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1、第二章 抗原抗体反应,第三临床医学院临床检验教研室王飞 副主任医师,副教授,第一节 抗原抗体反应的原理一、抗原抗体结合力二、抗原抗体的亲和性和亲和力三、亲水胶体转化为疏水胶体,第二节 抗原抗体反应的特点 一、特异性 二、可逆性 三、比例性 四、阶段性,第三节 影响抗原抗体反应的因素 一、反应物自身因素 二、环境因素,第四节 免疫学检测技术的类型,思考题小结,一、教学目的：1、掌握抗原抗体反应的原理、特点和影响因素。2、熟悉抗原抗体反应的类型。3、了解免疫学检测技术的类型。,抗原,指能刺激机体免疫系统，并能与相应免疫应答产物（抗体或致敏淋巴细胞）在体内或体外发生特异性结合的物质。,抗原的两个重要
2、特性,免疫原性 抗原能刺激机体产生免疫应答，诱生抗体或致敏淋巴细胞的能 力。抗原性（免疫反应性）抗原可在体内外与其所诱生的抗体或或致敏淋巴 细胞发生特异性结合的能力。,按抗原的性能分类,完全抗原：具有免疫原性和抗原性的物质。不完全抗原（半抗原）：只有抗原性而无免疫原性的物质。半抗原多为简单的小分子物质，当与大分子蛋白质载体结合后才具有免疫原性。,抗原的特异性,免疫原性的特异性：某种抗原只能刺激机体产生某种特定的应答产物（抗体或致敏淋巴细胞)如：伤寒杆菌伤寒杆菌抗体抗原性的特异性：抗原只能与其相应的抗体或致敏淋巴细胞结合如：伤寒杆菌只能与伤寒杆菌抗体结合,抗原决定簇,是指抗原分子中决定抗原特异性
3、的特殊化学集团，又称表位。抗原决定簇与相应淋巴细胞表面的抗原受体结合，诱导免疫应答。,共同抗原表位与交叉反应,抗原的特异性是相对的，因为天然的抗原分子表面可存在着多种表位，不同的抗原分子表面可存在相同或相似的表位，可引起交叉反应。1）共同抗原表位：不同抗原之间含有的相同或相似的抗原表位 2）交叉反应：抗体或致敏淋巴细胞对具有相同或相似表位的不同抗原的反应,交叉反应,血 清：Ab1、Ab2+AgA 特异性反应+AgB 交叉反应 意义 与疾病发生有关：如急性肾小球肾炎 用于疾病诊断：如外斐反应 引起生物学假阳性：如肥达反应,与疾病发生有关：如急性肾小球肾炎A组溶血性链球菌某些型别的胞壁抗原和胞浆抗
4、原与人肾基底膜和心瓣膜成分相同用于疾病诊断：如外斐反应用普通变形杆菌的某些OX菌株抗原代替立克次体抗原引起生物学假阳性：如肥达反应伤寒沙门菌抗O增高，抗H不高,免疫球蛋白,是B细胞识别抗原后活化增殖分化为浆细胞所产生的一种蛋白质，主要存在于血清等体液中，约占血浆蛋白总量的20%。,抗体,是B细胞识别抗原后活化增殖分化为浆细胞所产生的一类能与相应抗原特异性结合的球蛋白。,抗体是免疫球蛋白，而免疫球蛋白并非都具有抗体的活性。,免疫球蛋白的基本结构,(一)重链(heavy chain，H）2条 轻链（light chain，L）2条(二)可变区（variable region,V区）恒定区（cons
5、tant region,C区）(三)超变区（hyper-variable region,HVR）,又称互补决定区(complementary determining region,CDR)骨架区（framework region,FR）(四)铰链区（hinge region）,链：Ig分五类即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE，它们的链分别由链，链，链，链，链。链 经二硫键连接在链的氨基端。可将链分为链和链,（一）重链和轻链,（二）可变区和恒定区,可变区：在Ig多肽链端链的1/2与链的1/4或1/5区域内，氨基酸的种类，排列顺序与构型变化很大，故称该区为可变区恒定区：在Ig多肽链羧基端（端
6、）链的1/2与链的/4或/5区域内，氨基酸的种类，排列顺序与构型相对恒定，故称该区位恒定区,（三）超变区 HVR,VH和VL的三个高变区共同组成Ig与抗原结合的部位，该部位形成一个与表位互补的表面，称为互补性决定区。不同的抗体其CDR序列不相同，并因此决定抗体的特异性。,（三）绞链区,在Ig，Ig的CH1与CH2之间的区域称为绞链区。此区域含有大量脯氨酸，富有弹性及伸展性，能使抗体分子与不同距离的抗原决定簇结合，也利于暴露Ig分子上的补体C1q结合点而激活补体。,第一节 抗原抗体反应的原理,抗原抗体反应:指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。物质基础:抗原表位与抗体高变区间的互补结合 抗
7、原表位与抗体高变区的沟槽分子表面的结合 抗原抗体之间的结合力 亲水胶体转化为疏水胶体,静电引力（electrostatic forces）范德华引力:作用最小（van der Waals interactions）氢键:最具特异性（hydrogen bond）疏水作用力:作用最大（hydrophobic interactions）,抗原抗体结合力示意图,一、抗原抗体结合力,抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间相适应而结合的强度，是抗原抗体间固有的结合力,亲和性(affinity),抗原抗体亲和力示意图,二、抗原抗体的亲和力和亲合力,一个抗体分子与整个抗原表位之间结合的强度，与抗体结合
8、价直接相关。即多价优势。,亲合力(avidity),抗原抗体亲合力示意图,可见反应,抗原抗体复合物(疏水胶体),电解质,抗原(亲水胶体),抗体(亲水胶体),+,三、亲水胶体转化为疏水胶体,第二节 抗原抗体反应的特点,特异性 可逆性比例性 阶段性,特异性：抗原与抗体结合反应的专一性,抗原抗体反应特异性示意图,分子基础:抗原表位与抗体分子高变区之间空间构型的互补性,一、特异性,两种不同的抗原分子具有部分相同或类似结构的抗原表位，可与彼此相应的抗血清发生反应,交叉反应（cross reactions）,抗原抗体交叉反应示意图,二、可逆性,可逆性：抗原与相应抗体结合成复合物后，在一定条件下又可解离为游
9、离抗原与抗体的特性,影响因素：抗体对相应抗原的亲合力亲合力越高，结合越牢固，越不易解离 环境因素对复合物的影响pH、离子强度,三、比例性,比例性：以沉淀反应为例，若在加入固定量抗体的一组试管中在依次加入递增浓度的相应可溶性抗原，根据所形成的沉淀及抗原抗体的比例关系可绘制出反应曲线。,前带(prezone)：抗体过量后带(postzone)：抗原过量等价带(equivalence zone)：抗原抗体比例合适,比例性：抗原与抗体发生可见反应需遵循一定的量比关系,三、比例性,第一阶段：特异性结合阶段，反应快，不可见 第二阶段：反应可见阶段，反应慢，出现凝集、沉淀和细胞溶解等现象,四、阶段性,第三节
10、 影响抗原抗体反应的因素,抗原、抗体反应物的自身因素环境因素,一、反应物自身因素,抗原:理化性状、表位种类和数目抗体:来源、特异性、亲和性、效价,电解质:生理盐水或缓冲液酸碱度:pH6pH9温 度:1540，37最适,二、环境因素,第四节 免疫学检测技术的类型,小结,抗原抗体反应是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。抗原抗体之间的结合力涉及静电引力、范德华引力、氢键和疏水作用力。抗原抗体反应的特点是特异性、可逆性、比例性和阶段性。影响抗原抗体反应的因素包括反应物的自身因素和环境因素。免疫学检测技术的基础是抗原抗体反应，免疫学技术有凝集反应、沉淀反应、补体参与的反应、中和反应和标记免疫反应五种类型。,1什么是抗原抗体反应？抗原抗体反应的原理是什么？2抗原抗体的结合力有哪些？3抗原抗体反应有哪些特点？4如何理解抗原抗体反应的特异性和交叉反应？5什么是抗原抗体反应的可逆性？有何应用？6如何理解抗原抗体反应的亲和力和亲合力？7抗原抗体反应体系中为何要确定抗原、抗体的最适比例？8抗原抗体反应有哪些影响因素？9基于抗原抗体反应的免疫学检测技术有哪些？10什么是标记免疫技术？标记免疫技术有哪些类型？,思考题,
