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1、红色花标本保存技术研究昌篱期中国现代中药V红色花标本保存技术研究李海泉,王荣祥,易杰,陈文娜,马贤德,陈靖(1.辽宁中医药大学杏林学院,辽宁沈阳l10032;2.辽宁中医药大学药学院,辽宁大连l16620;3.辽宁中医药大学教学实验中心,辽宁沈阳l10032)摘要目的:以康乃馨为研究对象,建立简便易行,无毒的红色花标本保存技术,使红色花标本的颜色,形态接近自然状态,便于观赏和学习.方法:应用酸性液体保存法,冷冻干燥法等8种方法保存红色花标本.结果:采用酸性液体保存法1的康乃馨红色部分色泽保存好.采用酸性液体保存法2的康乃馨红绿部分色泽保存较好,但色泽距离自然状态还存在一定差异,且标本液透明度差
2、.采用冷冻干燥法保存的康乃馨红绿部分色泽保存均好,更接近自然状态.结论:酸性液体保存法解决了红色花浸制标本红绿部分不能兼顾的问题,但标本颜色和形态与自然状态仍有差异.冷冻干燥法不仅保存效果优于酸性液体保存法,使标本的色形更接近自然,而且化学试剂应用少,无毒害,方法简便.关键词标本保存;形态;色泽;红色花;冷冻干燥传统红色花浸制标本存在着标本液透明度差,红绿部分不能兼顾,保存时间短,制作周期长等缺点.本项研究针对上述问题,以康乃馨为研究对象,尝试了不同保存方法保存红色花标本.酸性液体保存法成功固定了红色花标本的颜色,但存在标本液透明度差和应用大量有毒化学试剂等缺点.为此将冷冻干燥技术应用于红色花
3、标本保存技术并对传统浸制标本保存技术进行改造,解决了红色花标本因自身含有的水分而产生的不易保存的问题,并具有抑菌,制作周期短等特点.而且经冷冻干燥处理的红色花标本颜色,形态更接近自然状态.可见,冷冻干燥技术在红色花标本保存技术上的应用具有深入研究价值.1材料1.1植物康乃馨花,沈阳市亿隆花店提供.1.2试剂醋酸铜,硼酸,亚硫酸,柠檬酸,氯化镁,柠檬酸钠,变色硅胶,环氧树脂,维生素C.1.3仪器CHRISTALPHA14LDplus冷冻干燥机(德国),MDFU32V一86冷冻冰箱(日本三洋).2方法2.1浸制标本方法2.1.1标本固定为保护形态,避免花受到瓶壁的挤压,用尼龙线和玻片固定,注意避免
4、污染标本液,见图1.2.1.2各方法的标本液配制及处理2.1.2.1酸性液体保存法1将柠檬酸20g溶解于1000mL蒸馏水中,加入福尔马林50mL.2.1.2.2酸性液体保存法2将硼酸5g溶解于1000mL蒸馏水中,加入5mL福尔马林和2mL亚硫酸.48h后更换3%柠檬酸溶液1000mL,同时加入1g醋酸铜和10g氯化镁.2.1.2.3氯化镁浓度递增法10%氯化镁溶液1000mL,每隔48h使标本液浓度增加10%,直至饱和.2.1.2.4液体石蜡混合液法2%福尔马林10mL加入800mL液体石蜡中充分搅拌后制成标本液.取出在柠檬酸钠溶液浸泡30min的康乃馨,表面无水珠时放人上述标本液.2.1
5、.2.5加热一还原剂保存法12.5g维生素c,4mL福尔马林加到1000mL蒸馏水中.共有两种处理方式,一是将康乃馨水浴加热,至60取出放人上述标本液;二是将康乃馨直接放人60水浴,5min后取出,再放人上述标本液.2.1.2.6胶封法将康乃馨用3%柠檬酸浸泡30min后取出,表面无水珠时固定,将环氧树脂注入标本瓶内.2.2非浸制方法2.2.1变色硅胶干燥法将康乃馨固定纱布框内,通讯作者易杰,Tel:(024)31207265.27放入标本缸中,倒入变色硅胶将纱布框完全包埋,将标本缸用封口膜密封,一周后将花取出用塑料管和玻片固定.2.2.2冷冻干燥法将康乃馨放入超低温冰箱内一86%冷冻24h,
6、将预冻后的康乃馨放入冷冻干燥机内(一64%,1.7Pa),24h后取出.将康乃馨图1鲜康乃馨图2酸-陛液体法1保存的康乃罄标本(10个月)用塑料管和玻片固定,放入标本瓶中加入5g变色硅胶,密封保存.3结果3.1各种方法保存康乃馨结果对比见表1.采用酸性液体法1,酸性液体法2保存的标本见图23.冷冻干燥法保存的标本见图4.图3酸-陛液体法2保存的康乃馨标本(10个月)表1各种方法保存康乃罄结果对比图4冷冻干燥法保存的康乃罄标本(3个月)从表1得知酸性液体保存法处理的康乃馨红色部分色泽保存效果好,酸性液体保存法2兼顾了康乃馨的红绿部分,但标本液透明度差.冷冻干燥法处理的康乃馨红绿部分色泽鲜艳,形态
7、稳定,经3个月观察无变化.其他保存方法均存在不同程度的缺陷.3.2各方法保存康乃馨的优缺点对比情况见表2.表2各方法保存康乃罄优缺点对比28从表2得知,常规条件下酸性液体保存法2保存的标本效果较好,冷冻干燥法保存的标本效果更好,标本色泽更接近自然,且无毒方便.4讨论标本自身所含水分是影响标本保存效果的最主要因素.花的形态主要是由微观的多个细胞骨架的支持才能很好地保持.在密闭的空间内,在干燥剂吸水的过程中标本会皱缩.由此可见,隔绝空气和对康乃馨所含水分的处理是红色花标本保存技术的关键.红色花标本保存技术目前主要有酸性液体保存法,浓度递增法,液体石蜡混合液法,加热一还原剂保存法,变色硅胶干燥法等.
8、实验发现,酸性液体保存法1采用了酸性抗氧化酸性试剂,结果表明红色花标本在酸性条件下保存效果好.酸性液体保存法2在1的基础上加入醋酸铜和氯化镁,保持了溶液的酸性,绿色部分也得到了兼顾.但仍有标本色泽与自然状态存在一定差异,标本液透明度不够等缺点.而且这种方法应用了有毒试剂,制作步骤繁琐,因此,很难推广应用.康乃馨经变色硅胶干燥法处理后,发生严重的皱缩,也不宜采用.实验结果表明在常规条件下,单独隔绝空气和处理康乃馨的水分不能成功地保存红色花标本.冷冻干燥法解决了标本因所含水分产生的不易保存的问题.预冻使标本含有的水分快速结晶而不膨胀,从而达到固定细胞骨架,快速停止标本新陈代谢的目的,然后行冷冻干燥
9、处理.在此过程中,标本所含水分会被逐渐脱掉,而花色素仍会保留在细胞骨架上.因此,采用冷冻干燥法可以很好地固定标本颜色和形态.在冷冻干燥处理过程中,标本处于超低温和高真空条件下,一般微生物结构被破坏,同时达到抑菌的目的.可见,冷冻干燥法综合解决了常规红色花标本保存技术存在的系列问题.冷冻干燥技术在红色花标本保存技术上的应用,解决了红色花标本的保存问题.但为了能够使标本颜色和形态更接近自然状态,更趋于完美,此项技术还需进一步完善.逛参考文献1温广宇,朱文学.真空冷冻干燥在花卉方面的应用J.河南科技大学(农学版),2003,23(3):7074.2谢天雨.缤纷的植物世界M.北京:中国言实出版社,20
10、04.105.3李保国,华泽钊,刘占杰.鲜花真空冷冻干燥实验研究J.制冷,2000,(4):54.58.(收稿日期20o7.03.23)StudyonPreservationTechnologyfortheSpecimenofRedFlowersLiHaiquan,WangRongxiang,YiJie,ChenWenna,MaXiande,ChenJing(1.XingLinCollegeofLiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicine,ShenyangLiaoning110032,China;2.PharmacyCollegeofLiaoni
11、ngUniversityofTraditionalChineseMedicine,DalianLiaoning116620,China;3.LaboratoryCentreforTeachingofLiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicine,ShenyangLiaoning110032,China)AbstractObjective:Theconvenient,practicalandinnoxioustechnologytopreservetheredflowerspecimenwasestablishedbymakingthecarnati
12、onastheobject.Themainpurposeistomakeboththecolorandtheshapemorenaturalforviewingandstudying.Methods:Theredflowerspecimenwaspreservedbyapplicationoftheeightpreservationssuchastheacidliquidoneorthedrynessbyfreezing.Results:Theacidliquidmethod1couldpreservetheredcolorperfect.Theacidliquidmethod2couldpr
13、eserveboththeredandthegreensegmentbetter,butitstillhadlittledifferencefromthenaturalsituation.Also,thespecimenliquidhadtheweaktransparency.Thefreezdrymethodcanpreserveboththeredandthegreensegmentasperfectasthenaturalsituation.Con?clusion:Theacidliquidmethodcansolvetheproblemthattheredflowerspecimenc
14、annotgivetheconsiderationtoboththeredandthegreensegment.Butitcanstillmakelittledifferenceinthefieldofcolorandshapebetweenthespecimenandthenaturalone.Whilethefreezdrymethodnotonlycanbesuperiortotheacidoneinordertomakethecolorandshapeofthespecimenmorenatural,butalsocanuselesschemicalreagenttomaketheinnoxiousandmoreconvenientmethod.KeywordsPreservationofspecimen;Shape;Color;Redflowers;Freezdry,;,29*毪*十*
