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1、辣椒新品种技术研究与示范项目申报材料 前言我国是农业大国，调整农业产业结构，增加农民收入，是国家切实关心农民利益的行动之一。我国农业比较落后，其主要原因是优良品种少，作为提高农业效益的品种改良措施不足。利用传统的杂交育种进行品种改良周期长，见效慢，解决这一问题最有效的方法是利用现代生物工程技术，加快品种改良速度，随着基因工程、细胞工程、酶工程在农业生产上应用不断扩展，基因技术已得到广泛应用，成效显著。生物技术在农业生产上的推广和应用，对人类的生产和生活产生了极大的影响。农业生物技术作为生物技术的重要应用领域之一，已经成为农业科技革命的强大推动力。农业生物技术不仅加快了传统农业向现代农业的转变进
2、程，在保障食物安全、保护环境、寻求替代能源等方面更是发挥着越来越大的作用。加速生物产业发展已经成为世界许多国家经济社会发展的战略重点。目前，农业生物技术领域是我国高新技术领域与国外差距最小的领域。我国转基因稻和转基因棉花的研究和开发已达到世界前沿水平，在农业生物技术研究的整体实力上处于发展中国家领先地位。来自自然界中动植物的基因是现代生物技术产业的基础，丰富的生物资源优势带动生物技术的快速发展。我国农业生物技术企业约有200家，正在研究的转基因植物种类达到47种，涉及各类基因103个。我国的杂交水稻技术现已推广到20多个国家，转基因抗虫棉花面积已占棉花总面积的40%，转基因水稻、玉米、大豆、蔬
3、菜等400多个品种进入安全性评价阶段，并有许多品种具备了产业化条件。经过近年来的快速发展，我国在农业生物技术领域已经取得了一系列成就。在应用基因工程技术方面，开展了大豆、水稻、小麦、马铃薯和甜菜等作物转基因技术研究，获得了一批转基因植株。专家分析认为，生物技术是未来农业经济和农产品竞争的重要领域，加快自主创新推动农业生物技术产业化进程，对于促进我国传统农业向现代农业转变、加快建设社会主义新农村具有重大意义。一、项目的目的、意义和必要性辣椒原产于南美和墨西哥等中美洲热带地区及西印度群岛，在明朝末年传入我国，现成为人们喜爱的重要的辛香食料。在甘肃、陕西、湖南、四川、贵州、*等省区栽培甚广，资源丰富
4、。辣椒是*乃至*州、*省的一大特色产业。2007年*州内*、*、*、*四县种植面积超过60万亩，其中*县种植面积达到20.2万亩，总产量2315万公斤，覆盖农户5.3万户、20多万人，种植*辣椒已经成为广大农民增收的主要经济来源。辣椒由规模种植到实现产业化还有较大差距。主要障碍有两个方面：一是辣椒种性退化，严重影响规模效益。由于长期种植种性逐渐退化，加之品种混杂更加剧退化，抗疫病和病毒病的能力较差，亩产仅100公斤左右。辣椒个体大小、色泽差异明显，严重影响了外观质量，出口容易受阻，加之没有在食品生产上形成知名品牌，体现不出规模效益。二是缺乏高辣椒素和辣椒红色素含量的加工专用型品种，是辣椒产业效
5、益最终不高的关键。辣椒中所含有的辣椒红色素是一种优良的天然食用色素，已被FAO、美、英、日、中等国际组织和国家定为无限制性使用的天然食品添加剂，其国际市场非常紧俏，市场前景广阔；而辣椒素则在食品工业、医学和军事上都具有广泛的用途，市场前景广阔。但由于*辣椒其辣椒素含量平均仅为0.24%，约相当于4万“史高维尔”辣度国际单位，色素仅有10个色价左右，致使企业加工微利，严重影响了辣椒产业的发展和效益提升。辣椒种植业规模发展的同时，加工流通企业已得到不断发展，以某某天然辣素有限公司为代表的深加工企业，在省科技厅的支持下通过省院省校合作引进辣椒红色素和辣椒素提取技术，形成规模生产，年生产能力达到240
6、吨，由于采取三种溶剂同时萃取，一次投料可以同时获得辣椒素和辣椒红色素两个产品，其辣椒素和辣椒红色素的提取工艺技术先进，该公司是*省首家获得国家颁发的食品添加剂工业品生产许可证的企业，并通过了ISO9001：2000质量管理体系认证、食品安全体系HACCP的认证，也是国内食品添加剂行业第二家通过以上认证的企业，现已成为国内食品添加剂行业的知名企业，所生产产品辣椒素和辣椒红色素品质优良，一直处于供不应求状态。辣椒中的辣味成分为辣椒素类物质，是具有辛辣剌激性的活血管香草胺合成的衍生物, 主要成分之一为辣椒素。辣椒中的主要辣味成分辣椒素 Capsaicin ，又名辣椒碱、辣椒辣素，最早由Thres 1
7、876 从辣椒果实中分离出来，并为它命名。其化学名称为8-甲基-6-癸烯香草基胺，分子式为C18H27NO3, 是香草基胺的酰胺衍生物，其化学结构式为：H3CO HO -C6H3-CH2-NH-CO- CH2 4CH CHCH CH3 2。此后又有一些辣椒素的同系物从辣椒果实中被发现，它们统称为辣椒素类物质。迄今为止，已发现辣椒素同系物约十四种以上，其同系物结构类似辣椒素，为：H3CO HO -C6H3-CH2-NH-CO-R，相互之间只是R基团有所不同。其中辣椒素 75% 辣味最强 郭建明等，1998 ，与二氢辣椒素 Dihydrocapsaicin 共占辣椒所含辣味物质的90%以上，其余同
8、系物仅占少量 Constant et al,1996 。最近在甜椒果实中发现两种无辣味的类辣椒素物质辣椒素酯 Capsiate 和二氢辣椒素 Dihydrocapsiate ，研究者推测是辣椒素类物质合成的前体物，但还需要进一步研究证实（Kenji Kobata,et al,1998）。辣椒素纯品呈单斜长方形片状无色结晶，熔点65，沸点65220，易溶于乙醇、乙醚、苯以及氯仿，微溶于二硫化碳。辣椒素可被水解为香草基胺和癸烯酸，因其具有酚羟基而呈弱酸性，并可以与斐林试剂 Folin 发生呈色反应。八十年代初，Iwai 1979 等人利用同位素示踪技术、电子密度扫描显微镜等先进技术对辣椒素的形成做
9、了详细研究，认为辣椒素主要在果实胎座表皮细胞的液泡中形成积累，并通过子房隔膜运输到果肉表皮细胞的液泡中积累。同时Jinap 1992 研究认为，辣椒素在果实中的含量极不均匀，胎座中含量最高，果肉次之，种子中含量最低。而且不同辣椒品种的总辣椒素含量变化非常大，大多数品种辣椒鲜果中的辣椒素含量在0.21.0%之间。辣椒素是由香草基胺和C9支链脂肪酸两部分组成。香草基胺部分是由芳香族氨基酸苯丙氨酸衍生而来，支链脂肪酸部分则是由缬氨酸衍生而来。由于辣椒素合成的酚类前体物：对香豆酸 Coumaricacid 、苯丙氨酸、咖啡酸 Caffic acid 、3-甲氧基-4-羟基肉桂酸 Ferulic 、香草
10、醛 Vanillin 等同时是蛋白质、生物碱、类黄酮以及木质素的合成前体物 Hall and Yeoman,1991 ，因此辣椒素的生物合成与其它生物合成途径存在着竞争共同前体的问题，所以如能通过代谢调节或基因调控最大限度地促进辣椒素的生物合成，则对辣椒素的生产具有重大意义。Fujiwake 1980 研究认为，辣椒素合成酶是辣椒素合成中的关键酶主要定位于果实胎座表皮细胞的液泡膜上，同时是辣椒素合成过程中最后一个酶，也是关键性的限速酶，因此如能对辣椒素合成酶进行基因克隆，促使其在果实和细胞中充分表达，然后筛选出高辣椒素的突变体，培育出转基因高辣椒素的辣椒品种等将成为可能，这也会大大促进辣椒素的
11、生产，满足社会需求。辣椒素的降解主要是通过辣椒果实中过氧化酶 Peroxidase 氧化而完成的。Bernal等 1993 研究发现，辣椒素在过氧化物酶 POD 的作用下，转化为其它次生物质，降低辣椒果实中辣椒素的含量。他进一步研究发现过氧化物酶，特别是碱性过氧化酶同工酶B6与辣椒素共同定位于胎座表皮细胞的液泡中，它能强烈氧化辣椒素及其酚类前体物。Bernal等 1995 用凝胶渗透层析柱分析了过氧化物酶氧化辣椒素的产物特性。结果表明：辣椒素的氧化产物主要有5，5-二辣椒素聚合体 5，5-dicapsaicin 、4-0-5二辣椒素酯 4-0-5 dicapsinether 以及一些高度聚合的
12、脱氢产物 Bernal and Ros Barcelo,1996 。这些氧化产物都具有类木质素 Lignin-like 特性，说明在辣椒素的降解代谢中存在着氧化竞争库，辣椒素合成的酚类前体物于辣椒素竞争氧化产生了类木质素物质，用于细胞壁的构成。辣椒素可以促进肾上腺分泌儿茶酚胺并显著抑制蜡性芽孢杆菌及枯草杆菌，具有抗病菌、抗肿瘤和镇痛消炎作用，还可作为健胃剂，促进食欲、改善消化等生物学功能（狄云等，2000）。动物采食后，能促进胃液分泌、增强食欲，促进血液循环，提高机体的抗病能力，还有驱虫、发汗等功效，可用于动物的腹泻、炎症等疾病防治 郭建明等，1998 。郑春泉等 2000 还研究发现，应用辣
13、椒素局部治疗有抑制或延缓鼻息肉术后复发的作用。因此，辣椒素在食品餐饮、畜禽饲料与医疗药品等方面具有较高的应用价值。辣椒素广泛应用于食品、医学、军事和环保等领域，保守估计，目前世界上对辣椒素的市场需求量已超过4000吨/年，而世界总生产能力不足2000吨，需求缺口高达50；而辣椒红色素作为一种优良的天然食用色素广泛运用于人们生活的各个领域，目前在发达国家已限制使用甚至明令不得使用，其国际市场非常紧俏，市场前景广阔，预计全世界对辣椒红色素的需求已达3000吨/年。色素分为天然色素和合成色素两类。合成色素长期食用将影响人体健康甚至致癌，而天然色素是以自然界的各种无毒植物为原料，用提取、分离、精制的方
14、法获得，它无毒、无害，含有各种维生素和氨基酸，是我国色素工业发展的必然趋势。而辣椒红色素则是国际上公认的最安全、用途最广的天然食用色素。辣椒素和辣椒红色素是以辣椒为原料,运用溶剂萃取法提取纯化而得的产品，是具有广阔市场前景的绿色产品。根据农业生物技术应用国际服务组织（ISAAA）在北京发布的全球转基因作物概况报告，转基因生物育种已成为最具活力的一项现代农业技术，其发展势头已不可逆转。基因是一切生物细胞内决定遗传特性的最小单位。在原有品种基础上对遗传基因进行改造和转移，基因工程能使育种过程更为精确、更有预见性、效率更高，因而更具发展潜力，现已成为新品种培育的重要途径。目前国内外均缺乏辣椒红色素和
15、辣椒素含量高的专用型辣椒加工品种，尤其是缺乏两素含量都高的品种，其选育种工作也一直是国内外该领域中一项十分薄弱的环节，因而难以通过一般育种方法解决解决这个问题。拟应用现代生物技术定向培育辣椒加工专用新品种，解决好辣椒原料种植问题，满足企业加工需求，做大做强辣椒产业。为适应市场要求，提高辣椒产业效益，充分利用某某丰富的辣椒资源，某某天然辣素有限公司和项目合作单位、项目参与单位提出应用现代生物技术加快辣椒产业化进程技术研究与示范项目。项目的实施可以促进辣椒种植业高效发展，辣椒初加工向深加工发展，延长辣椒产业链，加快产业化进程。项目建设紧紧依托当地资源，发展特色经济、开发特色农业，符合*省委、省政府
16、提出的“绿色经济强省”思路和国家加快现代农业产业化建设要求，其项目建设具有区域性经济和社会发展的必要性。二、项目主要申请单位概况（一）某某天然辣素有限某某天然辣素有限公司成立于2003年，公司位于*县*镇，占地面积45亩，注册资金500万元，总资产3700万元。拥有职工队伍95人，其中：高级职称4人，中级职称9人。公司拥有自主知识产权的提取工艺及配方。主要产品有：辣椒碱、辣椒精、红辣素、辣椒红色素等。是国内第一家以生产辣素为主的高科技企业，是*省首家、国内第二家食品添加剂行业获得国家颁发的食品添加剂工业品生产许可证的企业，已通过ISO9001：2000质量管理体系认证、食品安全体系HACCPE
17、C01的认证。目前已形成辣椒素300吨，辣椒红色素450吨生产能力。截止2007年11月底，公司已生产销售辣椒辣素和红色素148吨,产品符合GB10783-1996标准、实现产值6000余万元、税利151.2万元。公司地址：*县*镇。法人代表*。（二）*市农业科学院生物技术研究所植物基因研究室主要研究方向为水稻功能基因组、基因工程、植物转基因、酶的定向分子进化和产业化。近五年承担包括国家863项目、国家植物转基因专项、国家科技部中小企业创新基金、*市科委重大、*市农委重点攻关等10多项科研项目。近两年来在基因改组及体外定向分子进化研究方面取得了显著成绩，包括比活提高5倍以上的-葡萄糖苷酸酶 G
18、US 突变基因；耐85高温的-葡萄糖苷酸酶突变基因；比活提高10倍左右的XylE基因；超级阻遏的CI和LacI阻遏蛋白突变基因（可用于构建无泄漏的原核高效表达系统）；比活提高60倍以上的大肠杆菌lacZ基因；不依赖于乙酰丁香酮诱导的根癌农杆菌VirG突变基因；比活提高30倍以上，且耐90高温的新型3-植酸酶基因等。同时在酸性、耐高温植酸酶的产业化方面取得了突出成绩。该项目的主要研究内容包括：植酸酶基因的DNA shuffling突变及体外定向分子进化；突变植酸酶基因高效分泌表达系统研究；植酸酶工程菌株的发酵优化；发酵后的膜分离技术研究；植酸酶的超滤浓缩技术研究；植酸酶的制剂技术研究；基因工程植
19、酸酶的动物饲养试验、毒性试验及我国农业部转基因生物安全性评价。与目前国内外同类研究或技术成果综合比较，本项目在植酸酶基因定向分子进化和发酵工程技术方面都处于国际领先水平。该项目研发的耐高温植酸酶开拓了植酸酶应用的新领域，首次使植酸酶可以用作市场十分广阔的颗粒饲料添加剂，植酸酶用于颗粒饲料添加剂每年全球的市场潜力在27亿人民币左右。该项目发表了4篇SCI论文，申报了四项基因发明专利及一项发酵工程有关的发明专利，通过评审被认定为*市高新技术项目。最近两年中还和华东理工大学合作开展了不同枯草杆菌菌株核苷合成中关键酶基因核苷酸序列比较、pur操纵子和阻遏蛋白相互作用及代谢工程研究，并取得了显著成绩。研
20、究得出肌、鸟苷生产菌株高产核苷可能机理包括：腺苷合成关键酶purA基因的移码突变造成了腺苷合成的缺陷；肌、鸟苷生产菌株pur操纵子控制的12个编码酶的基因发生了突变，从而造成其中4个酶的氨基酸序列发生了改变，可能提高了酶的活性或部分解除了产物对酶活的抑制作用；肌、鸟苷生产菌株中的purR阻遏蛋白基因和pur操纵子序列都发生了改变，从而使purR阻遏蛋白对相应pur操纵子的阻遏作用显著降低，从而加大了HMP途径的代谢通量。目前已通过对pur操纵子12关键酶基因的改造、GuaB和purR基因的缺失，构成了肌、鸟苷产量比生产菌株提高30%左右的基因工程菌株，该研究成果可给企业产生巨大的经济效益。此外
21、在水稻转录因子功能基因组的研究中也取得了阶段性的研究结果，已通过“酵母单杂交体系”从水稻中分离克隆了140多个与生长、发育、胁迫调控等有关的重要转录因子基因，并都已在Genbank登陆（其中最近两年分离了80多个），目前正重点开展10多个转录因子基因的功能研究。在植物转基因研究方面，已通过根癌农杆菌virG结合域的突变及和VP16强基因激活功能域的串联构建了高活性的virG基因，并经根癌农杆菌染色体整合构建了超毒力的根癌农杆菌菌株；此外还构建了“根癌农杆菌自杀体系”、适合于多基因同时表达的植物双元载体、经Cre/loxP系统消除Marker的植物转基因体系、可用于高效克隆植物顺式元件的植物双元
22、载体等。已获得了10多种植物的转基因植株。包括：抗虫、抗冻、增加钾吸收效率的转基因烟草、矮化的苹果砧木巴拉海棠、转铁载体及铁蛋白基因的苹果、转人乙肝表面抗原大蛋白S1S2S基因的番茄及苹果、耐贮的转基因番茄、抗虫的转基因甘蓝、表达“耐高温植酸酶”及“人表皮生长因子”的转基因油菜、转分解硫甙基因的油菜、转抗逆转录因子及昆虫抗冻肽基因的小白菜、转多基因的水稻、转抗虫基因的毛白杨等。已在国内外学术期刊发表学报级论文120多篇，其中SCI论文30多篇。目前4项转基因生物 一项转基因油菜、一项转基因番茄、两项工程微生物 申报了我国农业部转基因生物安全性评审，其中一项进入中间试验阶段，一项进入环境释放阶段
23、。两项完成生产试验阶段，并获得了我国农业部颁发的中华人民共和国农业转基因生物安全证书（生产应用）。认定并通过了2项*市高新技术项目。已获得三项国家基因发明专利，另外二项国家发明专利已进入实审阶段。已经具备的实验条件。共有600万左右的仪器设备，包括：冷冻高速离心机、超速离心机、HPLC、质谱仪、核酸成像系统、PCR仪、核酸杂交炉、DNA合成仪、PE公司377型全自动DNA 测序仪、中试蛋白纯化系统、瑞士植物细胞培养罐、B.Braun中、小试微生物发酵罐、NBS进口摇床、超低温冰箱、自动化光照培养箱、基因枪、电击仪、超声粉碎仪、Beckman 双波长分光光度仪、荧光光度仪、液体闪烁测定仪、Oly
24、mpus倒置显微镜、荧光显微镜、全波长酶标仪等设备。此外，拥有良好的植物组织培养房间、设备、用于转基因植物种植的500m2的温室。另外*植物生理、生态研究所的人工气候室可保障水稻的周年种植，有利于全年水稻转基因工作及抗病性鉴定的进行。*，男，汉族，*年5月出生，江苏省武进县人，博士，*市农业科学院研究员，*市农业科学院生物技术研究所副所长，*市农业遗传育种重点实验室副主任，*交通大学兼职研究员，南京农业大学兼职博导。主攻水稻非生物胁迫抗性有关转录因子调控网络及基因体外定向分子进化和产业化。1986年毕业于南京农业大学，获学士学位。1989年毕业于中科院*植物生理研究所，获硕士学位。1998年毕
25、业于中科院*植物生理研究所国家植物分子遗传重点实验室，获博士学位。自1991年以来，主要从事水稻功能基因组、基因工程、植物转基因、酶的定向分子进化和产业化有关的研究工作。期间主持和主研了包括国家863项目、国家植物转基因专项、国家科技部中小企业创新基金、*市科委重大、*市农委重点攻关等15项科研项目，目前已完成了11项。取得鉴定科技成果8项，获得市级以上成果5项，其中*市科技进步一等奖3项，分别为第一完成人（2003年），第6完成人（1993年）和第13完成人（2003年）。作为第一主持完成的科研项目高比活植酸酶基因的获得及耐高温植酸酶的生产获得2003年度*市科技进步一等奖，并实现成果转让，
26、转化收益1200万元。此外，还作为第一主持人分别获得*市科技进步二等奖（2006年）和三等奖（2005年）各一项，作为第一主持的“耐高温-葡萄糖苷酸酶基因及其获得方法”项目获2005年度“*市优秀发明选拔赛一等奖”。1994年，被共青团中央、国家科委、中国科协评为“全国青年科技标兵”； 1995年，被共青团*市委评为“*市新长征突击手”。 2004年，被*市科协评为第二届“*市青年科技英才”。2005年，获第八届“明治乳业生命科学奖”优秀奖。2006年，被*市发明家协会评为“*市第二届优秀发明人”，同年被*市科学技术委员会评为“优秀学科带头人”；2004-2006年度，被*市总工会评为“*市劳
27、动模范”；2007年度，被*市科学技术委员会评为“*市科技领军人才”，同年中国发明协会开展了“第三届发明创业奖”评选活动，获“发明创业奖”。2008年被国家人事部、科技部、教育部等7个部委评选为“新世纪百千万人才”。目前已在国际Genbank登陆新基因200多个；申报了15项发明专利，目前授权发明专利4项，其它处于专利实审阶段；4项转基因生物 一项转基因油菜、一项转基因番茄、两项工程微生物 申报了我国农业部转基因生物安全性评审，其中一项通过中间试验，一项进入环境释放，两项完成生产试验，并获得了生产应用的安全证书。已发表论文130余篇，其中在Nature Protocols，FEMS Micro
28、biol Rev，Nucleic Acids Research，Plant J，Biotechnology Advances，Anal Biochem,Eur J Biochem,Critical Reviews in Plant sciences等刊物发表SCI论文30多篇，累计SCI影响因子80左右，文章引用约500次。培养硕、博士研究生、科技骨干及技术人员60多名，以上人员正在生物工程研发领域发挥重要作用。（三）*省农业科学院*省农业科学院是*省多学科、综合性农业科研机构。下属15个研究所，分布在全省的七个地、州、市。现有在职职工1600多人，专业技术人员960人，其中高级专业技术人员2
29、20多人，在职和在读博士20人，在职在读硕士160多人。“七五”以来，承担国家和省的各类科研项目520多项；收集保存农作物种质资源2.4万份，育成审定农作物新品种155个，占全省省级审定品种的45%以上；获国家和省级科技成果奖260项；发表论文1000余篇。累积组织实施科技成果示范推广项目200多项，累积面积1.5亿多亩，新增产值60多亿元。*省农业科学院与第一项目申请单位在辣椒育种方面已开展了三年合作，在辣椒育种方面取得一定进展。（四）*县科学技术局*县科学技术局是*县人民政府专设科技管理工作的综合管理部门，现有干部职工11人，其中：大专以上文化程度6人，取得初中级专业技术职称的5人。在科技
30、管理工作中大胆创新，全县的科技事业有较快发展。近年来，先后组织实施了省科技厅立项支持的“依靠科技推动农业产业结构调整示范”等四个省级项目，取得了良好的经济效益和社会效益。积极组织县级有关部门开展试验、示范工作，并组织协调全县各相关专业技术部门，开展科技培训等工作，组织推荐了多项农副产品生产加工新技术运用成果，为加快科技创新体系建设，促进*农业化发展服务，对县域经济的发展起到了积极的促进作用。（五）*县农业局现有干部职工300多人，其中：高级职称3人，中级职称77人，初级职称213人，有土肥、植保、经作、种子、农机等专业推广队伍，全县12个乡（镇）有健全的农业技术推广机构和熟炼的技术人员。全局具
31、有从事农作物新品种引进示范推广工作40多年之久经验，技术人员具有丰富的示范推广经验，其*辣椒早春地膜覆盖栽培和间套种植栽培有一整套成熟技术经验，从事辣椒新品种、新技术引进示范推广工作经验丰富。三、项目现有工作基础和支撑条件*县位于*省东南部，*州中西部，东与本州的*、西畴县接壤，南与*县毗邻，北与*县相连，西界与*州*市和蒙*县相交，东西长107公里，南北宽70公里，全县总面积3826.57平方公里，山地面积占56%，丘陵面积占29%，盆地面积占15%。县城所在地*镇距州府*开化镇35公里，距省会昆明320公里。国道323线由西向东横贯全境，是*通往广西、广东省的主要通道。新建的锁龙寺罗村口高
32、速公路与国道323线平行贯穿全境，已建成投入使用的*州民用机场距县城仅有5公里，为*的经济社会发展构建了较好的交通网络。辣椒是*县的主要特色经济作物之一，“八五”以来被列为支柱产业，2007年种植面积达到20.2万亩，总产量2315万公斤，覆盖农户5.3万户、20多万人。辣椒高产栽培技术推广效果显著，通过实施“*县依靠科技推动辣椒产业示范”项目以来，全县粮经比例由2000年的79.3：20.7调整到2007年的56：44，经济作物种植比例提高了4个百分点，进一步优化了农业产业结构。市场体系日趋完善，“九五”期间相继建成了岔路口、*、*等具有一定规模的专业交易市场，稼依辣椒城是西南地区最大的辣椒
33、交易市场和集散地。全县以辣椒为原料进行生产、加工、贸易的企业、营销大户共157户，年交易量在10万吨以上。某某天然辣素有限公司，于2005年10月建成投入生产，建设规模设计为日产5%的辣椒素1吨、100个色价的辣椒红色素1.5吨的生产能力，年消耗干辣椒8000吨以上，产值1亿元。同时引进青岛大学开发的辣椒素发明专利技术（名称：辣椒色素和辣素的提取方法，专利号：ZL891052712）进行应用，获得了成功。公司为进一步拓展市场空间，提高产品市场竞争力，于2005年5月通过了ISO9001体系认证，并在此基础上，精心筹备、组织申报，2006年9月取得国际食品安全管理体系（HACCH）认证，为该公司
34、产品打入国际市场奠定良好基础。截止2007年11月底，公司已生产销售辣椒辣素和红色素148吨,产品符合GB10783-1996标准、实现产值6000余万元、税利151.2万元。该公司拥有较为先进的辣椒素和辣椒红色素提取技术，目前属国内领先水平。四、项目预期目标、考核指标，预期提交的成果（一）预期目标1、新品种培育。引进印度高辣素辣椒品种魔鬼辣椒、*德宏象鼻涮涮辣为辣椒素基因为基因导入材料，以*辣椒和美国高色素品种铁皮椒为基本材料，培育高辣椒素、辣椒红色素含量辣椒加工型专用新品种2个；2、示范推广。采用育成辣椒新品种示范推广10万亩，其中示范1000亩，单位产量100公斤；3、产品加工。年生产辣
35、椒素600吨、辣椒红色素500吨。（二）考核指标和预期成效1、完成2个新品种培育，辣椒素3%以上，辣椒红色素含量达到15个色价以上，色调0.997以上，种子含量30以下，产量不低于对照*辣椒，单位亩产量目标100公斤以上；2、制定标准化栽培技术，新品种示范推广10万亩，生产高辣椒素、辣椒红色素含量辣椒1万吨；3、辣椒产品考核指标为产品质量符合GB10783-1996标准，溶剂损耗降低到20公斤/吨，生产辣椒素2500吨，辣椒红色素500吨，产值7亿元，税利3亿元。五、项目主要研究开发内容、技术路线和保障措施（一）项目主要研究开发内容通过项目实施，应用基因工程技术培育高辣椒素和高辣椒红色素含量的
36、辣椒新品种，制定标准化栽培技术标准，完善辣椒素和辣椒红色素生产工艺等的辣椒产业化开发关键技术方面，实现技术的集成示范推广，实现辣椒产业化，提高科技进步对辣椒产业的支撑作用，提升我省辣椒产业的整体水平和产品在国内外市场的竞争力，使辣椒产业实现优质高效目标，综合效益显著。1、辣椒素转基因技术研究（1）辣椒中辣椒素合成关键酶（PAL、4CL、HCT、Ca4H、C3H、BCAT、KAS、COMT、ACS和CS）基因的克隆；克隆辣椒果实特异启动子CaPG。（2）分别构建由CaPG控制辣椒素合成关键酶基因的表达的单元，并插入植物双元载体。（3）分别通过电击转化技术将双元载体导入根癌农杆菌LBA4404。（
37、4）通过根癌农杆菌遗传转化方法，分别将以上植物双元载体导入辣椒，分别获得10株以上独立转化植株。（5）对转基因辣椒进行GUS染色、PCR扩增及分子杂交鉴定。（6）转基因辣椒果实中辣椒素含量测定。（7）对转基因辣椒的农艺性状、产量、抗逆性和品质的综合分析。（8）转基因材料的自交繁殖及后代遗传稳定性研究，同时对后代植株进行综合农艺形状和果实中辣椒素含量进行分析测定；最终获得遗传稳定的转基因辣椒株系。2、标准化栽培技术研究（1）开展*省辣椒主产区适应性研究，确定适应的密度、播种期、施肥、病虫害防治等高产栽培技术，稳定和提高辣椒素、辣椒红色素含量栽培措施研究。（2）开展种植环境研究，划定加工专用型辣椒
38、栽培适宜区域。3、辣椒产品生产工艺研究（1）完善三种溶剂同时萃取辣素及辣椒红色素的技术，改进工艺流程，主要研究溶剂的类型和配比、压力、温度等，减少溶剂损耗，降低生产成本。（2）开展辣椒素脱糖、辣椒红色素脱胶等精制技术研究，提高产品质量。（二）技术路线通过专用型辣椒新品种培育、制定标准化栽培技术、生产工艺提高研究实现技术集成，将熟化的研究成果产业化应用，生产优质辣椒素和辣椒红色素产品。（三）保障措施1、建立项目责任制。本项目由某某天然辣素有限公司承担，项目承担单位为项目主持人，对项目负总责，负责项目总体目标和研究内容的制定，组织项目的实施、检查，制定课题合同和制定经费预算，划拨研究经费。2、实行
39、项目课题合同制。*农业科学研究院、*省农业科学院、*县科学技术局、*县农业局为项目参与单位。项目参与单位组织项目课题组与项目主持人签订课题合同，实行合同制管理，参与单位向项目主持人负责，完成课题攻关目标、组织实施课题任务。*市农业科学院生物技术研究所植物基因研究室负责加工专用型辣椒优良新品种培育课题；*省农业科学院负责标准化栽培技术研究课题；*县科学技术局项目组织、检查、协调和初步验收；*县农业局负责新品种试验种植、示范和推广；某某天然辣素有限公司负责辣椒产品生产工艺研究；研究成果的集成示范与应用。3、组织项目专家组。聘请有关专家组成项目专家组，主要帮助项目决策、课题目标任务确定，项目管理指导
40、等问题。4、经费管理。项目经费专款专用，课题合同签订后10天内，拨给合同规定经费的1/3，其2/3的经费与课题考核挂钩，按进度和完成任务情况拨付，完成全部课题目标和任务的全额拨付并对课题完成人给予项目经费10%的奖励。5、目标任务考核。考核组由项目主持人组织，专家组和科技局负责人组成。实行季度定期检查和年终检查，按完成目标任务的进度和工作量确定考核分值，对未能按计划完成课题合同目标任务的，主持单位有权延迟直至停止对该课题的经费拨款，并追究其相应的责任。若因不可抗拒的自然灾害原因造成无法完成合同任务的，由项目课题组提出书面申请并说明情况，须有当地权威机构证明，并报省科技厅申请延期，酌情考虑下一年
41、度的经费拨付。6、项目成果管理。项目研究成果由项目主持人统一组织向有关部门申报，课题完成人为第一人，协作单位按贡献大小排名。项目实施形成的自主知识产权由项目主持人享有60%，其余40%为课题完成单位享有。六、项目进度计划本项目计划5年时间完成。2008年1月2008年12月完成基因导入材料引入和收集，测定辣椒素、辣椒红色素含量。2009年1月2009年12月开展转基因技术研究。2010年1月2010年12月开展试验种植，进行转基因辣椒果实中辣椒素、辣椒红色素不含量测定；在热区进行加代繁殖；完善同时萃取辣素及辣椒红色素的技术。2011年1月2011年12月开展示范种植，对转基因辣椒的农艺性状、产
42、量、抗逆性和品质的综合分析，拟订辣椒高产栽培技术方案；转基因材料的自交繁殖及后代遗传稳定性研究，同时对后代植株进行综合农艺形状和果实中辣椒素含量进行分析测定；继续在热区进行加代繁殖。2012年1月2012年12月开展标准化栽培技术研究；开展辣椒素脱糖、辣椒红色素脱胶等精制技术研究；进行项目总结，申请项目验收。七、项目经费筹措方案（一）经费预算本项目经费预算总额2100万元。其中辣椒基因素材引进100万元，培育高辣椒素、辣椒红色素新品种400万元，试验、示范推广1000万元，产品加工技术研究500万元。（二）资金筹措方案经费筹措2100万元。其中企业自筹700万元，银行贷款800万元，申请*省科
43、学技术厅支持600万元。其中国际合作计划100万元；省院省校合作计划400万元；农村科技创新工程100万元。八、项目经济社会效益分析1经济效益分析（1）种植效益分析本项目新品种和新技术累计示范推广10万亩，产量与对照*辣椒相等，按单位产量100公斤/亩计算，每公斤价格较*辣椒10元/公斤上浮50%，10万亩总产量为100万公斤，总产值为15000万元。由于种植加工专用型辣椒，亩产值较对照*辣椒增值500元，新增产值5000万元，即种植环节农民因科技进步多获取效益5000万元。（2）加工效益分析原材料、动力价格以及消耗指标为辣椒干/吨生产辣椒粉0.6吨，辣椒粉计2.5万元/吨；每吨辣椒粉生产产品
44、消耗指标为溶剂（正己烷）25公斤，酒精25公斤，煤800公斤，水1m3，电600kWH。制造成本中的制造费用主要包括折旧费、修理费、低值易耗品等。固定资产折旧采用平均年限法计算（按10年期限）。经计算项目年折旧费为286.7万元。确定的经计算每生产1吨辣椒素和480公斤辣椒红色素的直接成本为12.92万元；根据以上两项，加上其他成本费用，每生产一吨辣椒素（10%含量）和480kg辣椒红色素（150色价）的成本为16.48万元。本项目的建设规模为年产10%以上辣素含量的辣椒素2500吨和E-150以上的辣椒红色素140吨。根据目前国内及国际市场的情况，扣除20%的风险度以后，初步定为辣椒素为28
45、万元/吨；辣椒红色素的定价为20万元/吨。依此计算，项目达产年的销售收入为72800万元。根据国家有关税收法规规定，本项目应缴销售税金及附加，包括产品增值税、城市维护建设税和教育费附加。增值税税率为17%，城市维护建设税税率5%和教育费附加3%。企业所得税按33%执行，实现税金14315万元，企业达产年净利润17284万元。2社会效益分析本项目的实施具有以下社会效益：（1）促进*的辣椒产业由单纯的种植业向产业化经营和深加工方向发展，延长产业链，提高辣椒产品的科技含量和综合利用率；（2）促进农民增收、增加地方财政收入，解决农民卖椒难的后顾之忧，提高农民种植积极性，项目达产以后每年可以消耗辣椒干1
46、0000吨，给农民带来15000万元的收入，带动4万余户农民脱贫致富。 四 推广应用及产业化分析辣椒素和辣椒红色素是目前走俏国内外市场的产品，运用领域不断扩大，市场前景广阔。但生产上缺乏加工专用型品种，尤其缺乏两素含量都高的品种，成为了影响企业加工效益的一大瓶颈，进而影响到辣椒深加工产业的发展。通过新品种的推广应用和加工工艺的改进提高，将大大降低企业的生产成本，显著提高企业产品在国内外市场上的竞争力，尤其是提高我国辣椒素和辣椒红色素在国际市场上的竞争力。同时还可促使辣椒面积的进一步扩大，为农民增加一条脱贫致富的新途径，使农民增产增收。因此，该项目成果具有很好的推广应用前景。该项目针对我国目前辣
47、椒深加工上存在的主要问题，市场需求和育种工作中的薄弱环节，开展对辣椒深加工生产技术、工艺流程、设备的研究、加工专用型辣椒新品种的引进选育，其研究成果对于解决我省乃至我国辣椒深加工上存在的主要问题具有重要意义，具有很好的市场前景。项目选题新颖，研究目标明确，针对性强，研究方法和技术路线切实可靠；申请者具有长期从事本专业的科研实践经验和主持多个课题的经历，能够主持完成该项目的研究工作；项目组成员组成合理，分工明确；有扎实的前期科研工作基础；项目经费预算合理；项目承担单位具备了进行项目研究所必须的试验条件；如能获得资助，将能按计划完成项目目标。九、科技主管部门审查推荐意见十、附件*德宏象鼻涮涮辣又称
48、涮汤辣，是野生小米辣的一个变种，其果实成锥形，果皮略皱，有“疙瘩”状凸起，未成熟时呈绿色，成熟后变成鲜红色或橙色，以红色最为常见。2006年，德宏潞西“象鼻涮涮辣”干椒送湖南农业大学食品科学院检测，样品辣素含量19.8148?mg/g，二氢辣素含量6.1074mg/g，每单位“象鼻涮涮辣”干椒中含有444.133K，即444.133万“斯科维尔”单位，辣度级别超过10级，定性为“国内、外已报道的辣椒中辣度最高的品种”。2007年下半年，央视2套第1时间新闻、环球时讯等多家电视台及国内诸多强势网站报道：2007年2月吉尼斯评选，产于印度东部的“魔鬼辣椒”被认定为目前最辣的辣椒品种。国际权威机构检测显示：每单位“魔鬼辣椒”中含有超过100万“斯科维尔”辣度单位，达到了辣度的最高级别。它比此前纪录的保持者，美国加州产的红色“沙维纳”灯笼椒还要辣上一倍，而普通的墨西哥青辣椒的辣度只有0.250.8万“斯科维尔”单位，我国著名的海南朝天椒的辣度单位大概在15万“斯科维尔”单位左右，还不到“魔鬼椒”的六分之一。媒体只报道印度“魔鬼椒”辣度超过100万“斯科维尔”单位，即100K，超过10级，未报道准确的辣度检测数据
