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1、临床微生物标本采集方法,一 导管尖培养标本采集,物品准备：无菌试管、标本标签、无菌剪刀、无菌手套,操作者进行卫生消毒，戴帽子、外科口罩,戴无菌手套，将拔除的中央导管用无菌剪刀剪长约5CM，导管尖端放入无菌试管内。,脱手套，洗手，标本及时送检,二、留置导尿管患者中段尿培养标本采集,物品准备：治疗车、速干手消毒剂、治疗方盘内有盖培养试管1支、打火机一支、无菌手套一副、0.5%碘伏消毒液棉球（置换药碗内）数个、无菌镊子1个、弯盘1个、酒精灯1盏（A）,操作人员准备：着装规范（卫生手消毒、帽子、口罩、 口罩、）;患者准备：确认患者（核对姓名、床号、腕带），导尿管已夹住,松开患者导尿管，弃其前段尿液,使
2、用0.5%碘伏溶液棉球消毒导尿管的采样部位,操作者用速干手消毒剂手消毒后戴无菌手套，使用无菌注射器斜刺入导尿管的采样部位抽取10-20ml尿液，退出注射器,协助者点燃酒精灯，用燃烧法消毒试管管口和盖子,将注射器内尿液注入试管（避免污染）,协助者再次用燃烧法消毒试管管口和盖子，随即盖紧试管（标本不得倒置，以免污染），熄灭酒精灯，贴好检验单标签,清理好用物，手卫生，尿标本及时送检,注意事项,1、采集指征：怀疑有尿路感染时，应考虑做尿培养。2、采集时机：抗菌药物使用之前，留置导尿管者须 夹管30min以上。3、采样部位：应选择尿管采样口或靠近尿道的导尿 管管壁。4、采样部位的消毒：使用0.5%碘伏液
3、棉球沿采样点 由内而外消毒，每个棉球只使用一次。5、无菌物品需检查包装和有效期，确保合格。6、采样过程中避免污染。,三、开放性伤口培养标本采集,物品准备,用生理盐水彻底冲洗伤口,用拭子深入伤口基底部或伤口与正常组织边缘处采集两个标本，分别用于革兰染色和培养,将用于革兰染色的标本置于无菌标本杯中,将用于培养的标本置于需氧运送培养基中，密闭保存,分别标注患者及标本信息，30min内送检，否则置4冰箱冷藏，24h内送检,四、使用中紫外线灯辐照度值测定法,方法：紫外线强度照射指示卡测定法,物品准备：标尺、紫外线强度照射指示卡,放好标尺，开启紫外线灯,开启紫外线灯5min后，将指示卡置于紫外线灯下垂直距
4、离1m处，有图案一面朝上,照射1min后，关掉紫外线灯，观察指示卡色块的颜色，进行结果判定。将指示卡色块的颜色与“灯管强度90uW/CM”、“灯管强度70uW/CM”标准色块进行比较，判定测定结果,五、消毒剂染菌量采样,用物准备：碘伏、含9ml中和剂试管、无菌注射器、酒精灯、手消毒剂、记号笔,手消毒：按六步洗手法搓揉至干燥,消毒试管口：将试管放在酒精灯上旋转进行消毒，此为重要步骤。,无菌法取注射器,用无菌注射器抽取使用中的消毒剂1ml,将抽取的消毒剂注入含9ml中和剂的试管内，注意不接触试管口,再次用酒精灯消毒试管口,将消毒剂与中和剂振荡充分混匀,用记号笔在试管壁编写号码，送检,备注：中和剂的
5、选择：1、醇类与酚类消毒剂用普通营养肉汤中和。2、含氯消毒剂、含碘消毒剂和过氧化物消毒 剂用含0.1%硫代硫酸钠中和剂。3、氯与定、季铵盐类消毒剂用含0.3%吐温- 80和0.3卵磷脂的中和剂。4、醛类消毒剂用含0.3%甘氨酸中和剂。5、含有表面活性剂的各种复方消毒剂可在中和剂中 加入吐温-80到0.3%，也可使用经该消毒剂消毒 效果监测的中和剂鉴定试验确定的中和剂。,六、洁净手术室空气沉降菌采样,一、采样前准备1、当日术毕，按常规对手术间所有物表及地面进行湿式清洁和擦拭。2、检查净化空调系统运作是否正常，当日完成手术间清洁后，调节空调系统处于待机状态，次晨打开系统运行30min。自净后采样。
6、,二、采用平板沉降法1、采样时间:在净化空调开启30min进行采样，采样时洁净手术室大门应保持关闭，以维持手术室正压状态和洁净度。2、采样护士准备：在采样前应洗手（或手消毒）戴口罩，帽子，穿无菌衣。操作时应轻稳，避免污染培养皿。,3、采样方法：把琼脂平板放在室内各采样点，采样时把平板盖打开扣放于平板少许边沿上，同时培养皿下垫灭菌疗巾，暴露30min后，盖上平板盖，并作好手术间标志及平板上注明手术区和周边区，固定培养皿，放指定容器内。防再次污染。,4、采样顺序：采样时平板应从科室最靠内的房间放置，依次向外布放，每个手术间也是从最靠里的位置放置平板，最后放置最靠门的采样点。采样点分布均匀，收取平板
7、顺序相反。,5、布点要求：百级手术间，手术区（手术台两侧0.9m以内，两端0.4m内）呈对角线，东南西北中5点，周边区（距墙1m，每边2个）8点，共需13个培养皿；千级手术间，手术区（手术台两侧0.6m以内，两端0.4m以内）呈单角线3点，周边区（距1机，长边2个，短边1个）6点，共需9个培养皿；万级手术间:手术区（手术台4边，0.4m以内）呈对角线3点，周边区（距离1m每边1个）4点，共需7个培养皿。检测时可做一次空白对照和模拟操作。模拟操作将一个对照皿打开后立即封盖，两个对照结果必须为阴性，整个操作过程应符合无菌要求。,6、采样高度：洁净手术间的手术区采样高度为0.8-1.2m,周边区在地
8、面或0.8m采样，与医院洁净手术部建筑技术规范要求高度相符。,7、培养条件：采样后的培养基按要求送至化验室（细菌定）在37培养箱培养，24h观察结果。,8、判断结果：（1）百级洁净手术间手术区小于 0.2cfu/30min,周边区小于0.4cfu/30min（2）千级洁净手术间手术区小于 0.75cfu/30min,周边区小于 1.5cfu/30min。（3）万级洁净手术间手术区小于 2cfu/30min,周边小于4cfu/30min.（4）普通手术间小于5cfu/30min.,百级手术间,千级手术间,万级手术间,十万级手术间,注意事项：1、平皿的取送与放置方法：拿取平皿时，大在下，小在上，采
9、样时要大在上，小在下，大的斜盖在小的平皿上，不能两个平皿同时向上。2、在化验单上注明平皿暴露时间。,七、非洁净环境空气沉降菌采样,待测房间准备，静止至少10min,物品准备,根据待测房间面积大小，按GB15982要求放置培养皿,田,暴露时间 产房.导管房.新生儿.重症监护室.器官移植房.血液病病区.烧伤病房:15min普通病房:5min,从里到外逐个打开培养皿盖，扣放于平皿旁（注：手、头等严禁从培养基上方越过）,暴露规定时间后，按打开反方向盖上平皿盖，及时送检,八、物体表面采样,医院物体表面采样的对象：一切与医疗活动相关的物体表面均可以作为采样的对象：治疗台、治疗车、器械车、器械台、麻醉机、新
10、生儿暖箱、诊疗仪器、床头柜、床尾桌、监护仪按钮、血压器袖带、听诊器、床栏、遥控器、门把手、电脑键盘、鼠标、电话机、病历夹等。,采样时间：常规：消毒处理后进行采样暴发流行：未处理表面，随机采样采样面积：常规:100cm时，全部表面；100cm时取100cm。暴发流行：不限，尽可能多采。,九、卫生手消毒效果采样,医务人员手采样的意义：1、引起医源性感染的因素很多，医务人员手可以充当医源性感染的媒介，手的微生物污染是造成医院感染的最直接的传播途径，由于医务人员的手传播的细菌而造成的医院感染约占30%。因此医护人员做好手的清洁消毒是控制医院感染的重要措施之一。2.促进医务人员手卫生的依从性。3.进行流
11、行病学调查。,物品准备,酒精灯外焰烧灼采样试管管口，用无菌棉签蘸取中和试剂,被检者卫生手消毒后，双手五指并拢，用棉拭子在一手曲面从指跟到指端往返涂擦2遍，涂擦过程中同时转动棉拭子；同法采集另一只手,取无菌剪刀，酒精灯外焰烧灼采样试管管口,剪去棉拭子手接触部分投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内；酒精灯外焰烧灼试管管口后盖上瓶盖,十、外科手消毒效果采样,物品准备：无菌棉拭子、试管架、含中和剂的无菌洗脱液、灭菌剪刀、酒精灯、打火机、采样单、采样记号笔、手消毒剂,被检者着装规范，外科手消毒后保持双手位于胸前并高于肘部,取无菌棉签2根浸蘸含相应中和剂的洗脱液,一根棉签，涂擦一手五指曲面，从指跟开始至指端，每指跟到指端往返转动涂擦2次，一个手涂擦面积约30c；另一只手同样涂擦,剪去棉签手接触部位，两个棉签投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内,试管塞用酒精灯烫后塞住试管口,在试管上标记被检者姓名、采样时间,填写手卫生消毒效果检测申请单，及时送检,谢谢观看,
