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1、血培养的概念,血培养是一项实验室检查，是采集患者血液标本并接种到培养瓶，用以发现、识别导致患者感染的病原微生物是诊断菌血症和真菌血症的基本而重要的方法对感染性疾病的诊断、治疗和预后都有极为重要的临床意义,血培养的目的,证实有感染性的病原体 鉴定病原体，做药敏试验 指导抗菌药物的使用,能够更好的帮助医生合理用药，减少患者的死亡率,目前血培养存在的主要问题-医生,血培养重视程度不够，送检率低 血培养用处不大，治疗费用增加，有指征不送检 血培养时间长，不能适应临床需求 只做需氧培养，不同时做厌氧培养，病原菌检出率低,目前血培养存在的主要问题-检验员,血培养检测运输标准及接收标准不规范 应室温储存的却
2、低温储存 标本没有及时检验，导致微生物检测延迟 实验室人员没有认真核查接收标本（采血量不够、培养瓶有破损等）血培养阳性结果的处理不够及时 没有及时将结果反馈给临床 “时间就是生命”,目前血培养存在的主要问题-护理人员,采血消毒不够严格，导致污染率偏高 皮肤消毒不够严格 培养瓶的消毒问题 不规范的血培养 采血量、采血时间、采血套数不符合规范 不规范的血培养导致病原菌分离率低 难以判断病原菌是污染造成还是感染造成的标本没有及时送检，导致检测延迟,血培养标本如何采集,？,血培养临床实践指南,CLSI是美国【临床实验室标准化协会】的英文缩写，英文名为Clinical and Laboratory St
3、andards Institute美国CLSI的抗微生物药物敏感性试验操作方法和判断标准，是国内临床细菌检验遵循的标准。由于制订该项标准需要投入大量的人力、财力和物力，所以大多数国家包括中国都还没有建立自己的标准而依赖CLSI的方法和标准CLSI标准每年更新,关键要点,采血指征采血时间采血套数采血次数接种血量消毒灭菌,采血指征,不明原因的发热(38)或体温过低(36)白细胞增多（ 10109/L），粒细胞减少（1.0109/L）休克，寒颤严重的局部感染(脑膜炎、心内膜炎、肺炎、肾盂肾炎、感染)心率异常加快低血压或高血压呼吸频率加快(20次/分或CO2分压32mmHg),怀疑血流感染时要做血培养
4、,发热要做血培养！,0,30,60,时间 (分钟),体温,细菌浓度,采血时间,采集血培养时间的重要性?,9% +,14% +,9% +,11% +,发热高峰前12-2.5小时,发热高峰前2.5-0.5小时,发热高峰期间,发热高峰后1-12小时,166 病人,105 病人,199 病人,258 病人,Thomson et al. 1991. ASCP. Mayo Clinic Study,采血时间,寒颤和发热初起，心内膜炎（持续性菌血症）例外在应用抗菌药物之前如果患者已经应用抗菌药物治疗，应该在下一次用药之前采集血培养,采血套数,基本概念成人“一套” 血培养包括：需氧瓶和厌氧瓶各一个 注意：一次
5、穿刺采血，算“一套”，采集第二套应从另一穿刺点获得“双瓶双侧”，是指从一个部位采血接种一套培养瓶，再从另一部位 采血接种另一套培养瓶，一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单 个血培养儿童一般只做需氧培养，特殊患者才考虑厌氧培养,采血套数,指南中强调：血培养至少送2套除外新生儿外，成人：任何时候，不能只送一瓶！,23套血培养，有助于污染的判断,Tokars, JI. Clin Infect Dis 2004; 39:333,污染菌,致病菌,？,采集1套无法判断是病原菌还是污染菌,Cockerill, CID 2004,血培养套数与阳性检出率（）,65,80,96,99,Weinstein et
6、al. Detection of Bloodstream Infections in Adults: How Many BloodCultures Are Needed J Clin Microbiol. 2007; 45:3546-3548,血培养套数与检测灵敏度（）,为何要送厌氧血培养瓶？,In this study, use of paired aerobic/anaerobic blood culture bottles yielded more staphylococci, members of the family Enterobacteriaceae, and anaerobes
7、 when compared to paired aerobic blood culture bottles.50 it is recommended that routine blood cultures include paired aerobic/anaerobic blood culture bottles.50-52 When less than the recommended volume of blood is drawn for culture, the blood should be inoculated into the aerobic vial first; any re
8、maining blood should then be inoculated into the anaerobic vial.,这些研究中，使用“配对需氧/厌氧血培养瓶”比用“两个需氧血培养瓶”能检出更多的金葡、肠杆菌科细菌和厌氧菌推荐常规血培养要包括配对的需氧/厌氧血培养瓶,CLSI 2007 M47-A,厌氧瓶平均报阳时间快于需氧瓶,h,厌氧瓶检出致病菌时间更短,同样检出致病菌，BACTEC平均检测时间比Bact/Alert少4.36小时,Zadroga R et al. Clin Infect Dis. 2013;56:790-797,厌氧瓶、需氧瓶互相补充：提高检出率,J Micro
9、biol Immunol Infect. 2007;40:445-449,采血次数,对怀疑菌血症、真菌血症的患者，推荐同时或短时间内（10分钟内）从不同部位（如双臂）采集 23 套血培养标本，做到“双瓶双侧”，如有必要可同时从下肢静脉采血接种第三套培养瓶，采血后的 2 5 天内不需要重复采集血培养 急性心内膜炎：30分钟内完成3套血培养的采集，如果24小时内报告阴性，则继续采集2套血培养亚急性心内膜炎：每间隔30分钟至1h采集1套，连续采集3套标本，如果24小时内报告阴性，则继续采集2套血培养,接种血量,采血量与检出率的关系,血量每增加1毫升，成年人菌血症阳性检出率增加3,但并非越多越好，超过
10、一定数量的采血量会稀释培养瓶内的肉汤，使肉汤无法有效中和血中的抑制物质（补体、抗体、抗生素），所以血液与肉汤的最佳比例为1：41：10,接种血量,成人一套标本（需氧厌氧2个培养瓶），每瓶810ml，共20ml，双侧双瓶即40ml婴幼儿推荐的采血量应少于患儿总血容量的 1%，每瓶不少于2ml采血量不足时应优先保证需氧瓶，因临床90以上的感染为需氧菌或兼性需氧菌感染,利用瓶身刻度准确采血,规范采集血培养标本,您知道您有多重要！,无菌操作：污染率的指标是3%手卫生皮肤消毒培养瓶的消毒,每次采集血液标本前一定要洗手使用3-5ml抗菌皂液保证所有手部皮肤接触皂液的时间超过15秒注意指尖及指甲内侧不要遗忘
11、拇指纸巾干手并勿用手直接关闭水笼头,你的手真得洗干净了吗？,严格执行手卫生,皮肤凝固酶阴性葡萄球菌定植于输液管,严格执行皮肤消毒程序,定植细菌“污染”血培养,推荐使用碘酊、碘伏或洗必泰作为皮肤消毒剂 碘酊作用时间：1min 碘伏作用时间：1.5-2min 洗必泰作用时间：1min （但不能用于少于2个月婴儿皮肤消毒）,皮肤消毒,70%乙醇擦拭静脉穿刺部位，待干30秒,1-2% 碘酊30秒或10%碘伏消毒60秒，从穿刺点向外画圈消毒,直径1.5-2cm,用70%乙醇消毒 60秒（脱碘），待酒精挥发干燥后采血,细菌是干死的，不是淹死的,皮肤消毒程序（三步法）,培养瓶的消毒程序,去掉培养瓶口的塑料瓶
12、盖70%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子60秒自然待干将标本注入培养瓶内5. 颠倒混匀标本与肉汤，以避免血液凝集 （儿童采血量少，更应注意颠倒混匀）,细菌是干死的，不是淹死的,蝶翼针采血程序,血培养采血注意事项,血培养建议从外周静脉采血，不建议采动脉血常规血培养不宜从静脉导管或静脉留置装置取血注射器采血，采好后注入血培养瓶之前不需要更换针头标本采集部位：从两侧上肢静脉采血“双瓶双侧”，必要时从下肢静脉采血做第三套血培养采多种血液标本时一定最先采集血培养标本,无需保留的：从独立的外周静脉采集2套血培养，无菌状态下取出导管 并剪下5cm导管尖端或近心端于无菌试管内送实验室进行培养 需要保留的：采取至少2套血培养，其中至少1套来自外周静脉，并做好 标志，另外的1套则从导管中心或硅酮隔膜无菌采获，两个来源的 采血时间必须接近（5min），各自做好标记,怀疑导管相关性血流感染时血培养的采集,培养瓶的储存与送检,采集标本前：室温保存，不需冷藏，更不能冷冻采集标本后：尽快送微生物室，如无法及时送检，应置于室 温，不能置于冰箱或温箱,让我们做的更好！,听,聆,谢,感,
