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1、猪抗原抗体检测方案,检测的目的,1疾病预警(1)了解疾病在场内的污染状况,制定相应策略(2)提前了解免疫抗体的高低及整齐度,及时纠正2免疫程序的评估与优化(1)了解母源抗体的消长情况(2)疫苗接种的效果-免疫抗体监控3疾病控制和清除计划:通过系统检测和措施,实施疾病的控制或清除计划4疾病诊断,重点进行监测四大猪病:猪瘟、蓝耳、伪狂犬、圆环,1. 猪瘟主要问题(1)抗体水平偏低(2)疫苗的选择及剂量:细胞苗?脾淋苗?,150 RID = 37 PD50(3)持续性感染猪的存在,猪瘟抗原检测,(1)常用方法:PCR、荧光抗体和ELISA(2)检测目的:引进种猪或后备母猪时的检查,疑似病例的确诊,猪
2、群带毒率的定期评估(3)结果分析:猪瘟抗原ELISA阳性结果代表野毒阳性,PCR和荧光抗体阳性结果有可能是疫苗毒的干扰。,猪瘟抗体ELISA检测要点:,A.怎样评估母源抗体和免疫效果 1)当母源抗体的降到阻断率(Block)50%以下时,才能不干扰疫苗的免疫。(确定首免日龄) 2)免疫后阻断率(Block)上升到50%以上才能代表免疫合格。 良好的种猪场要求:阳性率100%(40),合格率90%(50) cv25%)CSFV判定标准:若%PC值大于或等于0.4则判定阳性;若PC%值小于0.4则判定阴性,表1:猪血清CSFV抗体检测结果,CSFV判定标准:若%PC值大于或等于0.4则判定阳性;若
3、PC%值小于0.4则判定阴性,B. 剔除持续感染猪或无抗体反应猪,1)持续性感染的种猪可间断性或持续性排出病毒,他们成为整个猪群的感染源。 2)首次使用应对母猪群进行检测,对抗体低下猪只进行补针后6周复检。若仍然没有抗体产生,应进行淘汰。,C. 猪瘟抗体检测结果分析,1)Cutoff值是 1:16代表抗体阳性2)实际生产中至少要在1:64以上才有一定的保护,经产母猪多次疫苗免疫后抗体水平一般会在1:256到1:1024左右波动。,D. 猪瘟抗体 ELISA检测时间表,蓝耳病的主要问题,(1)毒株的变异与交叉保护(2)疫苗的选择:灭活疫苗、弱毒疫苗、毒株(3)猪群稳定性评估,蓝耳病的检测方法,(
4、1)抗原:RT-PCR(2)抗体:ELISA,蓝耳病的抗体检测结果分析,(1)对于稳定的种猪群,S/P值为0-2左右,很少大于2.5.(2)良好免疫群的典型的S/P比值范围为:0.7 to 1.8 ;有些可能2.0 。(3)如果每年免疫两次,仍有多于20的猪抗体为阴性,需要对疫苗的管理和使用进行检查。(4)当S/P 2.5 病毒血症 (5)当S/P 3.5-高于5.0 急性感染,蓝耳病的抗体检测结果分析,(6)6-7周龄时,多数仔猪抗体可变为阴性(无病毒循环)(7)引进种猪,要剔出阳性值SP1.2的猪只,保证种群的稳定(8)公猪抗体阳性值SP2.5的最好不要使用(9)母猪群间隔1-2个月对群体
5、进行监控,了解猪群等稳定状态(10)仔猪了解病毒的感染时间,加强药物保健(11)当S/P 2.5时,猪群即呈现不稳定状态,需要采取措施进行控制,PRRSV判定标准:S/P值大于等于0.4判定为阳性;S/P值小于0.4判定为阴性,蓝耳病抗体检测时间表,伪狂犬的主要问题,(1)种猪群野毒抗体(gE抗体)阳性率居高不下(2)中大猪的呼吸道问题(3)散发性母猪繁殖障碍(4)净化方案的选择,伪狂犬的检测方法,(1)PRVgB:总抗体,S/N值和阻断率(BLOCK值)(2)PRVgE(I):野毒抗体(3)通过PRV-gB和PRV-gI抗体检测可了解本场伪狂犬病的流行状况,制定相应的免疫方案及措施。,伪狂犬
6、清除计划,(1)在阳性率低的种猪群,建议一次性淘汰所有阳性种猪。每个季度筛选一次,加强疫苗免疫,同时保证引入阴性后备母猪和种公猪,一般一年见效。(2)在阳性率很高的种猪群,保证引入阴性后备母猪和种公猪,加强免疫。每季度抽样监控野毒阳性比例防止感染扩大并用PRV-gB评估免疫抗体水平,三年可见效。,PRV-gI判定标准:若S/N值小于等于0.6则判定为阳性;若S/N大于0.6则判定为阴性,伪狂犬检测时间表,圆环病毒,PCV2判定标准:若S/P值大于0.4则判定为阳性;若S/P小于0.4或大于0.3为可疑;若S/P小于0.3则判定为阴性,0.421为重度感染,OD值0.42为安全,圆环病毒,PCV2判定标准:若S/P值大于0.4则判定为阳性;若S/P小于0.4或大于0.3为可疑;若S/P小于0.3则判定为阴性,0.421为重度感染,OD值0.42为安全,