SOPXT1800i.doc

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1、XT1800i血液分析仪1 【检验方法】XT-1800i的操作分析基于电阻抗检测方法(流体动力学聚焦方法),采用半导体激光器的流式细胞术方法和SLS血红蛋白检测法。2 【原理】流式细胞术与半导体激光当吸入一定量的样本并经过定量的试剂或稀释剂稀释后,全血被注入圆锥型的Flow Cell,并被鞘液包围,这种液体流动血液细胞的方式也叫流式细胞术,有助于细胞计数的精确性和重复性。因为细胞成单行穿过 鞘液Flow Cell的中央,有效地避免了异常的细胞所产生的信号。 Flow Cell 鞘液注射口图10-1 :Flow Cell血液样品被吸取、测量、稀释至一定比率并被染色。然后,样品被送入流式细胞。鞘流

2、机制促进了细胞计数的准确性和重复性。由于血细胞颗粒以直线形式穿过流式细胞中心,阻止了异常血压的产生,减少了流式细胞的污染。半导体激光束穿过流式细胞照到血细胞。Photodiode接受到前散射光,photo multiplier试管接受后散射光和荧光。光转换为电脉冲,可获得血细胞信息。2.1 直流电阻检测法当吸入一定量的样本并经过特定量的试剂或稀释剂稀释后,全血被送入RBC/PLT检测部。在检测部里有一个小小的叫孔的开口。在孔的每一边有通过直流电的电极。当血细胞在稀释液中流动缓慢地经过孔时,电极间的直流电阻发生改变。电阻的改变将引起电脉冲依照细胞大小相应的比例改变。对这些电脉冲大小的数据收集,可

3、以绘制出反映细胞大小的描点曲线图表。从中便可以得出各种类型的分析数据。直流电直流电电源检测部外部电极电阻 电解质溶液 小孔 内部电极图10-3:直流电阻检测系统2.2 SLS-血色素SLS-血红蛋白方法取cyanmethemoglobin和oxyhemoglobin两种方法的优点。结合cyanmethemoglobin方法,SLS-血红蛋白方法的血红蛋白转变速度快,不使用有毒物质,是一种适合自动化的方法。由于它可以检测cyanmethemoglobin,因此也可以检测血液包括甲基血红蛋白,例如质控血。在SLS-血红蛋白方法中,表面活性物质溶解红细胞膜并释放血红蛋白。Hydrophilic al

4、kyl group of Sodium Lauryl Sulfate改变血红蛋白分子的蛋白组。3 试剂:试剂系统包含:31 CELLPACK使用目的 血液分析仪中使用的稀释液。打开后贮存和保存限期在5-30条件下保存CELLPACK。打开后,CELLPACK可使用到容器上所示的失效期。一旦打开(连接到仪器上),产品保存期最多为60天。方法学 CELLPACK是一种适用于电阻抗和光学法分析全血的稀释液。32 STROMATOLYSER-FB使用目的 血液分析仪中使用的稀释液。打开后贮存和保存限期在+30条件下保存STROMATOLYSER-FB。打开后,STROMATOLYSER-FB可使用到容

5、器上所示的失效期。一旦打开(连接到仪器上),产品保存期最多为60天。方法学STROMATOLYSER-FB是一种适用于电阻抗和光学法分析白细胞和碱性粒细胞的溶解液。33 STROMATOLYSER-4DL使用目的血液分析仪中使用的稀释液。打开后贮存和保存限期在2-35条件下保存STROMATOLYSER-4DL。打开后,STROMATOLYSER-4DL可使用到容器上所示的失效期。一旦打开(连接到仪器上),产品保存期最多为60天。当STROMATOLYSER-4DL受污染或不稳定,如浑浊或颜色改变,应更换。方法学STROMATOLYSER-4DL是一种适用于电阻抗和光学法分析全血的稀释液。34

6、 STROMATOLYSER-4DS使用目的STROMATOLYSER-4DS是对经稀释和溶血样品中白细胞进行染色,用Sysmex自动血液分析仪进行四分类计数。打开后贮存和保存限期在2-35条件下保存STROMATOLYSER-4DS。打开后,STROMATOLYSER-4DS可使用到容器上所示的失效期。一旦打开(连接到仪器上),产品保存期最多为60天。当STROMATOLYSER-4DL受污染或不稳定,如浑浊或颜色改变,应更换。方法学分析仪自动进行以下步骤。用Sysmex特殊溶血剂STROMATOLYSERDL进行自动稀释(1:50)、溶血。然后,加入STROMATOLYSER-4DS,在常

7、温下放置一段时间,使细胞核染上颜色。经染色的样品进入鞘流检测器,测量侧向散射光和侧向荧光,计算出中性粒细胞数(NEUT#),淋巴细胞数(LYMPH#),单核细胞数(MONO#),嗜酸性粒细胞数(EO#),中性粒细胞百分率(NEUT%),淋巴细胞百分率(LYMPH%),单核细胞百分率(MONO%)和嗜酸性粒细胞百分率(EO%)。35 SULFOLYSER使用目的 SULFOLYSER是一种自动测定血红蛋白量的试剂,可在除CC-700,CC-720,CC-780,CC-800和半自动仪器外的所有Sysmex自动血液分析仪上使用。打开后贮存和保存限期 在1-30条件下保存SULFOLYSER。打开后

8、,SULFOLYSER可使用到容器上所示的失效期。一旦打开(连接到仪器上),产品保存期最多为60天。当SULFOLYSER受污染或不稳定,如浑浊或颜色改变,应更换。方法学SULFOLYSER是一种用光学法分析全血的稀释液。36 RET SEARCH()(稀释液)RET SEARCH()(染色液)使用目的RET-SEARCH()试剂在稀释样品同时,对网织红细胞进行染色,用于Sysmex自动血液分析仪进行网织红细胞计数和网织红细胞百分率。RET SEARCH()是一套试剂,包括RET SEARCH()稀释液缓冲液和RET SEARCH()染色液试剂。这两个试剂用于XT-2000i。因此,4.6仅适

9、用于XT-2000i。打开后贮存和保存限期在2-35条件下保存RET-SEARCH()。勿使用经冷藏的试剂。打开后,SULFOLYSER可使用到容器上所示的失效期。一旦打开(连接到仪器上),产品保存期最多为60天。当RET-SEARCH()受污染或不稳定,如浑浊或颜色改变,应更换。方法学RET-SEARCH()是一种用阻抗法和光学法分析全血的染色液。37 CELLCLEAN使用目的去除残留在Sysmex自动血液分析仪流体动力系统的溶血剂、细胞残余物和血液蛋白质的强碱性试剂。警告与预防措施1 防止皮肤和眼睛接触试剂。2 一旦碰到皮肤,用水清洗。3 一旦碰到眼睛,立即用水冲洗,并立即就医。4 如果

10、误食,采取催吐措施,并立即就医。开瓶后的贮存和保存限期将CELLCLEAN试剂保存在阴暗地方,温度为15-30,避免阳光直射,否则氯成分随暴露时间增加会丢失。一旦打开,产品保存期最多为60天。方法学CELLCLEAN试剂用来清洁仪器,去除来自于流体动力系统、转换器、样品旋转阀、全血吸引管和HGB流动室残余的溶血剂、细胞残余物和血浆蛋白质。 3 操作步骤:检查当天检测样品所需的试剂量。如果不够,应更换试剂。在检测过程中若试剂用完,系统将自动停止工作,并提醒操作者更换试剂。更换后才能再次启动。按以下步骤打开电源:打印机IPU主机(IPU程序启动屏显示后)。注:气动装置的电源受主机控制。因此,无需打

11、开气动装置的电源。3.1 IPU身份确认1 打开IPU电源。启动Windows 2000系统,自动确认身份。2 启动XT-2000i程序(XT-1800i程序),显示启动对话框。3 输入用户名和密码,单击OK键,将按照您的用户名和密码启动系统,确认后就可进行操作。单击Exit键,取消操作并退出程序。自我检测打开主机电源后操作顺序为:自我检测,下载主机控制程序,启动机械和流体动力学部件,清洗,等待温度稳定,背景检查。如在流程中发现错误信息, 等待温度稳定温度监控对话框中显示了反应池和试剂加热器的温度。系统等待至目标温度。温度稳定至预期温度后,对话框自动关闭。背景检查WBC0.1103/LDIFF

12、-WBC0.2103/LRBC0.02106/LHGB0.1g/dLPLT5.0103/LPLT-O10 103/L温度稳定后进行背景检查(最多3次)。如果背景值低于或等于左表显示值,检查结束。如果高于左表显示值,屏幕将显示“BACKGROUND ERROR”,并弹出空白检查对话框。异常值以红色表示。如果背景值高于可接受值,单击空白检查对话框中Auto Rinse键,仪器会关闭对话框,并开始自动清洗。4 质量控制分析 质控数据保存在特定的质控文件中。进行质控前,XT-2000i/ XT-1800i有两种质控方法。根据你的实验室规则选择质控方法。 质控连续两次进行分析(重复测定),将其平均值与期

13、望范围进行比较。L-J质控 只进行一次血液分析(独立检测),将数值与期望范围进行比较。4. 1. QC分析:手动模式按以下步骤进行手动模式的QC分析。1 检查主机上的READY LED是否亮着。如果不亮,可能发生错误。2 单击菜单屏上Controller键,显示质控菜单。3 双击质控菜单上QC Analysis键。弹出QC文件选择对话框。要注册QC文件, 4 在选择QC文件对话框中列出了已注册的QC文件,并按照QC文件序号排列。5 选择QC文件,单击OK键或Cancel键。OK确认所选QC文件,关闭选择QC文件对话框。弹出QC分析对话框。Cancel取消所选QC文件,关闭选择QC文件对话框。4

14、2. QC分析;进样器模式如果使用质控品或者样品试管上已贴有QC文件的条形码,可采用进样器模式进行L-J质控。按照下列步骤进行进样器模式的质控分析。1 检查质控品量。需要样品量1.0mL或更多吸引样品量约150L43. QC分析:手动封闭模式如果使用质控品,可以采用封闭模式进行质控分析。按下列步骤进行封闭模式的QC分析。1 检查主机上的READY LED是否亮着。如果不亮,可能发生错误。2 单击菜单屏上Controller键,显示质控菜单。3 双击质控菜单上QC Analysis键。弹出QC文件选择对话框。4 在选择QC文件对话框中列出了已注册的QC文件,并按照QC文件序号排列。5 选择QC文

15、件,单击OK键或Cancel键。OK确认所选QC文件,关闭选择QC文件对话框。弹出QC分析对话框。Cancel取消所选QC文件,关闭选择QC文件对话框。5 检测项目XT-1800i提供了以下几项参数的结果:WBC白细胞计数RBC红细胞计数HGB血红蛋白量HCT红细胞比积MCV平均红细胞体积MCH平均红细胞血红蛋白量MCHC平均红细胞血红蛋白浓度PLT血小板计数NEUT%中性粒细胞百分率LYMPH%淋巴细胞百分率MONO%单核细胞百分率EO%嗜酸性粒细胞百分率BASO%嗜碱性粒细胞百分率NEUT#中性粒细胞数LYMPH#淋巴细胞数MONO#单核细胞数EO#嗜酸性粒细胞数BASO#嗜碱性粒细胞数R

16、DW-SD红细胞分布宽度标准差RDW-CV红细胞分布宽度变异系数PDW血小板分布宽度MPV平均血小板体积P-LCR大血小板比率PCT血小板比积6 参考区间(正常人群参考范围)是XT-2000i和XT-1800i用正常个体得出的。每一个参数的范围用95%可信区间计算而得。参数女性范围n=133男性范围n=182WBC3.98-10.044.23-9.07Neut%34.0-71.134.0-67.9Lymph%19.3-51.721.8-53.1Mono%4.7-12.55.3-12.2Eo%0.7-5.80.8-7.0Baso%0.1-1.20.2-1.2Neut#1.56-6.131.78-

17、5.38Lymph#1.18-3.741.32-3.57Mono#0.24-0.360.30-0.82Eo#0.04-0.360.04-0.54Baso#0.01-0.080.01-0.08RBC3.93-5.224.63-6.08HGB11.2-15.713.7-17.5HCT34.1-44.940.1-51.0MCV79.4-94.879.0-92.2MCH25.6-32.225.7-32.2MCHC32.2-35.532.3-36.5RDW-CV11.7-14.411.6-14.4RDW-SD36.4-46.335.1-43.9RET%(XT-2000i)0.5-1.70.51-1.81

18、RET#(XT-2000i)1.64-7.762.6-9.5IRF(XT-2000i)3.0-15.92.3-13.4PLT182-369163-337MPV9.4-12.39.4-12.4*女性的年龄范围为21-41岁,平均年龄为24.5岁。七、临床意义:1白细胞(1) 白细胞计数生理性增加 新生儿、运动、饭后、冷水浴后、疼痛、月经期、受寒、妊娠、分娩、阵发性心动过速、阳光或紫外光照射、抽搐、恶心、呕吐、麻醉等。病理性增加 类白血病、白血病、急性化脓性细菌感染、急性溶血、急性失血、单核细胞增多症、淋巴细胞增多症、真性红细胞增多症、腮腺炎、病毒性肝炎、淋巴瘤、组织坏死、手术后、肿瘤转移、药物中

19、毒、代谢性酸中毒、过敏等。减少 伤寒、副伤寒、斑疹伤寒、兔热病、布鲁杆菌热、流感、麻疹、风疹、革登热、传染性肝炎(亦可增多)、疟疾、过敏性休克、系统性红斑狼疮、粟粒性结核、败学症、重症细菌感染、恶液质、放射治疗、肿瘤化疗。恶性贫血、非白细胞性贫血、再生障碍性贫血、脾功能亢进、戈谢病、Felty综合症、Chediak-Higashi综合症、阵发性睡眠性血红蛋白尿症等。(2) 白细胞分类计数:见下表各种白细胞增多、减少的临床意义细胞类别 增多 减少中性粒细胞 类白血病、白血病、化脓性细胞感染、 伤寒、副伤寒、流感、麻疹、再溶血性贫血、急性出血、急性溶血、手 生障碍性贫血、黑热病、病毒感术后、恶性肿

20、瘤、组织损伤、皮肤病、 染、原虫感染、病毒性肝炎、脾 真性红细胞增多症、脾切除术后。 功能亢进、贫血、原发性中性粒 细胞减少症、肝硬化嗜酸性粒细胞 参见嗜酸性粒细胞计数嗜碱性粒细胞 慢粒、何杰金病、癌转移、铅和铋中毒等。淋巴细胞 百日咳、传染性单核细胞增多 急性感染、粟粒性结核、晚期肿瘤、 症、淋巴细胞性白血病、传染 艾滋病、伴T淋巴细胞减少的免性淋巴细胞增多症、病毒性 缺陷 肝炎、弓形虫病单核细胞 单核细胞性白血病、系统性红斑狼疮、 使用皮质类固醇激素、再生障碍性亚急性细菌性心内膜炎、活动性结核、 贫血、多毛细胞白血病. 急性感染恢复期、原虫感染 2 红细胞(RBC):生理性减少 见于妊娠中

21、后期、6个月至2岁的婴儿等。病理性减少 造血原料不足、造血功能障碍、红细胞破坏过多或失血所引起的各种贫血。相对性增多 主要因血浆容量减少所致,见于脱水、呕吐、腹泻、多尿、多汗、大面积烧伤、吸烟、高血压、肥胖等。代偿性增多 主要见于缺氧、新生儿、高原环境、CO中毒、严重肺气肿、肺源性心脏病、先天性心脏病、心衰等。绝对性增多 克隆性真性红细胞增多;非隆性红细胞增多,与促红细胞生成素产生过多有关,见于肾癌、肝细胞癌、雄激素分泌细胞肿瘤、肾囊肿、肾盂积水、肾移植、小脑血管瘤、子宫肌瘤。3、血红蛋白(HGB):生理性增加:新生儿、高原居住者。病理性增加:真性红细胞增多症、代偿性红细胞增多症(如先天性青紫

22、性心脏病、慢性肺性疾病、脱水)。减少:各种贫血、白血病、产后、手术后、大量失血。3 红细胞比积(HCT) :与红细胞计数、血红蛋白测定的意义类同。4 血小板(PLT):(1) 生理性 正常人血小板在一天内可有6%-10%变化;表现为早晨低,午后较高;春季低,冬季略高;平原较低,高原较高;静脉血比毛细血管血高10%;月经前低,后升高;妊娠中晚期升高,分娩后减低;运动后升高,休息后恢复。(2) 病理性 减少:除创伤之外,血小板减少是引起出血的常见原因。常见疾病有:、血小板生成障碍,如急性白血病、再生障碍性贫血;、血小板破坏过多,如ITP、脾功能亢进,系统性红斑狼疮;、血小板消耗过多,如DIC、血栓

23、性血小板减少性紫癜。增多(血小板大于400109/L):、骨髓增生性疾病:慢性粒细胞白血病,真性红细胞增多症;、原发性血小板增多症;、急性大出血,急性溶血,急性化脓性感染;、脾切除手术后。6MCV、MCH、MCHC 主要用于贫血的形态学分类,见下表 贫血的形态学分类 MCV(fL) MCH(pg) MCHC(g/L) 大红细胞性贫血 100-160 35-50 310-370 正红细胞性贫血 80-100 27-35 310-370 单纯小细胞性贫血 72-80 21-26 300-370 小细胞低色素性贫血 50-80 12-30 240-300 7RDW-CV、RDW-SD:(1)用于缺铁

24、性贫血的诊断和疗效观察,缺铁性贫血时RDW增大,经治疗后可恢复正常。(2)用于小细胞低色素性贫血的鉴别,缺铁性贫血时RDW增大,而轻型珠蛋白生 成障碍性贫血时RDW正常。(3)RDW与MCV结合可将贫血分为6种。小细胞均一性:MCV下降,RDW正常,如轻型珠蛋白生成障碍性贫血。 小细胞不均一性:MCV下降,RDW增大,如缺铁性贫血。正常细胞均一性:MCV、RDW均正常,如某些慢性疾病。 正常细胞不均一性:MCV正常,RDW增大,如早期缺铁性贫血。大细胞均一性:MCV增大,RDW正常,如再生障碍性贫血。大细胞不均一性:MCV、RDW均增大,如巨幼细胞性贫血。8MPV、PDW、P-LCRMPV 其

25、临床意义要结合PLT的变化才二价值。、鉴别血小板减少的原因:当骨髓造血功能损伤致血小板减少时,MPV减少;当血小板在周围血液中破坏增多时,导致血小板减少,MPV增大;血小板分布异常致血小板减少时,MPC正常。、MPV增大可作为骨髓造血功能恢复的较早期指征:骨髓造血功能衰竭时,MPV与PLT同时持续下降;造血功能抑制越严重,MPV越小;当造血功能恢复时,MPV增大常先于PLT升高。、其它:MPV增大见于骨髓纤维化、ITP、血栓性疾病及血栓前状态、脾切除、慢粒、巨大血小板综合症、镰刀细胞性贫血;MPV减小见于脾亢、化疗后、AA、巨幼细胞性贫血等。PDW 是反映血小板体积大小的异质性参数,增大见于急

26、淋化疗后、巨幼细胞性贫血、脾切除、慢粒、巨大血小板综合症、血栓性疾病等;可用于鉴别原发性血小板增多症和反应性血小板增多症,前者PDW增加,后者PDW正常。P-LCR 代表血小板计数中体积 12fL的血小板的比值或数量,有助于识别堆集血小板、大血小板和细胞碎片,并可监测骨髓的造血功能。八、标本采集:随机采取病人静脉血,用40g/L EDTA-K2 抗凝(50ul抗凝1ml血,相当于2mgEDTAK2/1ml血)。九、注意事项:1、血细胞计数应用EDTA-K2为抗凝剂,用量为EDTA-K2*2H2O1.52.0mg可抗凝1ml血不能用肝素或枸橼酸钠等抗凝剂。2、采集后在室温中贮存不应超出6h;如需制用血涂片应在2h内完成。3、测定前抗凝血应充混匀,任何小凝块或血小板聚集均会影响血细胞计数。4、注意病理因素对血液分析仪使用的影响,特别是各系统的报警提示。如是否有大血小板对血小板计数的影响;有无有核红细胞对白细胞计数的影响等等。5、如有冷凝集现象,将血置37水浴箱10min后立即测试。

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