《生物化学ppt课件》12-RNA的生物合成.ppt

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1、学习目的与要求:1.RNA转录的概念,机制及过程 2.RNA转录酶的组成,特点及其作用 3.RNA转录后的加工修饰的方式 4.RNA的复制方式重点:1.RNA转录的机制及过程 2.启动子的组成,特点 3.终止子的特点及终止方式 4.RNA转录后的加工修饰方式难点:1.RNA转录后的加工修饰的方式 2.RNA转录的终止方式,在生物界,RNA合成有两种方式:一是DNA指导的RNA合成,生物体内的主要合成方式。另一种是RNA指导的RNA合成,此种方式常见于病毒。转录产生的初级转录本是RNA(RNAprecursor),需经加工过程(processing)方具有生物学活性。,第一节.DNA指导的RNA

2、合成,一.转录的概念,DNA携带的遗传信息(基因)传递给RNA分子的过程称转录(transcription)。,二.RNA转录的机制,1.不对称转录,不对称转录:转录时,双链DNA中只有一条链作为转录的模板,这种转录方式称作不对称转录。,模板链(template strand)及反意义链(antisense strand):指导RNA合成的DNA链为模板链,又称反意义链。编码链(coding strand)及有意义链(sense strand):不作为转录的另一条DNA链为编码链,又称有意义链。由于基因分布于不同的DNA单链中,即某条DNA单链对某个基因是模板链,而对另一个基因则是编码链。,R

3、NA在转录时每次只转录DNA上的一部分信息这种转录方式称作部分转录。,2.部分转录,转录产物的种类,三.RNA聚合酶(DDRP),(一).RNA聚合酶的性质,模板:单链DNA模板,底物:四种NTP,辅因子:Mg2+/Mn2+,合成方向:RNA 53,作用:连接方式 3,5磷酸二酯键,起始核苷酸:5末端的常为GTP或ATP,(二).原核生物(大肠杆菌)的RNA聚合酶,(三).真核生物的RNA聚合酶,四.启动子和转录因子,(一).启动子(Promoter),1.启动子的结构,2.真/原核生物启动子的结构特点,(二).转录因子,转录因子:RNA聚合酶起转录需要的蛋白质辅助因子,1.通用转录因子/基本

4、转录因子(GTF):识别起动子 如:TFII-X(X=A-F)6种 II类启动必需(RNA聚合酶II识别的),2.转录辅助因子:识别启动子上游元件,五.终止子和终止因子(terminater/terminators),(一).终止子的结构,(二).转录的终止方式,1.弱终止子:依赖因子(终止因子)的终止 NusA蛋白识别DNA链上的终止信号,在因子帮助终止。2.强终止子:(1)在终止点之前具有一段富含G-C的回文区域。(2)富含G-C的区域之后是一连串的dA碱基序列,它们转录的RNA链的末端为一连串U(连续6个)。,转录终止信号有两种情况,六.RNA转录的过程,(一).RNA转录的起始,1.核

5、心酶在亚基参与下,辩别启动子的识别部位 2.全酶与识别部位结合,滑向结合部位与模板紧密结合,解链3.滑向起始点,转录从起始点开始,合成第一个三磷酸核苷.,(二).RNA转录的延伸,1.亚基从全酶中解离 2.核心酶的构象发生变化,与模板DNA的结合变得较为松弛,以一定速度沿3,5,方向滑动 3.NTP为底物,在RNA链3,OH末端上生成磷酸二酯键,(三).RNA转录的终止,1.RNA聚合酶滑动到模板的终止部位时,酶的作用受阻2.RNA聚合酶核心酶模板上脱落3.RNA链释放,识别解链起始延伸终止,原核生物的mRNA转录后一般不需要加工,转录的同时即进行翻译(半寿期短)。,第二节、RNA转录后加工修

6、饰,一.真核mRNA前体的加工,1.5-末端加上帽子结构,0型:m7G5ppp5NpI型:m7G5ppp5NmpNpII型:m7G5ppp5NmpNmp,2.3-末端加上polyA结构,真核生物加上:150-200A原核生物加上:50-100A,3.拼接去除内含子,连接外显子,二.rRNA前体的转录后加工,rRNA基因之间以纵向串联的方式重复排列。加工过程:1.剪切作用:需核酸酶参与。2.甲基化修饰:修饰在碱基上。原核rRNA加工:rRNA含非转录的间隔区,其产物中含tRNA真核rRNA加工:1.5S自成体系加工少无修饰和剪接。2.45S加工中含剪切和甲基化修饰,需核酸酶。,1.原核生物rRNA前体加工,2.真核生物rRNA前体加工,三.tRNA前体的加工,tRNA前体在tRNA剪切酶的作用下,切成一定在小的tRNA分子,1.3-末端 5-末端及间隔区切除2.3-末端加上CCA3.碱基的修饰:甲基化、脱氨和还原作用,某些RNA病毒可以以自身RNA为模板进行复制。不同的RNA病毒复制方式不同,-RNA及+RNA的合成方向均为5 3,第三节、RNA的复制合成(RNA指导的RNA合成),如:+RNA的复制,

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