蒜与NQOlTT基因型之间的交互作用符合次相乘模型，这与葱蒜笊其中所含化合物对机体氧化还原代谢酶系苯的诱导作用有关。本次探讨未发觉食管癌明家族史与NQOl基因之间存在交互作用裕，但是在同时暴露于食管癌家族史和TT叛危急基因型发生食管癌的风险会高于单独诋暴露于这两个危急因素者。而Zhang僻J等探讨发觉，在中国人群中，暴露于上消化道肿瘤家族史者会增加发生食管癌的风险13,提示携带NQOl纯合突tz变基因型造成的NQOllW活性的缺乏可V能为家族中上消化道肿瘤聚集的遗传机制章之一。这些结果均进一步说明白食管癌的都发生是环境因素和遗传因素相互作用的结拖果。目前已有大量的探讨资料表明饮茶饺对食管癌具
19、有爱护作用，这主要与茶叶中含有的茶多酚、茶色素、1.,茶第酸有关，这些物质具有抗氧化作用，可以清除体妞内的氧自由基，抑制生物大分子DNA.费蛋白质等的氧化损伤14。试验结果锋发觉无论是绿茶还是红茶都可在甲基节基片亚硝胺(NMBZA)和甲基烷基亚硝胺拢(MANA)的动物模型中削减鼠的肿痛抓发生15。本次探讨发觉饮用质量好沸的乌龙茶是食管癌的爱护因素，而饮烫茶i三是食管癌的危急因素，这可能与安溪县是莹乌龙茶的主要产地，当地居民饮茶现象比苒较普遍，但是不同经济水平的人群饮用茶蜻叶的质量不同，而茶叶质量越好，其含有苫的有效成分较一般茶叶多，而含有较少的肄有害物质，从而降低食管癌的发病风险O氨饮烫茶在当
20、地是居民饮茶的一个普遍习惯笼，己有试脸证明70C以上烫食对食管黏扒膜上皮细胞的增殖周期会产生严峻影响，并且为细胞在有害代谢产物作用下产生癌雾变创建了有利条件16.这也是国内酎外大量流行病学探讨结果一样证明白热刺蕨激是食管癌发病因素之一的依据。因此不皂良的饮茶习惯可以降低饮茶的爱护作用，XI这是致癌或抗癌因素的混杂与交互作用的结果。饮茶习惯与基因、遗传因素的交钺互作用分析显示：饮烫茶与NQOlTT危急基因型之间存在次相乘效应的交互作祭用，而食管癌家族史与饮烫茶之间的交互作用为超相乘效应,同时暴露于食管癌家骡族史和饮烫茶者发生食管癌的风险明显高昧于单独暴露于食管癌家族史或饮烫茶者。综上所述，NQO
21、l基因C609T多态养性可能是安溪县食管癌高发的危急因素之舶一，TT基因型是食管癌的危急基因型，锹其与多种环境因素之间存在交互作用，从M.而增加或减弱了它对食管癌的危急效应。暖在人群防治食管癌过程中，应考虑到易感珊基因与环境因素的交互作用，综合分析多期种代谢酶之间的协同作用，从而有针对性唠地进行行为干预和化学预防，以降低食管n癌的发病风险。【参考文献】H,CavalliSA,etproc描onfromfreshandcryo勒manbloodusefulincl姨1%Salazar1.A,HirataM犒edureforDN.*isoIatiPreservedclottedhu耸inicalm
22、oleculartes执tingJ.ClinChem,1纤998,44（8PtD:1748-1750.2林月好,卢锡林，邵明,等.NQOl基因多态性与肺癌遗传骏易感性J.癌症,2000,19（狗5）:450-452.3沈靖，碎王润田，徐希平.代谢酶基因多态性与环般境暴露交互作用的分析方法及其应用U僖中华流行病学杂志.2001,22ova,KostovaAT,Tala旧nonereductasetype1劾ectscelIsagainstth否HiphiIesandreactivef羌(1):61-64.4DinkIayevidencethatqui痹(DTdiaphorasc)prot檄eto
23、xIcityofelectroormsofoxygenJ.FrEeeRadicBiolMedt200归0,29(3-4):231-240.5TraverRD,Horiko挽shiT,DanenbergKD,e九t(P)H:quino11eoxido禾reductasegeneexpressioninhumancoIoncarcinomace1Iszchar柬ationwhichmodulate茅ViIyandmitOmyCinSe沏rRes,1992,52(4):79锡心，SicgclD,Beal】HD,eNAD(P)Hiquinoneoxi媛phorase)J.BrJCan-2276.1lS
24、mithMT懋,WangY,KaneE,etNADtz(P)H:quinoneoxidor铭eductaselactivityi昂Sassociatedwithinc侃reasedriskofacutel楼eukemiainadultsJ郭.Blood,2001,97(5):呱1422-1426.12Cla扭velJ,BelIecS,Rebou拴issouS,etleukaemia扳,poIymorphisinsofine储tabo1iSmenzymegenes,andInteractionsw帑iIhmalernaltobacco萧,CoffeeandalcoholcOnsuniptiond
25、uringpr痣egnancyJ.EurJCan簪CCrPreV,XX,14(6):5瓮31-540.C13ZhangJ棺,SchulzW,1.iY,etof辑ND(P)H:quinoneoxidoreductasel(NQOl)柩C609Tpolymorphismw啊ithesophageaIsquam刽ousce11careinomain3贞aGermanCaucasia11an攫danorther11Chinesep钿opulationJ.Carci肪nogenesis,XX,24(5)(19):905-909.1.14Mukh邯tarH,AhmadN.Greent枷CainChCmoPrCVentiO陕nofcancerj.Toxic笥olSci,1999,52(2Suppl):111-117.15Y9angCS,1.eeMJ,Chen1.,惠etasinhibitorsofcaVIrcinogenesisEj.En恤vironHea11hPerspec廖t,1997,105(Suppl4)*:971-976.16Ghad侄irianP.Thermalirri岐tationandesophagea橱IcancerinnorthernI跻ranJ.Cancer,19871,60(8):1909-1914.
