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1、er36在pcl2细胞血清养分剥夺耐受性中的作用初探辽宁师范高校硕士学位论文摘要探讨表明，雌激素参加缺血性脑卒中的神经爱护作用。雌激素主要与雌激素受体结合，通过基因组模式或非基因组模式发挥生物学效应。新近发觉的ERa36是ERO【一个亚型，它广泛表达在乳腺、卵巢、肝、骨等细胞和组织中，并可介导膜起始的雌激素信号通路。本室前期探讨发觉，ERa36也广泛表达在脑内多个区域，但作用尚不明确。本试验利用RNA干扰技术建立的ERa36基因敲低细胞系，通过免疫细胞化学、免疫细胞荧光、MTT、Hoechst染色、荧光素醐分析、Westernblot等方法，探讨了ERct36在PCI2细胞血清养分剥夺耐受性中
2、的作用，为临床预防和治疗缺血性脑卒中供应试验依据。结果：1 .原代培育不同时间的皮层和海马神经元中均有ERcG6表达，且主要分布在胞浆和胞膜上，并与Caveolin.1共定位。原代培育的皮层神经元和海马神经元纯度较高，NSE免疫阳性率均达到97%。2 .PCI2细胞对血清养分剥夺的耐受具:白.明显的时间和血清浓度依靠性。细胞在含2.5%血清的无酚红培育基中生长速度减慢，其存活率与正常培育PCI2细胞相比显著降低，以此可建立血清养分剥夺细胞模型：此外，细胞在血清剥夺（。.5%血清）2h时，不会发生凋亡。3 .敲低ERct36,降低了细胞对低浓度E2的敏感性，增加了细胞血清养分剥夺的耐受性。其中,
3、pM和nM级别的E2对PC12细胞促增殖作用减弱:PCI2细胞血清养分剥夺4h起先凋亡，敲低ERa36后细胞血清养分剥夺8h起先凋亡。4 .ERCc36介导E2激活的MAPK信号通路影响PCI2细胞的养分剥夺（低血清）耐受性。在PCI2细胞中转染ER.a36表达质粒后再分别用不同浓度E2处理，与未用E2处理组相比，低浓度E2增加荧光素酶活性，IOpM最为显著。ERoa36参加血清养分剥夺的细胞增殖和存活通路，并介导E2激活的MAPK/ERK和P13KAkt信号通路的交叉对话，同时介导低浓度E2激活的MAPK信号通路。结论：敲低ER.a36降低PCI2细胞对低浓度E2的敏感性、增加细胞血清养分剥夺的耐受性：ER.cc36参加E2激活的增殖信号通路影响PCI2细胞血清养分剥夺（低血清）耐受性。关键词：ERa36;中枢神经系统；雌激素；血清ER-a36在PCI2细胞血清养分剥夺耐受性中的作用初探TheprimarystudyonroleofERa36inserumdcprivetocrabi1ityofPC12cellsbstractManyresearchesshowthatestrogenpla5StheneuroDrotectiveroleinischemicstroke.Usually,estrogeninteractswithestrogenre.
