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1、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质,1.实验原理,斐林试剂,苏丹,橘黄色,红色,砖红色沉淀,紫色,苏丹,双缩脲试剂,鉴定物质,试剂,实验现象,还原性糖,脂肪,蛋白质,淀粉,碘液,蓝色,生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,实验原理,选材：含糖量较高的白色或近于白色的植物组织(排除色素对显色的干扰)，苹果、梨最好。,实验流程(步骤),1.可溶性还原糖,制备组织样液：,制浆：去皮、切块、研磨，,过滤：（用单层纱布）,取液：（mL）,显色反应,mL组织样液,刚配制的斐林试剂mL,现象：,呈现蓝色,变成砖红色,(用前混匀),5065.C水浴加热2min,葡萄糖，果糖，麦芽糖；,蔗糖为非还原性糖,
2、还原糖的检测和观察：,还原糖的检测结果,2.脂肪的鉴定,取材：花生种子（浸泡h），去皮，将子叶削成薄片,制片：,选取最薄的薄片移至载玻片中央,在薄片上滴加苏丹(或苏丹)染液2 3滴，染色min,滴加体积分数为50%的酒精溶液12滴，洗去浮色(多余的苏丹),吸去余液，滴1-2滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片,显微观察：,先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察,现象：,有被染成橘黄色(或红色)的脂肪微粒,脂肪的检测结果,3.蛋白质的鉴定,选材与制备组织样液：,黄豆组织样液（或鸡蛋蛋清稀释液）,黄豆浸泡 去皮切片研磨过滤滤液,显色反应,mL组织样液,双缩脲试剂mL,现象：,无色,双缩脲试剂滴
3、,紫色或紫红色,(创设碱性条件),(提供Cu2+),蛋白质的检测结果,4.淀粉的鉴定,取材：马铃薯匀浆,检测：,mL组织样液,碘液2滴,现象：,摇匀后变成蓝色,问题探讨:1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时，为什么要留出一部分样液？,作对照,2、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加34滴而不能过量？,过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色。,3、为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？,时间太长，Cu(OH)2悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。,深化,4、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同？,新配制的Cu(OH)2溶液,在碱性环境下的Cu2+,NaOH浓度为0.1g/mL
4、CuS04浓度为0.05g/mL,NaOH浓度为0.1g/mLCuS04浓度为0.01g/mL,先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合，而后立即使用。,先加入Na0H1mL，然后再加CuS044滴，摇匀。(不能过量),水浴加热,不需要,知识结构,1、青苹果汁遇碘液显蓝色，熟苹果汁能与斐林试剂作用产生砖红色沉淀，下列结论中最合理的是()A青苹果汁中有淀粉，不含还原糖 B熟苹果汁中含还原糖，没有淀粉 C苹果转熟时，大量淀粉水解成还原糖 D苹果转熟时单糖聚合成淀粉,C,例题,、安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国，引起世人注目。鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品，肯定不需要用到的化学试剂是()A.斐林试剂 B.红墨水C.双缩脲试剂 D.苏丹染液,B,例题,3(2005.广东)生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定实验中，以下操作错误的是()A、可溶性还原糖的鉴定，可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀B、只有脂肪的鉴定需要使用显微镜C、用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热D、使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用,A,
