荧光分析法的特点和应用ppt课件.ppt

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1、荧光分析法的特点和应用,一.荧光定性分析,将样品的荧光物质的激发光谱和荧光光谱图的形状、位置与标准溶液光谱图进行比较,从而鉴别样品是否与标准溶液是同一种物质。,二.荧光定量分析,(1)优缺点 优点: 1、灵敏度高 比紫外-可见分光光度法高24个数量级; 检测下限:10-1010-12g/ml 2、选择性强 既可依据特征发射光谱,又可根据特征吸收光谱; 3、试样量少和方法简单 缺点: 应用范围小。,(2)定量依据与方法 1、定量依据 荧光强度If 正比于吸收的光强度Ia和荧光量子产率:由朗伯-比耳定律得:荧光强度 If :,对于稀溶液,当 2.303bC 0.05时: 式中: If -荧光强度;

2、 I0 -入射光强度; f -荧光量子产率; b - 吸收光程; - 摩尔吸光系数; C - 物质浓度。 简化为:,2、定量方法 1)标准曲线法: 配制一系列标准浓度试样测定荧光强度绘制标准曲线,再在相同条件下测量未知试样的荧光强度,在标准曲线上求出浓度;,3)多组分样品的荧光分析 a.无相互干扰,分别测定 b.有干扰,同紫外可见吸收光谱定量方法 解联立方程组法 等吸收双波长消去法,三.荧光分析法的应用,1.无机化合物的分析 与有机试剂配合物后测量;可测量约60多种元素。 铍、铝、硼、镓、硒、镁、稀土常采用荧光分析法; 氟、硫、铁、银、钴、镍采用荧光熄灭法测定; 铜、铍、铁、钴、锇及过氧化氢采用催化荧光法测; 铬、铌、铀、碲采用低温荧光法测定; 铈、铕、锑、钒、铀采用固体荧光法测定2.生物与有机化合物的分析 芳香族化合物因具有共轭的不饱和体系,多数能发生 荧光,可直接用荧光法测定。 维生素、氨基酸和蛋白质、胺类、甾族化合物、酶和辅酶等,均可用荧光法分析。,谢谢观看,请给予批评指导!,

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