研究型组培室的设计规划课件.ppt

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1、一、实验室设计,在建设组培实验室时,首先应选择安静、清洁、远离污染,位于上风口的的场所;然后根据要求的实验室的性质、规模来设计,但实验室设计的基本要求总是科学、高效、经济和实用;此外,组织培养实验室必须能满足三个需要:实验准备、无菌操作、控制培养。同时,我们还要注意组织培养程序,避免某些环节倒排,引起日后工作混乱。,准备室,面积:20m2左右。用途:器皿洗涤、培养基配置、分装、高压灭菌,植物材料的预处理,重蒸馏水的制备以及进行生理、生化因素的分析,试管苗出瓶,清洗及整理工作。要求:明亮、通风。设备:工作台,橱柜,水池,仪器,药品等。【包括洗涤室、灭菌室】,缓冲间,面积:约3-5m2左右。用途:

2、进入无菌室前需在缓冲室里换上经过灭菌的工作服、拖鞋,戴上口罩。设备:1盏紫外灯,1个配电板,石英电力时控器等。,无菌操作室,面积:10-20m2。用途:材料的灭菌接种,无菌材料的继代,丛生菌的增殖或切割,嫩枝扦插生根等,是关键的部分,关系到培养物的污染率、接种工作效率等重要指标。要求:干爽安静、清洁明亮、墙壁光滑平整不易积染灰尘,地面平坦无缝便于清洗和灭菌。门窗要密闭,一般用移动门窗。设备:超净工作台、空调机,医用小平车,操作台、搁架等。,培养室,面积:视培养架多少及培养物数量而定。用途:将接种到培养瓶等器皿中的植物材料进行培养的场所。设备:(1)培养架与灯光。培养架数目多少视生产规模而定,年

3、产4万-10万苗需4-6个培养架;年产10万-20万苗约需810个培养架。每个培养架一般6层,总高度2m,每0.3m为一层,最下一层距离地面0.2m架宽以0.6m为好,架长以40W日光灯的长度来决定,即约1.26m。每层架子安装2盏日光灯。(2)通风设备。在稍高处设置进风气窗,在其对侧近天花板处设置排风窗。(3)边台、空调机、加湿器(除湿器)、各类显微镜、温湿度计。,实验室分布图,二、设备添置,目的:就是即好用,又够用,还能节省成本,在器材、设施的选择上,不要贪大求洋,应该在其是否实用上多下功夫。器材选购原则:应该根据植物组织培养不同阶段的需要,选择不同的器材、设施。只有从降低投入、提高工效、

4、节约劳力等诸方面加以考虑,才能降低培养成本、提高效率。器材分类:通用器具、盛具、计量器械、灭菌器械、接种器械、培养器械等几种类型。在使用这些容器、设备时,必须要了解它们的基本用途,并学会它们的基本用法。例如,不能给容量瓶加热;必须用磨砂玻璃灯罩来熄灭正在燃烧的酒精灯;应该定期更换超净工作如的无菌滤膜等等。详细操作可参考具体设备、容器的使用说明。,【1】通用器械,烧杯:用来盛放、溶解化学药剂等。常用的规格有50ml、100ml、250ml、500ml、1000ml。烘箱:用来烘干器械。恒温水浴锅:用来溶解琼脂等物质。玻璃搅拌棒:用来配制培养基。洗耳球:用来辅助吸取、转移少量液体。冰箱:用来贮存化

5、学药剂、植物材料等。牛角勺:用来转移化学药剂。玻璃漏斗:用来过滤溶液。剪刀:用来修剪外植体或剪切嫩茎。器械架:在无菌操作期间用来放置灭菌的器,烘箱:2000元每台,恒温水浴锅,单价在200至500元上下,洗耳球、牛角勺,洗耳球单价3到10元上下,牛角勺单价10到20元上下,冰箱,美的冰箱,1500元,器械架、烧杯、玻璃棒、剪刀、镊子,单价40元,单价5到15元不等,搪瓷浅盘:用来承载各种器械容器。塑料盆:用于清洗培养容器。铁丝筐:用来盛放灭菌容器等物品。纯水水桶:用来存放去离子水或蒸馏水,常用的规格有10L、20L。塑料桶:用来存放洗涤溶液、废弃溶液。各种规格的磨砂玻璃瓶:用来盛放培养母液,以

6、及各种植物生长物质。,各种盛具,搪瓷盆、塑料盆、桶,单价5-20元上下,磨砂玻璃瓶、培养皿,单价2-10元,纯水水桶,单价15元,单价100元,计量器械,量筒:用来量取一定体积的液体。常用的规格有25ml、50ml、100ml、500ml、1000ml。容量瓶:用来配制标准溶液。常用的规格有50ml、100ml、500ml、1000ml。大肚移液管:用来吸取定量溶液。常用的规格有1ml、5ml、10ml。刻度移液管:用来吸取定量植物生长物质溶液。常用的规格有1ml、5ml、10ml。移液管架:用来放置、固定移液管。酸度计:用来检测培养基的pH。药物天平:用来称取配制培养基的药品。分析天平:用来

7、称取少量有化学试剂,进行化学分析。,量筒、容量瓶,价格2-15元,大肚移液管、刻度移液管、移液管架,价格5-15元,酸度计、药物天平、分析天平,价格:1500元,价格:165元,价格:1880元,价格:320元,价格:80元,灭菌器械,磨砂口玻璃瓶:用来对植物材料进行表面灭菌。酒精灯:用来进行接种器材的表面灭菌。细菌过滤器:用来过滤不能进行高温灭菌的试剂溶液。无菌滤纸:用来汲取器材、植物材料表面的水分。无菌脱脂棉:用来进行器械、植物材料表面的灭菌处理。真空泵:用来吸滤灭菌。高压灭菌锅:对培养基、接种器材进行灭菌处理。可调试电炉:用来加热高压灭菌锅。皮下注射器:用来对溶液进行过滤、除菌。紫外线灭

8、菌灯:用来对接种室、培养室、操作室等工作环境进行灭菌处理。,细菌过滤器,价格5-10元,无菌滤纸、无菌脱脂棉,价格:5-15元,价格:10-30元,真空泵、高压灭菌锅,价格:73元,价格:27元,价格:730元,紫外线灭菌灯、皮下注射器,价格:90元,价格:60元,接种器械,超净工作台:用来过滤通过接种工作台面的空气,以便进行无菌操作。小型喷雾器:装载灭菌药液,来给超净工作台等处喷雾灭菌。钝头镊子:在接种操作、继代培养时移取植物材料。尖头镊子:用来分离植物材料。解剖刀:用来切割植物材料。打孔器:用来切取大小一致的圆柱形植物材料。双目显微镜:在解剖较小的外植体时,用来观测材料。细菌滤膜:用来进行

9、溶液的常温除菌。接种针:用来转移细胞团、愈伤组织。,超净工作台,价格:4100元,小型喷雾器、双目显微镜,单价:20元,价格:1050元,钝头镊子、尖头镊子、解剖刀,价格:13块,价格:20-30元,接种针,价格:5、6元每只,培养器械,试管:用来作为外植体的培养容器。常用的规格有2cm15cm、3cm15cm。培养皿:用来作为外植体的培养容器。常用的规格有直径9cm、12cm。锥形瓶:即三角烧瓶,主要作为培养器材,常用的规格有50ml、00ml。显微镜:用来观察植物材料。成套载玻片:用来制作植物材料显微制片。铝箔:用于培养容器封口。橡皮筋:用来束紧培养容器的封口材料。血球计数器:用来进行植物

10、细胞计数。空调:用来调节操作间、培养室的温度。摇床:用来进行细胞悬浮培养,试管、锥形瓶、成套载玻片,价格:20元,单价:0.5元,价格:10元,价格:25元,显微镜、血球计数器,价格:180元每台,价格:130元,摇床,价格:15000元,价格:13000元,铝箔,价格:2000元,价格:10元,三、药品添置,在植物组织培养中,所使用的化学药剂通常为化学试剂,根据它们的纯度化学试剂可以分为优级纯(GR.)、分析纯(AR.)、化学纯(CP.)等规格。在研究型的组织培养中,我们一般可以采用分析纯或优极纯的药剂。以MS培养基为例,其使用的常用化学药剂如下:,(1)硝酸铵:亦称硝铵。化学式为NH4NO

11、3,式量为80.048,其纯品为无色透明菱形结晶,比重1.73,易溶于水,并吸收大量的热,在空气中容易潮解。水溶液呈中性反应。由于硝酸铵是一种易燃、易爆物,因此在使用中应该贮存在阴冷之处。已经结块的硝酸铵切忌敲打、撞击,可用水进行溶解。(2)硝酸钾:亦称火硝。化学式为KNO3,式量为101.104,其纯品为无色透明的棱柱结晶,比重2.10,易溶于水,几乎不溶于无水乙醇。(3)氯化钙:亦称无水氯化钙。化学式为CaCl2,式量为110.99,其纯品为白色结晶,比重2.15,在空气中具强吸湿性,易溶于水同时放出大量的热。(4)硫酸镁:亦称泻盐。化学式为MgSO47H2O,式量为246.50,其纯品为

12、透明菱形结晶,比重1.68,具苦味,易溶于水,不溶于乙醇,在空气中稍风化。(5)磷酸二氢钾:亦称磷酸钾复合肥。化学式为KH2PO4,式量为136.09,其纯品为正方形无色结晶,比重2.33,有较强的酸味,易溶于水,不溶于乙醇。溶液呈微酸性反应。磷酸二氢钾在96时会溶化成透明的液体,这样就会转化为偏磷酸钾,因此在使用时注意不要使它经受高温环境。,(6)碘化钾:化学式为KI,式量为166.02,其纯品为透明的小块结晶,比重3.115,在干燥的空气中稳定,易溶于水,其水溶液在遇光后因析出游离碘而逐渐变黄。(7)硼酸:亦称正硼酸。化学式为H3BO3,式量为61.84,其纯品为六角形白色鳞片状结晶,具珠

13、光,比重1.46,溶于水,易溶于乙醇,当加热至107时会失去部分的水,而转变为偏硼酸。水溶液呈酸性反应。(8)硫酸锰:化学式为MnSO45H2O,式量为241.07,其纯品为红色结晶,比重2.1,具金属味,易溶于水,不溶于乙醇。在制备过程中,如果溶液在-46间结晶时,可制成七水硫酸锰(MnSO47H2O);在2040间时,可获得四水硫酸锰(MnSO47H2O);在280时加热,带有结晶水的硫酸锰直至恒重,则可获得无水硫酸锰(MnSO4)。(9)硫酸锌:亦称锌矾。化学式为ZnSO47H2O,式量为287.55,其纯品为无色菱形结晶,比重1.96,在干燥的空气中会风化,易溶于水,当39时溶于所含结

14、晶水,并转变为ZnSO46H2O。(10)钼酸钠:化学式为Na2MoO4,式量为241.98,其纯品为无色结晶,溶于水。,(11)硫酸铜:亦称胆矾。化学式为CuSO45H2O,式量为249.71,其纯品为深蓝色结晶,比重2.29,具强烈的金属味,易溶于水,在干燥的空气中容易风化,而变成白色粉末,即无水硫酸铜。水溶液呈弱酸性反应。(12)氯化钴:亦称氯化亚钴。化学式为CoCl26H2O,式量为372.26,其纯品为红色单斜结晶,比重1.84,在室温下稳定,极易溶于水,可溶于乙醇。在4552时加热,会逐渐变为CoCl24H2O。(13)乙二胺四乙酸二钠:化学式为Na2EDTA2H2O,式量为372

15、.26,其纯品为白色结晶状粉末,无味、无毒、可溶于水,容易和金属离子形成络合物。(14)硫酸亚铁:亦称黑矾、铁矾。化学式为FeSO47H2O,式量为278.02,其纯品为淡绿色结晶,比重1.89,易溶于水,不溶于乙醇,在干燥空气中风化而变为白色粉末。(15)甘氨酸:亦称氨基醋酸、氨基乙酸。化学式为C2H5NO2,式量为75.07。纯品为白色结晶性粉末。味甜,能溶于水,微溶于醇,几乎不溶于醚。233开始分解。密封闭光保存。,(16)肌醇:亦称环已六醇。化学式为C6H12O6,式量为180.16。为构建细胞壁的材料。它在离子平衡、磷脂代谢、碳水化合物合成等过程中起着重要的作用。(17)烟酸:亦称维

16、生素B5。化学式为C6H5NO2,式量为123.11。纯品为无色针状结晶。无气味,在空气中稳定,能溶于水、乙醇、不溶于醚、酯类溶剂。熔点236。密封闭光保存。(18)盐酸吡哆醇:亦称维生素B6、盐酸吡哆素。化学式为C8H12ClNO3,式量为205.64。纯品为白色结晶。无气味,在空气中稳定,能溶于水、乙醇,不溶于酸。205212分解。密封闭光保存。(19)盐酸硫胺素:亦称维生素B1。化学式为C12H17ClN4OSHCl,式量为337.28。纯品为白色结晶。在空气中稳定,能溶于水、乙醇,不溶于酸。密封闭光保存。(20)6-苄基腺嘌呤:缩写为BA,亦称6-BA、普鲁马林。是一种植物生长调节剂,

17、化学式为C12H11N5,式量为225.26。纯品为白色结晶,熔点235,难溶于水,易溶于丙酮、乙醇等有机溶剂,在酸性介质中较为稳定。其主要的生理作用为能够促进蛋白质的合成,诱导芽分化,延缓叶衰老,促进细胞分裂。,(21)萘乙酸:缩写为NAA,亦称-萘乙酸、生长素、1-萘乙酸。是一种植物生长调节剂,化学式为C12H10O2,式量为186.20。纯品为白色针状结晶,熔点133135,沸点285(分解)。在冷水中微溶,在热水中易溶,易溶于冰醋酸、丙酮、乙醚等有机溶剂中。在空气潮解,见光会变色。它有和两种类型,通常所说的萘乙酸指的是型。其主要生理作用为能够诱导根分化,防止器官脱落,诱导无籽果实,促使

18、种子萌发等。(22)腺嘌呤:缩写为AD,化学式为C5H5N53H2O,式量为189.13。纯品为白色结晶性粉末。在空气中稳定,微溶于水。它是合成细胞分裂素的前体,主要的生理功能为促进细胞分裂。(23)赤霉酸:缩写为CA3,亦称激动素,滥长素、九二零等。是一种植物激素,纯品为八面体双锥形白色结晶,熔点233-235(分解),难熔于水,其钾盐、钠盐易溶于水,易熔于丙酮、甲醇、乙醇。赤霉素的化学性质比较稳定,但应该在低温环境下进行贮藏,其水溶液不稳定。其主要的生理作用为促进细胞的伸长,防止离层形成,能够解除休眠。(24)蔗糖:化学式为C12H22O11,式量为342.30。纯品为无色单斜型结晶、白色

19、颗粒或晶体粉未。味甜,在空气中稳定,易溶于水,能溶于乙醇,可被稀酸水解为果糖、葡萄糖。在160-180间分解。密封保存。(25)琼脂:亦称洋菜。是从石花菜等海藻中所提取的白色粘胶状物质,在热水中能溶解,其溶液遇冷凝固,可用于配制培养基,作为外植体的支撑物。(26)肌醇:化学式为C6H12O6,式时为180.16。纯品为白色结晶粉末,有甜味,在空气中不潮解。溶于水,微溶于醇,熔点225-227。密封保存。,药品价格表,预算,培养基配置室:5000元洗涤室:200元灭菌室:4000元缓冲室:400元接种室:14700元培养室:17500元其他:5000元总计:46800元,精品课件!,精品课件!,谢谢观赏,Thank you!,

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