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1、,保卫细胞的结构,保卫细胞是如何张开与关闭的？,光照、温度、含水量、离子等,实验六钾离子对气孔开度的影响,1、TPS-1 型光合测定系统测定 利用TPS-1 型光合测定系统 ,将不同处理的活体蚕豆叶片分别进行光合指标测定 ,得出气孔导度(气孔开度),介绍几种新型测定方法,2、液氮固定、冷冻扫描观察和图像分析相结合 用液氮固定和保存叶片，样品在冷冻制备系统中在干燥氢气环境下喷金加膜，加膜后在冷冻扫描电镜中检查，在图像分析系统中分析并统计作图 。,介绍几种新型测定方法,显微方法测定,显微方法测定,一、实验目的,1、学习保卫细胞的结构并了解气孔开闭的机理；2、了解钾离子对气孔运动的调节作用；3、掌握
2、显微测微尺（目镜、物镜测微尺）的使用方法；,二、实验原理,气孔运动钾离子累计学说：K+可调节保卫细胞的渗透系统，K+转运到保卫细胞中引起渗透势下降，细胞吸水膨胀，气孔张开。 在光下非环式光合磷酸化或环式光合磷酸化形成的ATP，活化了质膜H-ATP 酶，不断供给保卫细胞原生质膜上的钾-氢离子交换泵使保卫细胞逆着离子电化学势差而从周围表皮细胞吸收K+，降低保卫细胞的渗透势，水势降低，促进保卫细胞吸水，气孔张开。,三、实验材料与试剂,（一）实验材料： 朱顶红叶片、接骨草叶片。 （二）实验试剂： 1、 0.5% KNO3 溶液（称取0.5gKNO3，加水溶解，定容至100ml） 2、 0.5% NaN
3、O3 溶液（称取0.5gNaNO3，加水溶解，定容至100ml） 3、蒸馏水（三）实验器材：显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、载玻片、盖玻片、刀片、镊子、培养皿,显微测微尺的使用及校准,1、放置目镜测微尺 取出目镜旋开镜筒放置目镜测微尺（刻度朝上）旋上镜筒将目镜插入镜筒2、放置镜台测微尺 将镜台测微尺放置在镜台（刻度朝上）3、校准目镜测微尺的长度 低倍镜高倍镜（40倍）4、计算目镜测微尺每格的长度,校准结果展示,四、实验步骤,1、采取接骨草叶片或朱顶红叶片，在人工气候箱中培养30min,其间随时用水喷洒叶片，以保持叶片湿润，促使气孔开放；,四、实验步骤,2、取三个培养皿并编号1、2、3，分别加入15ml的 0.5% KNO3 溶液 ，0.5% NaNO3 溶液，蒸馏水； 3、撕取光照处理后的接骨草叶片或朱顶红叶片的下表皮若干，分别放入上述3个培养皿中（让下表皮完全浸没在溶液中）；4、将培养皿置于25的人工气候培养箱中培养30min（也可用台灯代替人工培养箱进行光照处理）；,四、实验步骤,5、取出下表皮，制作临时装片，用显微测微尺测出气孔开放的大小并记录（随机测量5个气孔的内径，取平均值）；气孔开度=气孔所占格数目镜测微尺每格的实际长度例：气孔开度=32.56m6、比较分析各种处理气孔的开度。,五、预实验结果展示,谢谢,
